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α-淀粉酶原因的体外定向进化研究

目  录第1-6页
摘要第6-7页
1 文献综述第7-23页
   ·a-淀粉酶的研究概况第-2-10页
     ·a-淀粉酶的作用机理和分类第-2页
     ·a-淀粉酶的主要产生菌第-2-7页
     ·a-淀粉酶主要用途与展望第7-9页
     ·a-淀粉酶基因的结构特点第9-10页
     ·a-淀粉酶基因的国内研究现状第10页
   ·定向进化的研究概况第10-21页
     ·定向进化的基本原理第11页
     ·定向进化的策略第11-18页
     ·定向进化技术的选择策略第18-19页
     ·定向进化中存在的问题及应对措施第19-20页
     ·定向进化在实践中的应用及发展趋势第20-21页
   ·5-溴尿嘧啶的诱变机制及应用策略第21-23页
   ·1  5-溴尿嘧啶的诱变机制第22页
   ·2  5-溴尿嘧啶的应用策略第22-23页
2 引言第23-24页
3 材料和方法第24-31页
   ·实验材料第24-25页
   ·1 菌种与质粒载体第24页
   ·2 PCR引物第24-25页
   ·3 工具酶与DNA分子量标准第25页
   ·4 其他分子生物学试剂与生化试剂第25页
   ·5 主要试验仪器第25页
   ·实验方法第25-31页
4 结果与分析第31-53页
   ·质粒的抽提第31页
   ·质粒的验证第31-33页
   ·PCR条件的选择第33-34页
   ·酶切与酶连第34-37页
   ·转化第37页
   ·新菌株的筛选与鉴定第37-40页
   ·新菌株酶活测定第40-42页
   ·新基因的序列测定与分析第42-53页
5 结论和讨论第53-56页
   ·结论第53-54页
     ·5个高酶活诱变基因的获得第53页
     ·5-溴脱氧尿苷三磷酸最佳掺入浓度的验证第53-54页
     ·突变位点与酶功能关系分析第54页
     ·最佳PCR条件的获得第54页
     ·最佳酶连条件的获得第54页
     ·细胞破碎条件的选择第54页
   ·讨论第54-56页
     ·突变基因的酶活提高程度及回复突变第54-55页
     ·5-溴脱氧尿苷三磷酸诱变机制的矛盾第55页
     ·诱变后的新菌株的发酵液酸度的变化第55页
     ·5-BrdUTP掺入诱变方法与传统的PCR方法的比较第55-56页
参考文献第56-61页
英文摘要第61页

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