猪囊尾蚴cDNA表达文库的构建、筛选及目的基因的克隆和鉴定
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 引言 | 第6-8页 |
| 研究内容 | 第8-49页 |
| 第一部分 猪囊尾蚴cDNA表达文库的构建 | 第8-32页 |
| 引言 | 第9页 |
| ·材料 | 第9-10页 |
| ·虫体的分离与收集 | 第9页 |
| ·试剂 | 第9-10页 |
| ·仪器和设备 | 第10页 |
| ·猪囊尾蚴总RNA的提取 | 第10-13页 |
| ·mRNA的分离 | 第13-16页 |
| ·cDNA表达文库的构建 | 第16-26页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第16-17页 |
| ·cDNA第二链的合成 | 第17-18页 |
| ·加Sal Ⅰ Adapter | 第18-19页 |
| ·Not 1酶切消化 | 第19-20页 |
| ·柱层析 | 第20页 |
| ·cDNA与载体的连接 | 第20-21页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第21-22页 |
| ·连接产物的转化 | 第22-24页 |
| ·cDNA表达文库的扩增 | 第24-26页 |
| ·结果 | 第26-28页 |
| ·RNA和mRNA的含量及纯度 | 第26页 |
| ·cDNA含量测定 | 第26-28页 |
| ·cDNA定向克隆及重组克隆的鉴定 | 第28页 |
| ·讨论 | 第28-32页 |
| ·关于RNA和mRNA的质量问题 | 第29-30页 |
| ·cDNA表达文库的质量问题 | 第30-32页 |
| 第二部分 猪囊尾蚴cDNA表达文库的筛选 | 第32-38页 |
| 摘要 | 第32页 |
| 引言 | 第32页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-35页 |
| ·筛选菌落的准备 | 第33页 |
| ·NC膜的处理 | 第33-34页 |
| ·抗体筛选 | 第34-35页 |
| ·阳性菌落的分离 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| ·NC膜的准备 | 第36-37页 |
| ·用TBS洗脱NC膜 | 第37页 |
| ·人囊尾蚴阳性血清的处理 | 第37-38页 |
| 第三部分 目的基因的克隆及鉴定 | 第38-48页 |
| 摘要 | 第38页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·酶和试剂 | 第38页 |
| ·仪器和设备 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-44页 |
| ·重组质粒的提取 | 第39-40页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第40-41页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接及鉴定 | 第41-43页 |
| ·重组质粒测序 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44页 |
| ·重组质粒鉴定结果 | 第44页 |
| ·目的基因测序结果及同源性比较 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-48页 |
| 第四部分 结论 | 第48-49页 |
| 文献综述 | 第49-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80-89页 |
