| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 中英文缩写词表 | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-20页 |
| ·活性氧与SOD | 第9-10页 |
| ·SOD的分布及种类 | 第10-11页 |
| ·SOD的应用 | 第11-13页 |
| ·SOD生产方式与本课题设计 | 第13-15页 |
| ·酵母表达系统 | 第15-20页 |
| 第二章 实验方法 | 第20-38页 |
| ·实验材料及仪器设备 | 第20-22页 |
| ·载体及重组菌株的构建 | 第22-30页 |
| ·目的蛋白的鉴定及活性分析 | 第30-36页 |
| ·重组毕赤酵母GS115/SOD发酵条件的初步研究 | 第36-37页 |
| ·培养上清即粗酶稳定性测试 | 第37-38页 |
| 第三章 实验结果 | 第38-50页 |
| ·人Cu,Zn-SOD基因的合成 | 第38-41页 |
| ·pPIC9K/SOD构建 | 第41-42页 |
| ·重组酵母GS115/SOD的筛选鉴定 | 第42-45页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第45页 |
| ·表达产物蛋白印迹(Western blot)鉴定 | 第45-46页 |
| ·不同的发酵条件对培养液上清酶活性的影响 | 第46-47页 |
| ·最佳条件下培养上清SDS-PAGE结果 | 第47-48页 |
| ·最佳条件下目的蛋白表达量 | 第48页 |
| ·最佳条件下培养上清酶活性 | 第48页 |
| ·粗酶稳定性测试结果 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 讨论 | 第51-60页 |
| 1. Pichia pastoris表达系统的选择 | 第51页 |
| 2. 分泌表达方式的选择 | 第51-52页 |
| 3. 甲醇利用表型(Mut~+和Mut~3)的选择 | 第52页 |
| 4. 不同外界条件对发酵上清酶活性的影响 | 第52-55页 |
| 5. 影响Pichia pastoris外源蛋白表达量的内源性因素 | 第55-58页 |
| 6. SOD活性和稳定性 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
