| 摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-11页 |
| 1 、 引言 | 第11-23页 |
| ·本研究的立题背景 | 第11-12页 |
| ·文献综述 | 第12-23页 |
| ·蛋白酶抑制剂基因与植物抗虫转基因研究 | 第12-14页 |
| ·核酸免疫 | 第14-23页 |
| 2 、 材料与方法 | 第23-30页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·质粒和菌株 | 第23-24页 |
| ·供试实验动物 | 第24页 |
| ·供试水稻品种 | 第24页 |
| ·重要试剂与主要仪器 | 第24-25页 |
| ·重要试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器: | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-30页 |
| ·核酸免疫 | 第25-26页 |
| ·CpTI与GST-CpTI融合蛋白的细菌表达、蛋白纯化及抗体制备 | 第26-27页 |
| ·制备的CpTI核酸免疫抗体及GST-CpTI融合蛋白抗体的效价与特异性分析 | 第27-28页 |
| ·应用制备的抗体检测转CpTI基因水稻 | 第28-29页 |
| ·ELISA测定数据的处理 | 第29-30页 |
| 3 、 结果与分析 | 第30-44页 |
| ·CpTI基因核酸免疫质粒载体的构建与鉴定 | 第30-31页 |
| ·真核表达载体pcDNA3.1-CpTI的构建过程 | 第30页 |
| ·pcDNA3.1-CpTI的酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·GST-CpTI融合蛋白的细菌表达及蛋白纯化 | 第31-34页 |
| ·细菌表达载体pGEX-4T-3-CpTI的构建过程 | 第31-32页 |
| ·pGEX-4T-3-CpTI的酶切鉴定 | 第32页 |
| ·GST-CpTI融合蛋白诱导表达 | 第32-33页 |
| ·GST-CpTI融合蛋白表达可溶性分析 | 第33页 |
| ·GST-CpTI融合蛋白纯化 | 第33-34页 |
| ·GST-CpTI蛋白免疫抗体的制备、效价测定及特异性分析 | 第34-38页 |
| ·GST-CpTI抗体的制备 | 第34页 |
| ·GST-CpTI抗体的效价测定 | 第34-35页 |
| ·GST-CpTI抗体的特异性测定 | 第35-38页 |
| ·核酸免疫抗体的制备、效价测定及特异性分析 | 第38-41页 |
| ·核酸免疫CpTI抗体的制备 | 第38页 |
| ·核酸免疫CpTI抗体的效价测定 | 第38-39页 |
| ·核酸免疫CpTI抗体的特异性测定 | 第39-41页 |
| ·转CpTI基因水稻的ELISA测定 | 第41-44页 |
| 4 、 讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附录 | 第51-58页 |
| 附录1. US系列转sck(修饰的CpTI)基因水稻所使用的质粒载体pCUSCK-Hyg及其构建 | 第51-52页 |
| 附录2. Bulk and RediPact GST Purification Modules纯化蛋白 | 第52-54页 |
| 附录3. CpTI基因的核苷酸序列 | 第54-55页 |
| 附录4. pBlueL3的构建示意图 | 第55-56页 |
| 附录5. 论文中部分溶液的组成及配制方法 | 第56-57页 |
| 附录6. PIERCE公司碱性磷酸酶底物PNPP试剂盒的使用方法 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
