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向小鼠导入人类MCP和CD59基因的整合和表达研究

摘要第1-12页
第一章 哺乳动物转基因技术研究进展(文献综述)第12-26页
 1 哺乳动物转基因方法的研究第12-17页
   ·原核胚胎的显微注射技术第12-13页
   ·精子载体技术第13-14页
   ·逆转录病毒载体侵染技术第14-15页
   ·体细胞核移植技术第15页
   ·ES细胞介导技术第15-16页
   ·胞内单精子注射技术第16-17页
 2 提高转基因效率的策略第17-21页
   ·外源基因整合的时机第17页
   ·外源基因整合的形式第17-18页
   ·外源基因整合位点的数量、分布和世代传递第18页
   ·位置效应与外源基因的表达特征第18页
   ·导入大片段第18-19页
   ·共整合与基因搭救第19页
   ·增添基质附着区或内含子第19-20页
   ·利用具有组织与发育特异性调控作用的启动子和增强子第20页
   ·利用反式作用因子第20-21页
   ·应用于转基因的基因打靶技术第21页
 3 转基因动物的应用第21-26页
   ·转基因动物研究基因的表达调控第21-22页
   ·家畜生产性能的改良及抗病育种第22-23页
   ·医用动物模型第23页
   ·动物生物反应器第23-26页
第二章 异种器官移植研究进展(文献综述)第26-32页
 1 异种器官移植沿革第26-27页
 2 异种器官移植动物的选择第27-28页
 3 超急性排斥反应发生的机理第28页
 4 几种补体调节因子在异种器官移植中的作用第28-29页
   ·DAF和MCP对激活途径的调节第28-29页
   ·CD59对膜攻击复合物形成的调节第29页
 5 异种器官移植用转基因猪研究进展第29-32页
第三章 研究思路第32-34页
第四章 昆明小白鼠的超数排卵研究(实验研究)第34-40页
 1 材料与方法第34-35页
   ·主要试剂及仪器第34页
   ·雌鼠的超排处理第34-35页
   ·受精卵的获取第35页
   ·受精卵的培养第35页
   ·数据处理第35页
 2 结果与分析第35-37页
   ·不同PMSG与HCG剂量组合对小鼠超排效果的影响第35-36页
   ·PMSG 与HCG的不同注射间隔时间对小鼠超排的影响第36页
   ·发情周期不同阶段小鼠的超排效果第36-37页
   ·小鼠在不同季节的超排效果第37页
   ·冬季不同温度的超排效果第37页
 3 讨论第37-40页
第五章 向小鼠导入人类MCP和CD59基因第40-50页
 1 材料与方法第40-44页
   ·器材的准备第40-41页
   ·小鼠的超数排卵和假孕母鼠的制备第41-42页
   ·原核胚的获取第42页
   ·受精卵的培养第42页
   ·原核胚的显微注射第42-43页
   ·胚胎移植-伞口植入法第43页
   ·助产与出生第43页
   ·数据分析第43-44页
 2 结果与分析第44-47页
   ·pcDNA3载体图谱及hMCP基因和hCD59基因的结构第44页
   ·显微注射和胚胎移植的实验结果第44-45页
   ·移入胚胎数对小鼠受孕率和产仔率的影响第45-46页
   ·小鼠左右侧输卵管胚胎移植后妊娠率和产仔率的比较第46-47页
 3 讨论第47-50页
   ·显微操作与胚胎移植中的若干技术第47-48页
   ·转基因胚胎的附植发育第48-50页
第六章 外源基因在仔鼠体内的整合和表达检测(试验研究)第50-63页
 1 材料与方法第50-58页
   ·实验样品第50页
   ·主要仪器设备第50页
   ·主要试剂第50-51页
   ·主要试剂及缓冲液的配制第51-52页
   ·组织DNA 的提取第52页
   ·PCR检测第52-54页
   ·DNA 探针的制备第54-56页
   ·Southern印迹杂交法第56-57页
   ·利用细胞毒实验检测阳性小鼠的表达第57-58页
 2 结果与分析第58-61页
   ·PCR检测结果第58-59页
   ·基因组-Southern杂交检测结果第59-60页
   ·细胞毒实验结果第60-61页
 3 讨论第61-63页
   ·外源基因在仔鼠体内的整合检测第61-62页
   ·阳性小鼠的细胞毒实验检测第62-63页
结论第63-64页
参考文献第64-74页
致  谢第74-75页
个 人 简 历第75页

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