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霍乱弧菌蛋白质组研究中双向电泳技术平台的建立

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
引言第9-21页
 一、蛋白质组学产生的背景第9-10页
 二、蛋白质组和蛋白质组学概念及研究内容第10-11页
 三、蛋白质组学研究技术第11-19页
  (一) 蛋白质分离技术第12-16页
  (二) 生物质谱技术第16-19页
  (三) 生物信息学第19页
 四、蛋白质组学的应用和前景第19-20页
 五、本论文的工作目的及技术路线第20-21页
实验技术路线第21-22页
材料与方法第22-32页
 一、菌株及常用溶液的配制第22-25页
  (一) 实验菌株第22页
  (二) 主要化学试剂与耗材第22页
  (三) 主要仪器与分析软件第22-23页
  (四) 常用溶液的配制第23-25页
 二、样品的制备第25-27页
  (一) 细菌的培养第25页
  (二) 霍乱弧菌全菌蛋白样品制备第25页
  (三) 霍乱弧菌全菌蛋白样品定量第25-26页
  (四) 霍乱弧菌全菌蛋白样品纯化第26-27页
 三、双向电泳第27-32页
  (一) 上样第27页
  (二) 等点聚焦(isoelectric focusing, IEF)第27-28页
  (三) 改进的等电聚焦第28页
  (四) SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)与电泳缓冲液的配制第28-29页
  (五) 第一向电泳胶条的平衡第29页
  (六) IEF 胶条转移至第二向SDS-PAGE第29页
  (七) 第二向SDS-PAGE 电泳第29-30页
  (八) 制备型电泳凝胶的考马斯亮蓝染色(考染)及脱色第30-31页
  (九) 银染第31页
  (十) 图像扫描与分析第31-32页
实验结果第32-53页
 一、霍乱弧菌N16961 的2-DE 图谱的分辨率及重复性的分析第32-39页
  (一) 样品定量结果第32-34页
  (二) 本体系双向电泳的分辨率第34-36页
  (三) 图谱的重复性分析第36-39页
 二、其他霍乱弧菌的2-DE 图谱(PH4-7)第39-44页
  (一) 对样品定量结果第39-41页
  (二) 2-DE 图谱第41-44页
 三、碱性区蛋白纯化和未纯化电泳图谱的比较第44-46页
  (一) 样品的定量结果第44-45页
  (二) 未纯化与纯化的图谱比较第45-46页
 四、其它霍乱弧菌PH6-11 的2-DE 图谱第46-50页
  (一) 样品定量结果第46-47页
  (二) 2-DE 图谱第47-50页
 五、银染与考染的对比图第50-53页
讨论第53-56页
 一、样品制备过程第53-54页
 二、双向电泳操作第54-56页
结论第56-57页
参考文献第57-63页
后记第63页

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