中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-11页 |
第一章 SARS 冠状病毒与动物冠状病毒的分子生物学研究进展 | 第11-17页 |
·冠状病毒的一般特性 | 第11-12页 |
·冠状病毒的分子生物学特性 | 第12-15页 |
·SARS-CoV 与动物冠状病毒相关性比较分析 | 第15-17页 |
第二章 冠状病毒感染性全长cDNA 克隆研究进展 | 第17-23页 |
·冠状病毒基因组全长cDNA 克隆的构建 | 第17-18页 |
·构建冠状病毒感染性全长cDNA 克隆的关键环节 | 第18-21页 |
·冠状病毒感染性全长cDNA 克隆的应用 | 第21页 |
·小结与展望 | 第21-23页 |
第三章 SARS 病毒BJ01 株全基因组cDNA 的扩增及亚克隆的构建 | 第23-38页 |
·材料 | 第24-25页 |
·病毒株、细胞株、载体与菌株 | 第24页 |
·工具酶及主要试剂 | 第24页 |
·主要仪器设备 | 第24页 |
·主要培养基及缓冲液 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-30页 |
·引物设计与合成 | 第25-26页 |
·总RNA 的提取 | 第26页 |
·反转录合成第一链cDNA | 第26-27页 |
·长链PCR 扩增条件的优化 | 第27页 |
·病毒基因组cDNA 的分段扩增 | 第27页 |
·感受态细胞的制备与转化 | 第27-29页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第29-30页 |
·重组质粒的序列测定与分析 | 第30页 |
·结果 | 第30-36页 |
·SARS 病毒 BJ01 株cDNA 片段的长链 PCR 扩增条件的优化 | 第30-31页 |
·BJ01 株病毒全基因组cDNA 的分段扩增 | 第31页 |
·BJ01 株病毒基因组亚cDNA 克隆的构建与鉴定 | 第31-35页 |
·BJ01 株病毒基因组亚cDNA 克隆的序列测定 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
第四章 SARS 病毒 BJ01 株全长cDNA 的构建及其转录体感染性观察 | 第38-55页 |
·材料 | 第38-39页 |
·重组质粒与细胞株 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
·主要仪器设备 | 第38页 |
·主要试剂及培养基的配制 | 第38-39页 |
·方法 | 第39-45页 |
·重组质粒的大量提取和纯化 | 第39-41页 |
·目的基因片段的制备 | 第41页 |
·病毒基因组半分子cDNA 的体外构建与鉴定 | 第41-43页 |
·全长cDNA 分子的体外连接与鉴定 | 第43页 |
·全长cDNA 分子的体外转录及转录体感染性观察 | 第43-45页 |
·结果 | 第45-53页 |
·SARS-CoV BJ01 株基因组cDNA 片段的制备 | 第45页 |
·BJ01 株病毒基因组5′和3′端半分子cDNA 的构建与鉴定 | 第45-48页 |
·BJ01 株病毒基因组全长cDNA 分子的体外连接与鉴定 | 第48-50页 |
·SARS 病毒基因组全长cDNA 体外转录体的制备及其感染性观察 | 第50-52页 |
·恢复病毒的分子生物学鉴定 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-55页 |
总结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
作者简介 | 第74页 |