| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| ·附红细胞体的起源 | 第13页 |
| ·病原学研究 | 第13-15页 |
| ·流行病学研究 | 第15页 |
| ·致病性 | 第15-16页 |
| ·临床症状 | 第16页 |
| ·分子生物学研究 | 第16-17页 |
| ·诊断技术研究 | 第17-19页 |
| ·显微镜检 | 第17页 |
| ·血清学诊断 | 第17-18页 |
| ·分子生物学诊断 | 第18-19页 |
| ·动物接种试验 | 第19页 |
| ·预防和治疗 | 第19-20页 |
| 第二章 猪附红细胞体病PCR诊断方法的建立和初步临床应用 | 第20-38页 |
| ·研究目的和意义 | 第20页 |
| ·材料和方法 | 第20-26页 |
| ·质粒和菌株 | 第20页 |
| ·试剂和仪器 | 第20-21页 |
| ·主要试剂与溶液的配制 | 第21-22页 |
| ·血样的来源 | 第22页 |
| ·显微镜观察方法 | 第22页 |
| ·鲜血压片观察 | 第22页 |
| ·姬姆萨染色 | 第22页 |
| ·吖啶橙染色 | 第22页 |
| ·PCR诊断方法 | 第22-24页 |
| ·模板的提取 | 第22页 |
| ·引物的设计 | 第22页 |
| ·PCR反应体系及反应条件 | 第22-23页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第23页 |
| ·PCR产物的克隆、鉴定及序列测定 | 第23页 |
| ·PCR反应条件的优化 | 第23页 |
| ·PCR复性温度的选择 | 第23页 |
| ·PCR循环数的优化 | 第23页 |
| ·PCR的特异性试验 | 第23页 |
| ·PCR的敏感性试验 | 第23-24页 |
| ·临床应用 | 第24页 |
| ·半巢式PCR(Semi—nested PCR)诊断方法 | 第24-25页 |
| ·模板的提取 | 第24页 |
| ·引物的设计 | 第24页 |
| ·半巢式PCR反应体系及反应条件 | 第24-25页 |
| ·半巢式PCR反应条件的优化 | 第25页 |
| ·复性温度的确定 | 第25页 |
| ·PCR反应循环数的优化 | 第25页 |
| ·半巢式PCR反应的敏感性试验 | 第25页 |
| ·半巢式PCR反应的特异性试验 | 第25页 |
| ·几种检测方法的比较 | 第25-26页 |
| ·一次PCR、半巢式PCR检测方法的比较 | 第25-26页 |
| ·半巢式PCR检测方法和镜检方法的比较 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-34页 |
| ·显微镜检查猪附红体 | 第26-28页 |
| ·鲜血压片红细胞形态的观察 | 第26页 |
| ·姬姆萨染色结果的观察 | 第26-27页 |
| ·吖啶橙染色 | 第27-28页 |
| ·PCR检测方法结果 | 第28-32页 |
| ·PCR结果 | 第28-29页 |
| ·双酶切鉴定结果 | 第29页 |
| ·测序结果 | 第29-30页 |
| ·PCR反应条件的优化 | 第30-31页 |
| ·最佳复性温度的确定 | 第30页 |
| ·循环数梯度试验 | 第30-31页 |
| ·特异性试验结果 | 第31页 |
| ·PCR的敏感性试验 | 第31页 |
| ·临床应用结果 | 第31-32页 |
| ·半巢式PCR的检测结果 | 第32-33页 |
| ·半巢式PCR的条件优化 | 第32页 |
| ·半巢式PCR的敏感性试验 | 第32-33页 |
| ·半巢式PCR的特异性试验 | 第33页 |
| ·PCR、半巢PCR检测方法的比较结果 | 第33-34页 |
| ·几种PCR方法的比较 | 第33-34页 |
| ·半巢式PCR检测方法和镜检方法的比较 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-38页 |
| ·PCR方法对猪附红细胞体病的诊断 | 第34-35页 |
| ·对PCR反应条件的优化 | 第35页 |
| ·半巢式PCR方法诊断猪附红细胞体病的优越性 | 第35-36页 |
| ·镜检检查方法的假阳性和PCR检测方法的临床应用 | 第36-38页 |
| 第三章 试验性猪附红细胞体病的研究 | 第38-51页 |
| ·研究目的和意义 | 第38页 |
| ·材料和方法 | 第38-40页 |
| ·试剂和仪器 | 第38页 |
| ·实验动物 | 第38-39页 |
| ·实验动物的选择 | 第38页 |
| ·实验动物的去脾脏手术 | 第38-39页 |
| ·实验动物的分组及饲养管理 | 第39页 |
| ·动物感染 | 第39页 |
| ·血样的采集与处理 | 第39页 |
| ·临床症状和染虫率的镜检观察 | 第39页 |
| ·血液生化指标的检测 | 第39-40页 |
| ·血液生理指标的测定 | 第40页 |
| ·PCR检测 | 第40页 |
| ·数据处理 | 第40页 |
| ·结果 | 第40-48页 |
| ·体温曲线的变化 | 第40-41页 |
| ·临床症状的观察 | 第41-42页 |
| ·染虫率的变化 | 第42页 |
| ·血液生理指标的测定以及变化曲线 | 第42-45页 |
| ·红细胞(RBC)和血红蛋白数量(HGB)的变化 | 第42-44页 |
| ·红细胞平均体积(MCV)和红细胞分布宽度(RDW)的变化 | 第44-45页 |
| ·血液生化指标测定结果 | 第45-48页 |
| ·血清葡萄糖浓度变化 | 第45页 |
| ·谷草转氨酶和谷丙转氨酶的变化 | 第45-46页 |
| ·乳酸脱氢酶的变化 | 第46-47页 |
| ·总胆红素的变化 | 第47页 |
| ·肌酸激酶(CK)的变化 | 第47-48页 |
| ·PCR的检测结果 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| ·对猪附红细胞体病的复制 | 第48页 |
| ·分组与感染情况 | 第48-49页 |
| ·临床症状的出现 | 第49页 |
| ·试验猪的贫血状况 | 第49-50页 |
| ·感染E.suis对于猪体内器官的损伤 | 第50页 |
| ·附红体对于葡萄糖的利用 | 第50页 |
| ·对附红体的怀疑 | 第50-51页 |
| 第四章 牛附红细胞体16S rRNA gene的克隆和系统发育分析 | 第51-67页 |
| ·目的和意义 | 第51页 |
| ·材料和方法 | 第51-53页 |
| ·病原采集 | 第51页 |
| ·试剂与仪器 | 第51页 |
| ·牛附红细胞体的分离与纯化 | 第51-52页 |
| ·模板的提取 | 第52页 |
| ·引物的设计 | 第52页 |
| ·PCR的反应体系和条件 | 第52页 |
| ·PCR产物的回收、纯化和克隆 | 第52页 |
| ·重组质粒的鉴定及序列测定 | 第52-53页 |
| ·序列同源性的比较和系统进化分析 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-65页 |
| ·PCR扩增结果 | 第53-54页 |
| ·重组质粒构建和鉴定结果 | 第54-55页 |
| ·阳性克隆的SalⅠ和MIuⅠ双酶切鉴定 | 第54页 |
| ·阳性克隆的EcoRⅠ和SalⅠ酶切鉴定 | 第54-55页 |
| ·重组质粒序列测定结果及种类确定 | 第55-62页 |
| ·系统进化树的建立和分析结果 | 第62-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| ·通用引物扩增以及质粒的鉴定 | 第65页 |
| ·附红细胞体的种类及分类 | 第65-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 附录 | 第75页 |
