摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
前言 | 第11-44页 |
1 鱼类弧菌病的概况 | 第14-16页 |
2 鱼类细菌病的致病机制 | 第16-17页 |
3 鳗弧菌的致病机理 | 第17-20页 |
·鳗弧菌感染途径 | 第17-18页 |
·鳗弧菌的毒力机制 | 第18-20页 |
4 鱼类细菌病原的耐药性与抗原特征 | 第20-23页 |
·病原菌的耐药现象 | 第20-21页 |
·鱼类的免疫基础 | 第21页 |
·弧菌病病原的抗原特征 | 第21-23页 |
5 细菌外膜蛋白研究现状 | 第23-33页 |
·外膜蛋白简介 | 第23-24页 |
·外膜的结构 | 第24页 |
·外膜蛋白的组成 | 第24-27页 |
·外膜蛋白的生理功能 | 第27-33页 |
6 本论文的研究目的、意义 | 第33-44页 |
第一章 病原菌的致病性 | 第44-57页 |
第一节 大菱鲆病原菌分离鉴定 | 第44-48页 |
1 材料与方法 | 第44-45页 |
·菌株 | 第44页 |
·培养基 | 第44页 |
·病原菌的分离 | 第44页 |
·菌种鉴定 | 第44-45页 |
2 结果 | 第45-48页 |
第二节 病原弧菌的致病性及其药物敏感性 | 第48-53页 |
1 材料与方法 | 第48页 |
·菌株 | 第48页 |
·实验动物 | 第48页 |
·人工感染试验 | 第48页 |
·药物敏感实验 | 第48页 |
2 结果 | 第48-51页 |
·病原菌对牙鲆的致病性 | 第48-49页 |
·病原菌对大菱鲆的致病性 | 第49-50页 |
·病原菌的药物敏感性 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-53页 |
·关于主要弧菌病原菌及其宿主 | 第51页 |
·关于病鱼病症 | 第51-52页 |
·病原菌的药物敏感性 | 第52-53页 |
第三节 病原鳗弧菌的血清型鉴定 | 第53-57页 |
1 材料和方法 | 第53-55页 |
·菌株和实验动物 | 第53页 |
·细菌抗血清的制备 | 第53-54页 |
·微量凝集反应 | 第54-55页 |
2 结果 | 第55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
第二章 弧菌的外膜蛋白研究 | 第57-94页 |
第一节 不同弧菌菌株的外膜蛋白分析 | 第57-72页 |
1 材料方法 | 第57-59页 |
·菌株 | 第57-58页 |
·药品 | 第58页 |
·外膜蛋白的制备方法 | 第58-59页 |
·外膜蛋白质含量的测定-考马斯亮蓝染色法(Bradford法) | 第59页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第59页 |
2 结果 | 第59-68页 |
·弧菌属不同种的菌株的外膜蛋白 | 第59-61页 |
·不同血清型鳗弧菌的外膜蛋白的特点 | 第61-65页 |
·哈维氏弧菌的外膜蛋白的特点 | 第65-67页 |
·副溶血弧菌的外膜蛋白特点 | 第67-68页 |
3 讨论 | 第68-72页 |
·不同弧菌的外膜蛋白 | 第68-69页 |
·鳗弧菌的外膜蛋白 | 第69页 |
·哈维氏弧菌和副溶血弧菌的外膜蛋白 | 第69页 |
·提取方法对外膜蛋白的影响 | 第69-72页 |
第二节 不同培养条件对弧菌外膜蛋白表达的影响 | 第72-78页 |
1 材料和方法 | 第72-73页 |
·实验菌株 | 第72页 |
·仪器 | 第72页 |
·培养条件 | 第72页 |
·外膜蛋白的提取 | 第72-73页 |
·蛋白质含量的测定--考马斯亮蓝染色法(Bradford法) | 第73页 |
·SDS-PAGE | 第73页 |
2 结果 | 第73-76页 |
·不同条件下鳗弧菌的外膜蛋白特点 | 第73页 |
·不同温度下哈维氏弧菌的外膜蛋白特点 | 第73-76页 |
3 讨论 | 第76-78页 |
第三节 鳗弧菌外膜蛋白的WESTERN-BLOTTING | 第78-84页 |
1 材料与方法 | 第78-80页 |
·菌株与实验动物 | 第78页 |
·仪器与药品 | 第78页 |
·抗血清的制备 | 第78-79页 |
·SDS-PAGE | 第79页 |
·Western-blotting | 第79-80页 |
2 结果 | 第80-82页 |
·10个血清型的鳗弧菌标准菌株 | 第80-82页 |
·W-1,TL01在三个温度下表达的蛋白 | 第82页 |
3 讨论 | 第82-84页 |
·关于鳗弧菌的主要保护性抗原 | 第82-83页 |
·温度对外膜蛋白表达的影响 | 第83-84页 |
第四节 鳗弧菌主要外膜蛋白的分离纯化 | 第84-91页 |
1 材料和方法 | 第84-87页 |
·试验菌株 | 第84页 |
·试剂及仪器 | 第84页 |
·菌株培养 | 第84页 |
·外膜蛋白提取 | 第84页 |
·外膜蛋白的分离纯化 | 第84-85页 |
·收集组份的处理及蛋白检测 | 第85-86页 |
·洗脱回收 | 第86-87页 |
2 结果 | 第87-89页 |
·用不同介质进行分离纯化鳗弧菌主要外膜蛋白 | 第87-88页 |
·温度诱导的低分子量外膜蛋白的SDS-PAGE电泳回收 | 第88-89页 |
3 讨论 | 第89-91页 |
第五节 鳗弧菌外膜蛋白对鱼免疫保护作用的初步研究 | 第91-94页 |
1 材料与方法 | 第91-92页 |
·菌株 | 第91页 |
·免疫用外膜蛋白的制备 | 第91页 |
·试验鱼及饲养条件 | 第91页 |
·大菱鲆的免疫与采血 | 第91-92页 |
·抗体效价的测定 | 第92页 |
·攻毒感染试验 | 第92页 |
2 结果 | 第92页 |
·大菱鲆抗体效价测定结果 | 第92页 |
·免疫保护率 | 第92页 |
3 讨论 | 第92-94页 |
小结 | 第94-95页 |