| 目录 | 第1-7页 |
| 第一部分 香蕉果实成熟相关基因的克隆和表达分析 | 第7-50页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-24页 |
| 1 香蕉概述 | 第10-12页 |
| ·香蕉的分类地位及种类 | 第10页 |
| ·香蕉的生物学特性 | 第10页 |
| ·香蕉的经济价值 | 第10-11页 |
| ·香蕉采后内外品质的变化 | 第11-12页 |
| ·果实色泽 | 第11页 |
| ·果实硬度 | 第11-12页 |
| ·糖含量 | 第12页 |
| 2 果实成熟分子生理的研究进展 | 第12-18页 |
| ·乙烯与果实成熟 | 第12-13页 |
| ·细胞壁代谢和变软 | 第13-18页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶(PG) | 第14页 |
| ·EGase | 第14-15页 |
| ·果胶酯酶(pectinesterase，PE) | 第15页 |
| ·其他细胞壁水解酶 | 第15页 |
| ·膨大素 | 第15-16页 |
| ·水解酶功能的分析 | 第16-18页 |
| 3 香蕉果实采后生理学及分子生物学研究现状 | 第18-23页 |
| ·香蕉采后生理学的研究 | 第18页 |
| ·分离与鉴定香蕉采后成熟相关基因 | 第18-23页 |
| ·采后果实乙烯生物合成相关基因克隆和调控 | 第18-19页 |
| ·采用差异筛选方法分离果实成熟相关基因 | 第19-20页 |
| ·重要基因的克隆与表达 | 第20-23页 |
| 4 目的和意义 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的 | 第23页 |
| ·本研究的技术路线(图1-1) | 第23-24页 |
| 第二章 香蕉果实cDNA文库筛选 | 第24-31页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第24页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| 2 试验方法 | 第24-28页 |
| ·引物的设计 | 第24页 |
| ·香蕉果实cDNA文库的筛选步骤 | 第24-28页 |
| ·六个cDNA文库的初步筛选(对六个库进行PCR扩增) | 第24-25页 |
| ·96孔板培养及列筛选 | 第25页 |
| ·孔PCR | 第25页 |
| ·第二轮筛选 | 第25-26页 |
| ·铺平板 | 第26页 |
| ·噬菌体斑的鉴定] | 第26-27页 |
| ·转入E.coliBM2.5.8 | 第27页 |
| ·质粒DNA的微量提取 | 第27页 |
| ·PCR鉴定 | 第27-28页 |
| ·序列测定 | 第28页 |
| ·序列分析 | 第28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-31页 |
| ·测序结果(1016bp，测序图见附录1) | 第28页 |
| ·序列分析 | 第28-31页 |
| ·该片断与苏伟的SSH片断比对结果: | 第28页 |
| ·BLASTn比对结果 | 第28-29页 |
| ·BLASTx比对结果 | 第29页 |
| ·推测氨基酸序列 | 第29-30页 |
| ·PROPSEARCH在线分析 | 第30页 |
| ·NCBI上的保守结构域分析 | 第30-31页 |
| 第三章 Southern杂交分析 | 第31-36页 |
| 1 材料与试剂 | 第31页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| 2 方法 | 第31-35页 |
| ·香蕉基因组DNA的提取(SDS法) | 第31-32页 |
| ·基因组DNA的Hind Ⅲ限制性内切酶消化 | 第32页 |
| ·探针的标记 | 第32-33页 |
| ·提取质粒 | 第32页 |
| ·从质粒中扩增目的片断 | 第32页 |
| ·回收目的片断 | 第32-33页 |
| ·标记探针 | 第33页 |
| ·DNA的印记转移 | 第33-34页 |
| ·Southern杂交 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-36页 |
| 第四章 Northern杂交分析 | 第36-41页 |
| 1 材料与试剂 | 第36页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36页 |
| 2 方法 | 第36-39页 |
| ·香蕉果实总RNA的提取 | 第36-37页 |
| ·同位素探针的标记 | 第37-38页 |
| ·Northern杂交 | 第38-39页 |
| ·RNA电泳及印迹转移 | 第38-39页 |
| ·Norhtern杂交 | 第39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-41页 |
| 第五章 结论 | 第41-42页 |
| 第六章 讨论 | 第42-44页 |
| 1 筛库方法 | 第42-43页 |
