中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
前言 | 第10-11页 |
文献综述 | 第11-21页 |
1. 大豆及榨菜组织培养进展 | 第11-12页 |
1.1 大豆器官分化与植株再生 | 第11页 |
1.2 大豆细胞胚发生与植株再生 | 第11页 |
1.3 大豆原生质体培养再生植株 | 第11-12页 |
1.4 大豆花药和花粉培养再生植株 | 第12页 |
1.5 芥菜组织培养进展 | 第12页 |
2. CPPU、TDZ在组织培养中的应用 | 第12-13页 |
2.1 CPPU在组织培养中的作用 | 第12页 |
2.2 TDZ在组织培养中的作用 | 第12-13页 |
2.2.1 TDZ与芽的增殖与再生 | 第12-13页 |
2.2.2 TDZ与愈伤组织的发生 | 第13页 |
3. 根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第13-17页 |
3.1 根癌农杆菌侵染植物细胞的分子生物学机理 | 第13-14页 |
3.2 根癌农杆菌的侵染能力及其特异性 | 第14页 |
3.3 根癌农杆菌转化系统的评述 | 第14-15页 |
3.4 Ti质粒衍生的载体系统 | 第15-17页 |
3.4.1 克隆载体系统(植物表达载体) | 第15-16页 |
3.4.2 转化载体系统 | 第16-17页 |
3.5 将克隆载体导入农杆菌载体系统 | 第17页 |
3.5.1 pRK2013帮助质粒 | 第17页 |
3.5.2 pRK2013协助下的双元载体的移动 | 第17页 |
4. 大豆转基因研究进展 | 第17-19页 |
4.1 抗除草剂基因的转化 | 第17-18页 |
4.2 抗虫基因的转化 | 第18-19页 |
4.3 抗病基因的转化 | 第19页 |
4.4 其他基因的转化 | 第19页 |
5. 利用转基因植物生产疫苗的研究进展 | 第19-20页 |
6. 转基因植物的安全性评价 | 第20-21页 |
材料与方法 | 第21-29页 |
1. 材料 | 第21-22页 |
1.1 种子 | 第21页 |
1.2 化学试剂 | 第21页 |
1.3 菌株及质粒 | 第21页 |
1.4 酶及生物试剂 | 第21-22页 |
2. 方法 | 第22-29页 |
2.1 大豆组织培养 | 第22页 |
2.2 榨菜组织培养 | 第22-23页 |
2.3 植物表达载体构建策略 | 第23-24页 |
2.4 质粒载体pCAMBIA1305.1、重组质粒pBI121的扩繁、提取、酶切及纯化 | 第24-26页 |
2.5 pCAMBIA1305.1和IBV S基因酶切产物的连接和转化 | 第26页 |
2.6 重组克隆的筛选与鉴定 | 第26-27页 |
2.7 重组的植物表达载体导入受体农杆菌 | 第27-28页 |
2.8 基因转化 | 第28-29页 |
结果与分析 | 第29-41页 |
1. 大豆离体再生影响因子的研究 | 第29-31页 |
1.1 不同苗龄的外植体对大豆离体培养反应的影响 | 第29页 |
1.2 不同基本培养基对大豆子叶节分化不定芽的影响 | 第29页 |
1.3 不同BA浓度对大豆外植体芽分化的影响 | 第29-30页 |
1.4 BA与IBA组合对大豆子叶节芽分化的影响 | 第30页 |
1.5 不同KT浓度对大豆子叶节芽分化的影响 | 第30-31页 |
2. 榨菜离体再生影响因子的研究 | 第31-38页 |
2.1 激素配比对榨菜子叶离体再生的影响 | 第31-34页 |
2.1.1 BA和NAA配比对子叶离体再生的影响 | 第31页 |
2.1.2 BA和IBA配比对子叶离体再生的影响 | 第31页 |
2.1.3 KT和NAA激素配比对子叶离体再生的影响 | 第31-32页 |
2.1.4 CPPU和NAA配比对子叶离体再生的影响 | 第32页 |
2.1.5 CPPU和IBA配比对子叶离体再生的影响 | 第32页 |
2.1.6 TDZ和NAA配比对子叶离体再生的影响 | 第32-34页 |
2.1.7 BA和GA3配比对子叶离体再生的影响 | 第34页 |
2.2 AgNO_3浓度对子叶离体再生的诱导作用 | 第34-35页 |
2.3 激素配比对榨菜真叶离体再生的影响 | 第35-38页 |
2.3.1 BA和NAA配比对真叶离体再生的影响 | 第35页 |
2.3.2 BA和IBA配比对真叶离体再生的影响 | 第35-36页 |
2.3.3 KT和NAA配比对真叶离体再生的影响 | 第36页 |
2.3.4 CPPU和NAA配比对真叶离体再生的影响 | 第36-37页 |
2.3.5 CPPU和IBA配比对真叶离体再生的影响 | 第37-38页 |
2.4 外植体类型对不定芽再生的影响 | 第38页 |
3. 植物表达载体的构建 | 第38-40页 |
3.1 植物表达载体的构建与鉴定 | 第38-39页 |
3.2 根癌农杆菌的转化与鉴定 | 第39-40页 |
4. 大豆转基因植株的再生 | 第40-41页 |
4.1 选择性抗生素对大豆再生的影响 | 第40页 |
4.2 农杆菌菌液浓度、侵染时间对转化的影响 | 第40页 |
4.3 乙酰丁香酮在诱导愈伤和芽再生频率上的影响 | 第40页 |
4.4 大豆子叶节转化的效果和转基因植株的获得 | 第40-41页 |
讨论 | 第41-46页 |
1. 影响大豆组织培养中的植株再生频率的因素 | 第41页 |
1.1 大豆基因型 | 第41页 |
1.2 外植体类型 | 第41页 |
1.3 激素种类 | 第41页 |
2. 影响榨菜组织培养中的植株再生频率的因素 | 第41-43页 |
2.1 外植体类型 | 第41-42页 |
2.2 激素种类 | 第42-43页 |
2.2.1 BA | 第42页 |
2.2.2 TDZ | 第42页 |
2.2.3 CPPU | 第42-43页 |
2.3 AgNO_3的影响 | 第43页 |
3. 载体构建与遗传转化效率 | 第43-44页 |
4. 影响大豆遗传转化的因素 | 第44-46页 |
4.1 外植体类型 | 第44页 |
4.2 大豆基因型 | 第44页 |
4.3 菌液浓度、侵染时间、共培养时间 | 第44页 |
4.4 乙酰丁香酮的效果 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
附录1: 实验技术路线 | 第53-54页 |
附录2: 文中所用缩略语 | 第54-55页 |
附录3: 常用缓冲液及培养基配方 | 第55-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
图版 | 第58页 |