南极土壤中多环芳烃（PAHs）降解菌的研究：分离、鉴定和降解基因的检测
| 目录 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 中文缩略词 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| ·环境中 PAHs 的主要来源 | 第12-13页 |
| ·生物对 PAHs 的降解 | 第13-19页 |
| ·细菌对 PAHs 的降解 | 第13-17页 |
| ·真菌对 PAHs 的降解 | 第17-18页 |
| ·其它生物对 PAH 的降解 | 第18-19页 |
| ·极地环境中 PAHs 的污染现状 | 第19-20页 |
| ·环境污染的生物修复 | 第20-21页 |
| ·生物修复的应用前景展望 | 第21-22页 |
| ·本文研究的内容 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-34页 |
| ·化学试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·酶类 | 第25页 |
| ·菌株质粒载体 | 第25页 |
| ·引物 | 第25页 |
| ·样品的采集 | 第25-26页 |
| ·主要软件 | 第26页 |
| ·各种培养基的配制 | 第26页 |
| ·LB 培养基 | 第26页 |
| ·MMC(无机盐培养基) | 第26页 |
| ·选择性无机盐培养基的制备 | 第26页 |
| ·PAHs 降解菌的富集与分离 | 第26-27页 |
| ·降解菌最适生长温度的测定 | 第27页 |
| ·PAHs 降解菌降解谱的测定 | 第27页 |
| ·细菌总 DNA 提取 | 第27-28页 |
| ·细菌总 DNA 提取试剂的配制 | 第27页 |
| ·细菌总 DNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·降解质粒 DNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·碱法裂解提取质粒溶液的配制 | 第28页 |
| ·降解质粒 DNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·降解菌对菲的降解率及降解曲线的测定 | 第29-30页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第29页 |
| ·细菌的培养 | 第29页 |
| ·降解率的计算及降解曲线的绘制 | 第29-30页 |
| ·重复 PCR 及聚类图的构建 | 第30页 |
| ·PAHs 降解菌双加氧酶基因的克隆及探测 | 第30-31页 |
| ·地高辛杂交 | 第30-31页 |
| ·双加氧酶片段的 PCR 检测 | 第31页 |
| ·南极降解菌的双加氧酶片段的扩增 | 第31页 |
| ·16S rDNA 序列测定及其系统进化树的构建 | 第31-32页 |
| ·双加氧酶活性的测定 | 第32-33页 |
| ·indigo 标准曲线 | 第32页 |
| ·蛋白标准曲线 | 第32页 |
| ·双加氧酶活性测定 | 第32页 |
| ·最适酶比活力温度测定 | 第32-33页 |
| ·南极环境下降解酶基因水平转移的分析 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-53页 |
| ·PAHs 降解菌的富集与分离 | 第34-36页 |
| ·降解菌的最适生长温度 | 第36-37页 |
| ·降解菌的降解谱 | 第37-38页 |
| ·细菌的 16S rDNA 鉴定 | 第38-42页 |
| ·常温 PAHs 降解菌 | 第38页 |
| ·南极环境中 PAHs 降解菌的鉴定 | 第38-42页 |
| ·双加氧酶的活性 | 第42-45页 |
| ·靛蓝标准曲线 | 第42页 |
| ·蛋白含量标准曲线 | 第42页 |
| ·双加氧酶活力的测定 | 第42-45页 |
| ·在不同碳源中双加氧酶的活性 | 第42-43页 |
| ·双加氧酶最适活力温度 | 第43-45页 |
| ·PAHs 降解菌双加氧酶基因的克隆及探测 | 第45-47页 |
| ·WSCII 和 WSCIII 对菲的降解 | 第47-49页 |
| ·HPLC 条件的优化 | 第47页 |
| ·菲的标准曲线 | 第47-48页 |
| ·降解率 | 第48-49页 |
| ·降解基因的水平转移 | 第49-50页 |
| ·降解质粒的提取及其单酶切分析 | 第50-53页 |
| 4 讨 论 | 第53-59页 |
| ·PAHs 降解菌的富集与筛选 | 第53页 |
| ·南极环境中 PAHs 主要的降解菌类群分析 | 第53-54页 |
| ·南极环境下 PAHs 的生物降解 | 第54-55页 |
| ·南极环境条件对 PAHs 生物降解的影响 | 第55-56页 |
| ·降解酶活力的分析 | 第56-57页 |
| ·双加氧酶基因与基因的水平转移 | 第57-58页 |
| ·本文研究的意义及存在的问题 | 第58-59页 |
| 5 结 论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 发表论文 | 第73页 |
