| 摘要 | 第1-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 正文部分 | 第10页 |
| 论文题目 在肌肉发生过程中爪蟾 Tbx6 基因的功能和相应的上下游分子机制的研究.. | 第10-83页 |
| 第一章 XTbx6 在体节发生过程中的作用需要较低活性的 BMP信号 | 第-3-56页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一节 材料和方法 | 第12-23页 |
| ·材料 | 第12-15页 |
| ·试剂 | 第12-15页 |
| ·常用引物和酶 | 第15页 |
| ·实验动物 | 第15页 |
| ·方法 | 第15-23页 |
| ·胚胎培养与操作 | 第15-16页 |
| ·胚胎的显微注射 | 第16页 |
| ·动物极帽分离及培养 | 第16页 |
| ·免疫组织化学染色 | 第16-17页 |
| ·整体胚胎原位分子杂交 | 第17-18页 |
| ·透明和脱色 | 第18页 |
| ·Northern 杂交 | 第18页 |
| ·组织切片 | 第18页 |
| ·氯化锂处理 | 第18-19页 |
| ·胚胎的紫外线腹方化处理 | 第19页 |
| ·X-Gal 染色 | 第19页 |
| ·RT-PCR | 第19-20页 |
| ·简并引物 PCR | 第20-21页 |
| ·用 RACE 的方法获得 Tbx6 的全长 | 第21-22页 |
| ·加帽 mRNA 体外转录 | 第22页 |
| ·爪蟾 Tbx6 morpholino 的合成和使用 | 第22-23页 |
| 第二节 结果 | 第23-48页 |
| ·xTbx6 基因的克隆和序列分析 | 第23-28页 |
| ·简并 PCR 获得 T-box 基因的 T-box 区保守片断 | 第23-24页 |
| ·5’RACE 和 3’RACE 扩增 cDNA 文库 | 第24-25页 |
| ·Tbx6 的序列以及其同源性分析 | 第25-27页 |
| ·全长的 xTbx6 克隆的构建 | 第27-28页 |
| ·TBX6 基因的真实性检验以及时空表达图式 | 第28-32页 |
| ·Northern blot 检测 | 第28-29页 |
| ·Tbx6 的时空表达模式 | 第29-32页 |
| ·Tbx6 的缺失功能分析 | 第32-38页 |
| ·Tbx6 缺失造成肌肉图式建成缺陷 | 第32-36页 |
| ·xT6Mo 阻断了肌肉特化基因的起始表达 | 第36-38页 |
| ·过表达爪蟾 Tbx6 改变细胞的命运 | 第38-43页 |
| ·Tbx6 过表达起始了异位的肌肉发生 | 第38-41页 |
| ·Tbx6 在特化的神经外胚层起始了肌肉特化过程 | 第41-43页 |
| ·较低水平的 BMP 信号是 Tbx6 的功能所必需的 | 第43-48页 |
| ·不同边缘带区域的细胞不同的响应 Tbx | 第643-46页 |
| ·较低水平的 BMP 活性对 Tbx6 起始肌肉发生是必要的 | 第46-48页 |
| 第三节 讨论 | 第48-52页 |
| ·Tbx6 在爪蟾肌肉发生过程中的作用 | 第48页 |
| ·Tbx6 与细胞外的 BMP 活性 | 第48-50页 |
| ·Tbx6 与尾巴的形成 | 第50-51页 |
| ·神经管，脊索，以及肌肉之间的界限建成 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 第二章 xTbx6 体节发生过程中介导了预定体节中胚层细胞的粘连 | 第56-70页 |
| 引言 | 第56-57页 |
| 第一节 材料和方法 | 第57-58页 |
| ·mRNA 的合成和探针的合成 | 第57页 |
| ·mRNA 的显微注射 | 第57页 |
| ·胚胎显微操作和体外培养 | 第57-58页 |
| ·原位杂交 | 第58页 |
| 第二节 结果 | 第58-65页 |
| ·外植的预定体节中胚层中 Tbx6 的表达与体内的情况一致 | 第58-59页 |
| ·过表达 Tbx6 不能改变 Som 外植块预定分化为肌肉的分化命运而是引起了形态上的变化 | 第59-62页 |
| ·PAPC 是很可能的候选粘连分子，介导 Tbx6 引起的 Som外植系统引起的形态学变化 | 第62-65页 |
| 第三节 讨论 | 第65-68页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
| 第三章 爪蟾肌肉发育过程中多条信号通路控制 xTbx6 的表达 | 第70-83页 |
| 引言 | 第70-71页 |
| 第一节 材料和方法 | 第71-72页 |
| ·显微注射 | 第71页 |
| ·合成 mRNA 所需的模板制备 | 第71-72页 |
| ·探针合成与原位杂交 | 第72页 |
| 第二节 结果 | 第72-79页 |
| ·Activin、VegT and Nodal 对 Tbx6 的表达是必需的，Nodal信号对能充分诱导 Tbx6 的表达 | 第72-75页 |
| ·FGF 信号对 Tbx6 的早晚期表达是必需的， 但 FGF 不能充分的诱导 Tbx6 的表达 | 第75-77页 |
| ·BMP 是对 Tbx6 表达是充分必要的，并且 BMP4 诱导 Tbx6 的表达有一定的浓度梯度 | 第77-78页 |
| ·Xnot2 不能调节 Tbx6 的表达 | 第78-79页 |
| 第三节 讨论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-83页 |
| 结论 | 第83-84页 |
| 综述 | 第84-98页 |
| 发表文章目录 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
