| 列表 | 第1-8页 |
| 列图 | 第8-9页 |
| 英文缩略词 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-20页 |
| ·立题背景 | 第13-14页 |
| ·血管抑素国内外研究近况 | 第14-17页 |
| ·血管抑素的分子结构及生成机制 | 第14-16页 |
| ·血管抑素的作用机制 | 第16-17页 |
| ·血管抑素的结合分子 | 第16-17页 |
| ·血管抑素的靶细胞 | 第17页 |
| ·血管抑素的应用进展 | 第17页 |
| ·立题意义 | 第17-19页 |
| ·主要研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 重组人血管抑素的表达纯化及复性研究 | 第20-31页 |
| ·前言 | 第20页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·菌种和质粒 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·主要材料 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-25页 |
| ·重组人血管抑素(rhAS)的原核表达 | 第22-23页 |
| ·CaCl_2 法制备感受态细胞 | 第22页 |
| ·质粒pQE30(Angiostatin)的转化 | 第22-23页 |
| ·rhAS 的表达及优化 | 第23页 |
| ·rhAS 的制备 | 第23页 |
| ·重组人血管抑素(rhAS)的生化鉴定 | 第23-24页 |
| ·rhAS 表达的SDS-PAGE 分析 | 第23-24页 |
| ·Western-blot 鉴定 | 第24页 |
| ·重组人血管抑素的复性纯化 | 第24-25页 |
| ·rhAS 包涵体的纯化 | 第24页 |
| ·rhAS 包涵体的变性及复性优化 | 第24-25页 |
| ·结果与讨论 | 第25-30页 |
| ·rhAS 的表达及优化 | 第25-27页 |
| ·包涵体纯化及rhAS 复性优化 | 第27-30页 |
| ·本章小结 | 第30-31页 |
| 第三章 重组人血管抑素的生物学活性研究 | 第31-38页 |
| ·前言 | 第31页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·细胞株 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31-32页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-34页 |
| ·rhAS 对HMEC-1 细胞抑制试验 | 第32-33页 |
| ·HMEC-1 细胞及L-02 细胞的培养 | 第32-33页 |
| ·MTT 法测定rhAS 对HMEC-1 的抑制 | 第33页 |
| ·rhAS 诱导HMEC-1 细胞凋亡试验 | 第33页 |
| ·鸡胚尿囊膜(CAM)试验 | 第33-34页 |
| ·鸡胚制备 | 第33页 |
| ·给药方法 | 第33-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-37页 |
| ·rhAS 对HMEC-1 细胞抑制试验 | 第34页 |
| ·rhAS 诱导HMEC-1 细胞凋亡试验 | 第34-35页 |
| ·鸡胚尿囊膜(CAM)试验 | 第35-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第四章 重组人血管抑素的药效学研究 | 第38-44页 |
| ·前言 | 第38-39页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·细胞株 | 第39页 |
| ·培养基 | 第39页 |
| ·实验动物 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-40页 |
| ·荷人胰腺癌裸鼠模型的建立 | 第39-40页 |
| ·荷人胰腺癌裸鼠模型的干预研究 | 第40页 |
| ·荷人胰腺癌裸鼠模型的组织形态学分析 | 第40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-43页 |
| ·荷人胰腺癌裸鼠模型的建立 | 第40-41页 |
| ·荷人胰腺癌裸鼠模型的干预试验 | 第41-42页 |
| ·荷人胰腺癌裸鼠模型的组织形态学分析 | 第42-43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 第五章 重组人血管抑素ELISA 检测方法的建立及初步应用 | 第44-50页 |
| ·前言 | 第44-45页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·动物 | 第45页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·ELISA 检测方法的建立 | 第45-46页 |
