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不同类型玉米自交系胚乳发育关键时期差异表达基因的分离与克隆

致谢第1-9页
摘要第9-8页
缩略词表第8-11页
第一章 文献综述第11-33页
   ·玉米籽粒胚乳发育研究进展第11-19页
     ·玉米胚乳细胞的分裂与增殖第11-12页
     ·胚乳发育过程中的物质积累第12-16页
     ·玉米胚乳突变基因的研究第16-18页
     ·玉米胚乳发育的分子机理研究进展第18-19页
   ·差异表达基因的研究方法及其应用第19-26页
     ·差异表达基因的分离方法第19-23页
     ·抑制差减杂交(SSH)技术第23-26页
     ·抑制差减杂交(SSH)技术在玉米中的应用第26页
   ·发掘和克隆基因的方法第26-31页
     ·功能克隆第27-28页
     ·PCR扩增克隆第28页
     ·转座子标记法第28-29页
     ·mRNA差别显示第29页
     ·cDNA末端快速扩增(RACE)第29页
     ·图位克隆第29-30页
     ·同源性克隆基因第30页
     ·电子克隆第30-31页
   ·本研究目的与意义第31-33页
第二章 马齿型和爆裂型玉米自交系籽粒胚乳发育分析第33-43页
   ·材料与方法第33-35页
     ·材料和取样方法第33页
     ·石蜡切片方法第33-35页
     ·统计分析方法第35页
   ·结果与分析第35-40页
     ·灌浆过程中鲜重和干重的增长动态第35-37页
     ·籽粒灌浆过程中胚乳、果皮、胚的鲜重和干重变化动态第37页
     ·籽粒发育不同时期各部分干重占整个粒籽粒干重的比例第37-39页
     ·胚乳发育显微结构分析第39-40页
   ·讨论第40-43页
第三章 马齿型和爆裂型玉米自交系籽粒发育不同时期胚乳差异表达EST的分离和克隆第43-83页
   ·材料与方法第43-57页
     ·试验材料第43页
     ·总RNA的提取及Poly(A)RNA的分离第43-46页
     ·抑制差减杂交第46-53页
     ·差减cDNA文库的差异筛选第53-55页
     ·差异表达EST的序列分析第55页
     ·差异表达EST的半定量RT-PCR第55-57页
   ·结果与分析第57-76页
     ·提取总RNA质量的检测第57页
     ·提取mRNA的质量检测第57-58页
     ·抑制差减效率分析第58页
     ·不同时期籽粒胚乳差异表达EST库的构建第58-59页
     ·差异表达基因片段的反向Northern验证第59-61页
     ·差异表达EST的同源序列比对结果第61-69页
     ·差异表达EST的功能分类第69-71页
     ·差异表达EST的半定量RT-PCR验证分析第71-72页
     ·胚乳不同发育时期差异表达基因的比较分析第72-74页
     ·不同类型玉米自交系籽粒乳发育差异表达基因的比较分析第74-76页
   ·讨论第76-83页
     ·不同类型玉米自交系籽粒胚乳发育差异表达基因的类型及其复杂性第76-77页
     ·胚乳发育进程与差异表达基因的关系第77页
     ·不同类型玉米自交系籽粒胚乳发育差异表达基因涉及的生理功能第77-80页
     ·EST技术是研究玉米胚乳发育的有力工具第80-83页
第四章 差异表达EST的电子定位及比较基因组学定位粒重QTL的分析第83-91页
   ·材料与方法第83-84页
     ·玉米ESTs来源第83页
     ·玉米QTL定位信息的收集第83页
     ·定位方法第83-84页
   ·结果与分析第84-86页
     ·差异表达ESTs的电子定位第84页
     ·ESTs定位结果与粒重QTL的整合第84-86页
   ·讨论第86-91页
第五章 基于电子延伸技术的玉米小G蛋白ZmArf2基因全长cDNA克隆及表达分析第91-103页
   ·材料与方法第91-92页
     ·实验材料第91页
     ·试验方法第91-92页
   ·结果与分析第92-100页
     ·ZmArf2基因的拼接、克隆、测序及序列分析第92-97页
       ·ZmArf2基因的拼接、扩增及克隆测序第92-97页
     ·玉米ZmArf2与其它物种的Arf基因编码蛋白质的氨基酸序列比较第97-99页
     ·ZmArf2在胚乳发育过程中的表达分析第99页
     ·ZmArf2基因组织特异性表达分析第99-100页
   ·讨论第100-103页
     ·关于电子拼接技术第100页
     ·关于Arf基因第100-103页
参考文献第103-115页
ABSTRACT第115-119页
作者简历第119页

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