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矮生梨‘中矮1号GA2-oxidase基因的克隆与功能分析

摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第一章 文献综述第15-26页
   ·研究背景第15-17页
   ·关于赤霉素国内外研究进展第17-25页
     ·赤霉素的发现、构成及生理作用第17-18页
     ·赤霉素合成代谢途径第18-20页
     ·赤霉素合成及代谢途径关键酶及基因第20-25页
   ·研究的目的、意义第25-26页
第二章 梨 GA2-oxidase 基因的克隆及序列分析第26-38页
   ·材料与试剂第26页
     ·试验材料第26页
     ·菌株及载体第26页
     ·酶及生化试剂第26页
   ·试验方法第26-31页
     ·梨叶片 RNA 提取第26-28页
     ·RNA 反转录第28-29页
     ·梨‘中矮 1 号’GA2-oxidase 基因 cDNA 全序列的获得第29-31页
     ·序列分析第31页
     ·‘早酥’和‘锦香’GA2-oxidase 基因的获得及序列比对第31页
   ·结果分析第31-37页
   ·讨论第37-38页
     ·反转录的完整性及彻底性第37页
     ·引物设计及 PCR 体系优化第37-38页
第三章 梨 GA2-oxidase 基因的表达分析第38-52页
   ·材料和试剂第38页
     ·试验材料第38页
     ·酶及其他生化试剂第38页
     ·菌株及载体第38页
   ·试验方法第38-41页
     ·总 RNA 提取及反转录第38-39页
     ·引物设计第39页
     ·梨 GA2-oxidase 基因表达分析第39-41页
   ·结果分析第41-49页
     ·总 RNA 提取第41-42页
     ·荧光定量条件优化第42-44页
     ·梨 GA2-oxidase 基因在新梢嫩叶的 RT-PCR 表达分析第44-45页
     ·梨 GA2-oxidase 基因在枝条韧皮组织的 RT-PCR 表达分析第45-46页
     ·梨 GA2-oxidase 基因在嫩叶和枝条韧皮组织中表达量关系分析第46-47页
     ·试验材料生长动态与 GA2-oxidase 基因表达关系分析第47-49页
   ·讨论第49-52页
     ·引物设计第49页
     ·RNA 质量对试验结果影响第49-50页
     ·定量 PCR 反应体系优化第50页
     ·GA2-oxidase 基因的表达、运输及其对植株生长势的影响第50-52页
第四章 GA2-oxidase 基因植物表达载体的构建第52-59页
   ·材料和试剂第52页
     ·植物材料及菌株第52页
     ·酶及生化试剂第52页
   ·方法第52-55页
     ·含限制性酶切位点的梨 GA2-oxidase 基因的克隆第52-53页
     ·梨 GA2-oxidase 基因植物表达载体的构建第53-54页
     ·根癌农杆菌 EHA105 感受态细胞的制备、转化第54-55页
   ·结果与分析第55-57页
     ·植物表达载体 pCAMBIA1304-GA2ox 的构建第55-56页
     ·重组质粒转化根癌农杆菌菌株 EHA105第56-57页
   ·讨论第57-59页
     ·酶切体系的确立第57-59页
第五章 结论第59-60页
参考文献第60-70页
致谢第70-71页
作者简历第71页

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