| ·兔抗-rhAS 的制备 | 第45-46页 |
| ·ELISA 检测方法的建立 | 第46页 |
| ·ELISA 检测方法的应用 | 第46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-49页 |
| ·兔抗-rhAS 的制备 | 第46-47页 |
| ·血管抑素ELISA 检测方法的建立 | 第47-48页 |
| ·血管抑素ELISA 检测方法的应用 | 第48-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 第六章 重组人血管抑素作用特异性的研究 | 第50-71页 |
| ·前言 | 第50-51页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·细胞株 | 第51页 |
| ·培养基 | 第51页 |
| ·实验动物 | 第51页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·主要仪器 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-58页 |
| ·流式细胞术(FCM) | 第52-54页 |
| ·缓冲液 | 第52-53页 |
| ·FITC 标记rhAS 及兔抗-rhAS | 第53页 |
| ·流式细胞术细胞准备 | 第53页 |
| ·流式细胞术测量 | 第53-54页 |
| ·亲和层析法纯化HMEC-1细胞上rhAS结合分子 | 第54-55页 |
| ·缓冲液 | 第54页 |
| ·rhAS-Sepharose 48 亲和柱的制备 | 第54页 |
| ·HMEC-1 细胞的裂解 | 第54页 |
| ·亲和层析法纯化HMEC-1 细胞上rhAS 结合分子 | 第54-55页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定 | 第55页 |
| ·质谱测序分析 | 第55页 |
| ·rhAS 结合分子的信息学分析 | 第55页 |
| ·蛋白跨膜预测 | 第55页 |
| ·蛋白相互作用分析 | 第55页 |
| ·Tubulin 的作用分析 | 第55-56页 |
| ·rhAS 的~(99)Tc~m标记 | 第56页 |
| ·Na~(99)Tc~mO_4 的制备 | 第56页 |
| ·~(99)Tcm-rhAS 的制备 | 第56页 |
| ·三氯乙酸(TCA)沉淀法测定标记率 | 第56页 |
| ·质量控制 | 第56页 |
| ·小鼠体内生物学分布 | 第56-57页 |
| ·小鼠S180 肿瘤模型显像、放射自显影及组织形态学分析 | 第57页 |
| ·小鼠S180 肿瘤模型的建立 | 第57页 |
| ·小鼠S180 肿瘤模型显像 | 第57页 |
| ·小鼠S180 肿瘤放射自显影 | 第57页 |
| ·小鼠S180 肿瘤组织形态学分析 | 第57页 |
| ·大鼠Matrigel 模型显像及组织形态学分析 | 第57-58页 |
| ·大鼠Matrigel 模型的建立 | 第57-58页 |
| ·大鼠Matrigel 模型显像 | 第58页 |
| ·大鼠Matrigel 模型组织形态学分析 | 第58页 |
| ·小鼠Matrigel 模型放射自显影及组织形态学分析 | 第58页 |
| ·小鼠Matrigel 模型的建立 | 第58页 |
| ·小鼠Matrigel 模型放射自显影 | 第58页 |
| ·小鼠Matrigel 模型组织形态学分析 | 第58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-70页 |
| ·流式细胞术(FCM) | 第58-59页 |
| ·亲和层析法纯化HMEC-1 细胞上rhAS 结合分子 | 第59-61页 |
| ·质谱测序分析 | 第61-62页 |
| ·rhAS 结合分子信息学分析 | 第62-64页 |
| ·Tubulin 的作用分析 | 第64-65页 |
| ·~(99)Tc~m-rhAS 的制备 | 第65页 |
| ·小鼠体内生物学分布 | 第65页 |
| ·小鼠5180 肿瘤模型显像 | 第65-66页 |
| ·小鼠5180 肿瘤放射自显影及组织形态学分析 | 第66-67页 |
| ·大鼠Matrigel 模型显像及形态学分析 | 第67-69页 |
| ·小鼠Matrigel模型放射自显影及形态学分析 | 第69-70页 |
| ·本章小结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-82页 |
| 总结 | 第82页 |
| 主要创新点 | 第82-83页 |
| 博士研究生期间发表论文 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 附录Ⅰ | 第85-87页 |
| 附录Ⅱ | 第87-91页 |
| 附录Ⅲ | 第91-92页 |
| 附录Ⅳ | 第92-107页 |