| 2 果实采后糖代谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 第二部分 橡胶乙烯受体基因的克隆 | 第50-92页 |
| 摘要 | 第51-52页 |
| Abstract | 第52-53页 |
| 第-章 文献综述 | 第53-67页 |
| 1 概述 | 第53-55页 |
| ·橡胶及天然橡胶 | 第53-54页 |
| ·乙烯利在橡胶中的应用 | 第54-55页 |
| ·应用 | 第54页 |
| ·乙烯利的应用对橡胶树的影响 | 第54页 |
| ·橡胶树乙烯伤害的发生机制 | 第54-55页 |
| 2 橡胶树生物学研究进展 | 第55-67页 |
| ·天然橡胶的生物合成 | 第55-57页 |
| ·天然橡胶的生物合成途径 | 第55页 |
| ·橡胶粒子的形成 | 第55-56页 |
| ·乙烯与橡胶的生物合成 | 第56-57页 |
| ·橡胶树分子生物学研究概况 | 第57-60页 |
| ·从橡胶树中克隆的基因或cDNA | 第57-59页 |
| ·橡胶延长因子基因 | 第57-58页 |
| ·HMG-CoA还原酶基因 | 第58-59页 |
| ·法兰呢基二磷酸合成酶基因 | 第59页 |
| ·橡胶小粒子蛋白(small rubber particle protein，SRPP)基因 | 第59页 |
| ·含锰的超氧化物歧化酶(MnSOD) | 第59页 |
| ·橡胶树胶乳中的基因表达 | 第59-60页 |
| 3 植物对乙烯的感受及乙烯信号的转导研究进展 | 第60-65页 |
| ·乙烯的生物合成 | 第60-61页 |
| ·植物对乙烯的感受 | 第61页 |
| ·乙烯信号转导途径的遗传学和生物化学分析 | 第61-63页 |
| ·乙烯不敏感突变体 | 第61-62页 |
| ·组成型“三重反应”突变体 | 第62页 |
| ·ETR1蛋白 | 第62页 |
| ·ERS蛋白 | 第62-63页 |
| ·CTR1蛋白 | 第63页 |
| ·乙烯信号转导的模式 | 第63页 |
| ·已克隆的etr1 DNA或cDNA | 第63-64页 |
| ·结论与展望 | 第64页 |
| ·橡胶中乙烯生物合成及信号转导 | 第64-65页 |
| 4 目的意义和技术路线 | 第65-67页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第65-66页 |
| ·本研究的技术路线 | 第66-67页 |
| 第二章 巴西橡胶树乙烯受体基因的克隆 | 第67-76页 |
| 1 材料与方法 | 第67页 |
| ·试验材料 | 第67页 |
| ·菌种和试剂 | 第67页 |
| 2 方法 | 第67-71页 |
| ·橡胶胶乳总RNA的提取 | 第67-68页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第68-69页 |
| ·引物设计与合成 | 第69页 |
| ·Rapid Amplification of cDNA Ends(RACE)扩增etr1 3’端 | 第69-70页 |
| ·RACE产物的克隆及重组子筛选 | 第70页 |
| ·回收特异性条带 | 第70页 |
| ·连接T-Vector | 第70页 |
| ·大肠杆菌E.coli DH5α感受态细胞的制备及连接产物的转化 | 第70页 |
| ·质粒DNA的微量提取 | 第70页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第70页 |
| ·克隆片断的测序 | 第70页 |
| ·序列分析 | 第70-71页 |
| 3 结果与分析 | 第71-76页 |
| ·核苷酸序列的测定 | 第72-73页 |
| ·序列分析 | 第73-76页 |
| ·克隆片段的核苷酸序列同源性分析 | 第73页 |
| ·根据克隆片段核苷酸序列推导的AA序列同源性分析 | 第73-74页 |
| ·序列的聚类分析 | 第74-76页 |
| 第三章 etr1在不同橡 | 第76-80页 |
| 胶树品系中的Southern blot分析 | 第76-80页 |
| 1 材料方法和仪器 | 第76页 |
| ·试验材料 | 第76页 |
| ·试剂 | 第76页 |
| 2 方法 | 第76-78页 |
| ·橡胶树叶片基因组DNA的提取 | 第76-77页 |
| ·基因组DNA的EcoRI，HindⅢ内切酶消化 | 第77-78页 |
| ·探针的标记 | 第78页 |
| ·质粒的提取 | 第78页 |
| ·目的片断的扩增 | 第78页 |
| ·目的片断的回收 | 第78页 |
| ·探针标记反应 | 第78页 |
| ·DNA的印迹转移、Southern杂交 | 第78页 |
| 3 结果与分析 | 第78-80页 |
| 第四章 结论 | 第80-81页 |
| 第五章 讨论 | 第81-85页 |
| 参考文献 | 第85-92页 |
| 附录 | 第92-98页 |
| 附录1: 测序图 | 第92-97页 |
| 附录2 | 第97-98页 |
| 缩写词(Abbreviation) | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
