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SARS冠状病毒BJ01株全长cDNA的构建及其转录体感染性观察

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-11页
第一章 SARS 冠状病毒与动物冠状病毒的分子生物学研究进展第11-17页
   ·冠状病毒的一般特性第11-12页
   ·冠状病毒的分子生物学特性第12-15页
   ·SARS-CoV 与动物冠状病毒相关性比较分析第15-17页
第二章 冠状病毒感染性全长cDNA 克隆研究进展第17-23页
   ·冠状病毒基因组全长cDNA 克隆的构建第17-18页
   ·构建冠状病毒感染性全长cDNA 克隆的关键环节第18-21页
   ·冠状病毒感染性全长cDNA 克隆的应用第21页
   ·小结与展望第21-23页
第三章 SARS 病毒BJ01 株全基因组cDNA 的扩增及亚克隆的构建第23-38页
   ·材料第24-25页
     ·病毒株、细胞株、载体与菌株第24页
     ·工具酶及主要试剂第24页
     ·主要仪器设备第24页
     ·主要培养基及缓冲液第24-25页
   ·方法第25-30页
     ·引物设计与合成第25-26页
     ·总RNA 的提取第26页
     ·反转录合成第一链cDNA第26-27页
     ·长链PCR 扩增条件的优化第27页
     ·病毒基因组cDNA 的分段扩增第27页
     ·感受态细胞的制备与转化第27-29页
     ·重组质粒的筛选与鉴定第29-30页
     ·重组质粒的序列测定与分析第30页
   ·结果第30-36页
     ·SARS 病毒 BJ01 株cDNA 片段的长链 PCR 扩增条件的优化第30-31页
     ·BJ01 株病毒全基因组cDNA 的分段扩增第31页
     ·BJ01 株病毒基因组亚cDNA 克隆的构建与鉴定第31-35页
     ·BJ01 株病毒基因组亚cDNA 克隆的序列测定第35-36页
   ·讨论第36-38页
第四章 SARS 病毒 BJ01 株全长cDNA 的构建及其转录体感染性观察第38-55页
   ·材料第38-39页
     ·重组质粒与细胞株第38页
     ·主要试剂第38页
     ·主要仪器设备第38页
     ·主要试剂及培养基的配制第38-39页
   ·方法第39-45页
     ·重组质粒的大量提取和纯化第39-41页
     ·目的基因片段的制备第41页
     ·病毒基因组半分子cDNA 的体外构建与鉴定第41-43页
     ·全长cDNA 分子的体外连接与鉴定第43页
     ·全长cDNA 分子的体外转录及转录体感染性观察第43-45页
   ·结果第45-53页
     ·SARS-CoV BJ01 株基因组cDNA 片段的制备第45页
     ·BJ01 株病毒基因组5′和3′端半分子cDNA 的构建与鉴定第45-48页
     ·BJ01 株病毒基因组全长cDNA 分子的体外连接与鉴定第48-50页
     ·SARS 病毒基因组全长cDNA 体外转录体的制备及其感染性观察第50-52页
     ·恢复病毒的分子生物学鉴定第52-53页
   ·讨论第53-55页
总结第55-56页
参考文献第56-73页
致谢第73-74页
作者简介第74页

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