| 第一章 文献综述 | 第1-34页 |
| 1 稻瘟病菌 | 第12页 |
| 2 稻瘟病菌的侵染循环 | 第12-13页 |
| 3 稻瘟病菌附着胞形成过程 | 第13-15页 |
| 4 附着胞形成的相关基因及调控途径 | 第15-27页 |
| ·黑色素基因 | 第16页 |
| ·附着胞形成的外界诱导信号及内部相关基因 | 第16-18页 |
| ·参与附着胞形成的信号途径 | 第18-24页 |
| ·G蛋白耦连的信号途径 | 第18页 |
| ·cAMP信号途径 | 第18-20页 |
| ·Ca~(2+)离子途径 | 第20-21页 |
| ·MAPK信号途经 | 第21-24页 |
| ·附着胞穿透 | 第24-26页 |
| ·穿透后生长扩展阶段 | 第26-27页 |
| 5 稻瘟病菌致病相关基因的研究方法 | 第27-33页 |
| ·构建稻瘟病菌突变子库 | 第27-28页 |
| ·目标突变技术 | 第28页 |
| ·cDNA文库构建及测序分析 | 第28-29页 |
| ·基因表达系列分析 | 第29页 |
| ·抑制消减杂交技术 | 第29-33页 |
| ·抑制差减杂交技术的基本原理及主要步骤 | 第30页 |
| ·SSH技术的优点 | 第30-33页 |
| 6 本研究的目的和内容 | 第33-34页 |
| 第二章 稻瘟病菌附着胞总RNA的提取及cDNA合成 | 第34-46页 |
| 1 材料和方法 | 第34-40页 |
| ·试验菌株、产孢培养和附着胞诱导 | 第34-35页 |
| ·试验菌株 | 第34页 |
| ·产孢培养、孢子收集和附着胞诱导培养： | 第34页 |
| ·菌丝培养： | 第34-35页 |
| ·试剂和培养基 | 第35页 |
| ·RNA提取和分析 | 第35-37页 |
| ·附着胞RNA的提取 | 第35-36页 |
| ·稻瘟病菌孢子、菌丝总RNA的提取和分析 | 第36-37页 |
| ·长距离PCR法合成附着胞cDNA | 第37-39页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第37-38页 |
| ·长距离PCR法cDNA扩增 | 第38-39页 |
| ·蛋白酶K消化 | 第39页 |
| ·长距离PCR法合成菌丝cDNA(同1.4) | 第39-40页 |
| 2 结果和分析 | 第40-43页 |
| ·分生孢子浓度对附着胞形成的影响 | 第40页 |
| ·稻瘟病菌附着胞的诱导培养 | 第40-41页 |
| ·附着胞和菌丝、孢子的RNA提取 | 第41-42页 |
| ·附着胞总RNA的提取 | 第41页 |
| ·菌丝、孢子RNA的提取 | 第41-42页 |
| ·附着胞和菌丝、孢子ds cDNA合成 | 第42-43页 |
| ·附着胞cDNA的合成 | 第42-43页 |
| ·菌丝、孢子cDNA的合成 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| ·稻瘟病菌附着胞诱导效率 | 第43-44页 |
| ·附着胞RNA的提取 | 第44页 |
| ·cDNA的合成策略 | 第44-45页 |
| 4 本章小结 | 第45-46页 |
| 第三章 稻瘟病菌附着胞SSH差减文库的构建 | 第46-73页 |
| 1 材料和方法 | 第46-56页 |
| ·cDNA | 第46页 |
| ·Tester cDNA(附着胞cDNA，第二章合成) | 第46页 |
| ·Driver cDNA(菌丝、孢子cDNA，第二章合成) | 第46页 |
| ·试剂和培养基 | 第46页 |
| ·Alu I限制性内切酶消化 | 第46-47页 |
| ·接头连接 | 第47-48页 |
| ·第一次差减杂交 | 第48-49页 |
| ·第二次差减杂交 | 第49-50页 |
| ·PCR扩增 | 第50-51页 |
| ·PCR反应液与pBS-T载体的连接 | 第51页 |
| ·大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备 | 第51-52页 |
| ·感受态细胞的转化 | 第52-53页 |
| ·X-gal和IPTG直接用于琼脂平板 | 第53页 |
| ·CTAB法抽提质粒 | 第53-54页 |
| ·重组质粒的测序和EST序列分析 | 第54-55页 |
| ·稻瘟病菌附着胞cDNA差减文库EST序列登录在GenBank中 | 第55页 |
| ·SSH差减文库克隆的RT-PCR分析 | 第55-56页 |
| 2 结果和分析 | 第56-66页 |
| ·差减杂交cDNA的第一次PCR扩增结果 | 第56页 |
| ·差减杂交cDNA的第二次PCR扩增结果 | 第56-57页 |
| ·PCR产物与pBS-T载体的连接、转化和重组质粒提取 | 第57页 |
| ·测序结果分析 | 第57-62页 |
| ·RT-PCR验证SSH差减基因在附着胞中的表达特异性 | 第62-63页 |
| ·43KD的DNA片段 | 第63-64页 |
| ·部分基因敲出载体的构建 | 第64-66页 |
| 3 讨论 | 第66-71页 |
| ·SSH文库的构建 | 第66-67页 |
| ·过氧化物酶体基因与乙醛酸循环 | 第67-69页 |
| ·与附着胞形成和致病性有关的基因 | 第69页 |
| ·与其它文库结果的比较 | 第69-70页 |
| ·附着胞特异表达基因簇 | 第70-71页 |
| 4 本章小结 | 第71-73页 |
| 附录 | 第73-81页 |
| 附录1：CM固体(液体)培养基配方 | 第73页 |
| 附录2：LB液体培养基： | 第73-74页 |
| 附录3：SOB液体培养基： | 第74页 |
| 附录4：RT-PCR引物 | 第74-80页 |
| 附录4：在读硕士期间所发表的论文 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-88页 |
