| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-21页 |
| 一、蛋白质组学产生的背景 | 第9-10页 |
| 二、蛋白质组和蛋白质组学概念及研究内容 | 第10-11页 |
| 三、蛋白质组学研究技术 | 第11-19页 |
| (一) 蛋白质分离技术 | 第12-16页 |
| (二) 生物质谱技术 | 第16-19页 |
| (三) 生物信息学 | 第19页 |
| 四、蛋白质组学的应用和前景 | 第19-20页 |
| 五、本论文的工作目的及技术路线 | 第20-21页 |
| 实验技术路线 | 第21-22页 |
| 材料与方法 | 第22-32页 |
| 一、菌株及常用溶液的配制 | 第22-25页 |
| (一) 实验菌株 | 第22页 |
| (二) 主要化学试剂与耗材 | 第22页 |
| (三) 主要仪器与分析软件 | 第22-23页 |
| (四) 常用溶液的配制 | 第23-25页 |
| 二、样品的制备 | 第25-27页 |
| (一) 细菌的培养 | 第25页 |
| (二) 霍乱弧菌全菌蛋白样品制备 | 第25页 |
| (三) 霍乱弧菌全菌蛋白样品定量 | 第25-26页 |
| (四) 霍乱弧菌全菌蛋白样品纯化 | 第26-27页 |
| 三、双向电泳 | 第27-32页 |
| (一) 上样 | 第27页 |
| (二) 等点聚焦(isoelectric focusing, IEF) | 第27-28页 |
| (三) 改进的等电聚焦 | 第28页 |
| (四) SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)与电泳缓冲液的配制 | 第28-29页 |
| (五) 第一向电泳胶条的平衡 | 第29页 |
| (六) IEF 胶条转移至第二向SDS-PAGE | 第29页 |
| (七) 第二向SDS-PAGE 电泳 | 第29-30页 |
| (八) 制备型电泳凝胶的考马斯亮蓝染色(考染)及脱色 | 第30-31页 |
| (九) 银染 | 第31页 |
| (十) 图像扫描与分析 | 第31-32页 |
| 实验结果 | 第32-53页 |
| 一、霍乱弧菌N16961 的2-DE 图谱的分辨率及重复性的分析 | 第32-39页 |
| (一) 样品定量结果 | 第32-34页 |
| (二) 本体系双向电泳的分辨率 | 第34-36页 |
| (三) 图谱的重复性分析 | 第36-39页 |
| 二、其他霍乱弧菌的2-DE 图谱(PH4-7) | 第39-44页 |
| (一) 对样品定量结果 | 第39-41页 |
| (二) 2-DE 图谱 | 第41-44页 |
| 三、碱性区蛋白纯化和未纯化电泳图谱的比较 | 第44-46页 |
| (一) 样品的定量结果 | 第44-45页 |
| (二) 未纯化与纯化的图谱比较 | 第45-46页 |
| 四、其它霍乱弧菌PH6-11 的2-DE 图谱 | 第46-50页 |
| (一) 样品定量结果 | 第46-47页 |
| (二) 2-DE 图谱 | 第47-50页 |
| 五、银染与考染的对比图 | 第50-53页 |
| 讨论 | 第53-56页 |
| 一、样品制备过程 | 第53-54页 |
| 二、双向电泳操作 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 后记 | 第63页 |