猪粪堆肥中微生物变化规律及芽孢杆菌分离与鉴定
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| ·我国畜牧业排放粪污对环境污染现状 | 第11-13页 |
| ·我国畜牧业粪污排放的恶劣程度 | 第11-12页 |
| ·粪污对大气的污染 | 第12页 |
| ·粪污对水体的污染 | 第12页 |
| ·粪污放对土壤的污染 | 第12-13页 |
| ·堆肥技术处理畜牧业粪污的方法和原理 | 第13-18页 |
| ·畜禽粪污的特点 | 第13-14页 |
| ·堆肥技术概念 | 第14页 |
| ·畜禽粪污好氧堆肥的技术原理 | 第14-15页 |
| ·堆肥中的微生物过程 | 第15-16页 |
| ·研究堆肥微生物的分子生物学技术 | 第16-17页 |
| ·DGGE的原理 | 第17-18页 |
| ·芽孢杆菌的研究进展 | 第18-22页 |
| ·芽孢杆菌属 | 第18-20页 |
| ·16S rRNA方法鉴定菌种的原理与应用 | 第20-22页 |
| 第二章 研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 第三章 材料和方法 | 第24-48页 |
| ·试验材料 | 第24-28页 |
| ·主要试剂及药品 | 第24页 |
| ·缓冲液和常用试剂的配置 | 第24-26页 |
| ·主要培养基 | 第26-27页 |
| ·主要设备仪器 | 第27-28页 |
| ·试验方法 | 第28-48页 |
| ·条剁式自然堆肥系统 | 第28页 |
| ·堆肥指标的测定 | 第28-33页 |
| ·堆肥不同温期样品的采集 | 第33页 |
| ·样品中微生物的分离和计数 | 第33-34页 |
| ·样品中微生物总DNA的提取和纯化 | 第34-35页 |
| ·粗提DNA | 第34-35页 |
| ·DNA的纯化 | 第35页 |
| ·基因组DNA检测 | 第35-36页 |
| ·基因组DNA质量浓度检测 | 第35-36页 |
| ·基因组DNA的琼脂糖凝胶检测 | 第36页 |
| ·细菌V3区PCR扩增和琼脂糖检测 | 第36-37页 |
| ·DGGE凝胶电泳 | 第37-41页 |
| ·制作水平变性胶 | 第37-40页 |
| ·DGGE电泳 | 第40-41页 |
| ·DGGE染色 | 第41页 |
| ·凝胶成像 | 第41页 |
| ·DGGE分析 | 第41-43页 |
| ·Quantity One软件包分析 | 第41页 |
| ·显著条带回收测序分析 | 第41-43页 |
| ·芽孢杆菌的分离和纯化培养 | 第43-44页 |
| ·芽孢杆菌的16S rRNA鉴定 | 第44-45页 |
| ·芽孢杆菌染色体DNA的提取和纯化 | 第44页 |
| ·PCR扩增和琼脂糖电泳 | 第44-45页 |
| ·芽孢杆菌的传统鉴定 | 第45-47页 |
| ·芽孢杆菌的形态观察 | 第45页 |
| ·芽孢杆菌的芽孢观察 | 第45页 |
| ·芽孢杆菌的生理生化鉴定 | 第45-47页 |
| ·芽孢杆菌的功能检测 | 第47-48页 |
| 第四章 试验结果 | 第48-67页 |
| ·堆肥结果和指标的测定值 | 第48-52页 |
| ·堆体的表观形态 | 第48页 |
| ·堆体的温度变化 | 第48-49页 |
| ·堆体的pH值变化 | 第49-50页 |
| ·堆体的C/N值变化 | 第50-51页 |
| ·堆体的其它元素变化 | 第51-52页 |
| ·微生物的传统培养 | 第52-53页 |
| ·微生物基因组DNA | 第53-55页 |
| ·基因组DNA含量浓度检测 | 第53页 |
| ·基因组DNA的琼脂糖检测 | 第53-55页 |
| ·DGGE分析堆肥微生物变化规律 | 第55-60页 |
| ·细菌V3区扩增片段 | 第55页 |
| ·细菌V3区DGGE电泳图 | 第55-56页 |
| ·软件分析DGGE图谱 | 第56-60页 |
| ·割胶回收条带测序分析 | 第60页 |
| ·芽孢杆菌的分离和鉴定 | 第60-67页 |
| ·芽孢杆菌的分离 | 第60-62页 |
| ·芽孢杆菌的鉴定 | 第62-67页 |
| ·菌落形态鉴定 | 第62-63页 |
| ·生理生化鉴定 | 第63页 |
| ·细菌16S rRNA鉴定 | 第63-65页 |
| ·菌株功能的初步探讨 | 第65-67页 |
| 第五章 讨论与分析 | 第67-74页 |
| ·不同因素对堆肥微生物的影响 | 第67-69页 |
| ·温度的影响 | 第67页 |
| ·C/N值的影响 | 第67-68页 |
| ·含水率的影响 | 第68页 |
| ·pH值的影响 | 第68-69页 |
| ·堆肥中总DNA的提取 | 第69页 |
| ·堆肥微生物的变化规律 | 第69-72页 |
| ·芽孢杆菌的分离和鉴定 | 第72-73页 |
| ·芽孢杆菌的功能探讨 | 第73-74页 |
| 第六章 小结 | 第74-75页 |
| ·本研究所取得的成果及创新 | 第74页 |
| ·下一步值得研究的工作 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 附录 (获得的芽孢杆菌16S RRNA基因序列) | 第81-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
