| 摘要 | 第1-17页 |
| Abstract | 第17-19页 |
| 第一章 中心蛋白研究进展 | 第19-40页 |
| ·引言 | 第19页 |
| ·中心蛋白定位 | 第19-21页 |
| ·中心蛋白分布 | 第21-22页 |
| ·中心蛋白的结构 | 第22-26页 |
| ·中心蛋白的一级结构 | 第22-24页 |
| ·中心蛋白的高级结构 | 第24-26页 |
| ·中心蛋白的结构基础——EF手结构 | 第26-29页 |
| ·中心蛋白的功能 | 第29-30页 |
| ·钙结合蛋白的作用机制 | 第30-32页 |
| ·纤毛虫分子生物学研究的意义 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-40页 |
| 第二章 八肋游仆虫中心蛋白的构建、表达以及纯化 | 第40-55页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·材料 | 第40-43页 |
| ·菌种与质粒 | 第40页 |
| ·寡核苷酸 | 第40-42页 |
| ·主要的酶及生化试剂 | 第42页 |
| ·主要试剂的配制 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-49页 |
| ·中心蛋白质粒的构建 | 第44-47页 |
| ·基因所编码的蛋白质的表达 | 第47-48页 |
| ·基因所编码的蛋白质的纯化 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-53页 |
| ·重组质粒的构建 | 第49-51页 |
| ·重组菌的诱导、表达以及纯化 | 第51-53页 |
| ·讨论 | 第53页 |
| ·结论 | 第53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 第三章 Ca~(2+)、Tb~(3+)与中心蛋白的相互作用 | 第55-69页 |
| ·引言 | 第55页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·主要试剂 | 第55页 |
| ·主要仪器 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-57页 |
| ·稀土离子(Tb~(3+))储备液的配制 | 第56页 |
| ·中心蛋白以及其片段分子的分离纯化 | 第56页 |
| ·光谱测定 | 第56-57页 |
| ·结果与讨论 | 第57-66页 |
| ·金属离子对EoCen二级结构的影响 | 第57-59页 |
| ·中心蛋白与Tb~(3+)相互作用 | 第59-63页 |
| ·中心蛋白与Ca~(2+)相互作用 | 第63-65页 |
| ·金属离子对中心蛋白疏水性结构域的影响 | 第65-66页 |
| ·结论 | 第66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 第四章 蜂毒素与中心蛋白的相互作用 | 第69-83页 |
| ·引言 | 第69页 |
| ·材料 | 第69-70页 |
| ·主要试剂 | 第69页 |
| ·主要仪器 | 第69-70页 |
| ·方法 | 第70-71页 |
| ·稀土离子(Tb~(3+))储备液的配制 | 第70页 |
| ·Native-PAGE(Tris-glycine系统) | 第70页 |
| ·中心蛋白及其片段分子的分离、纯化 | 第70页 |
| ·蜂毒素储备液的配制 | 第70页 |
| ·光谱测定 | 第70-71页 |
| ·结果与讨论 | 第71-79页 |
| ·紫外光谱法研究蜂毒素与中心蛋白的作用 | 第71-72页 |
| ·蜂毒素对中心蛋白构象的影响 | 第72-73页 |
| ·蜂毒素对中心蛋白二级结构的影响 | 第73-74页 |
| ·荧光偏振法研究蜂毒素与中心蛋白的作用 | 第74-76页 |
| ·荧光发射光谱法研究蜂毒素与中心蛋白的作用 | 第76-79页 |
| ·结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-83页 |
| 第五章 中心蛋白聚合性质的研究 | 第83-98页 |
| ·引言 | 第83页 |
| ·材料 | 第83-85页 |
| ·主要试剂 | 第83页 |
| ·主要试剂的配制 | 第83-84页 |
| ·主要仪器 | 第84页 |
| ·菌株和质粒 | 第84-85页 |
| ·方法 | 第85-87页 |
| ·酵母双杂交 | 第85-86页 |
| ·稀土离子(Tb~(3+))储备液的配制 | 第86页 |
| ·中心蛋白及其片段分子的分离、纯化 | 第86页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(Tris-glycine系统) | 第86页 |
| ·Pull-down实验 | 第86-87页 |
| ·共振光散射荧光光谱 | 第87页 |
| ·结果与讨论 | 第87-95页 |
| ·中心蛋白体外相互作用研究pull-down分析 | 第87-89页 |
| ·中心蛋白相互作用的光谱学研究 | 第89-92页 |
| ·Native-PAGE法研究EoCen的聚合 | 第92-93页 |
| ·中心蛋白体内相互作用研究 | 第93-95页 |
| ·结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-98页 |
| 第六章 Mg~(2+)对中心蛋白性质的影响 | 第98-109页 |
| ·引言 | 第98页 |
| ·材料 | 第98-99页 |
| ·主要试剂 | 第98页 |
| ·主要仪器 | 第98-99页 |
| ·方法 | 第99-100页 |
| ·稀土离子(Tb~(3+))储备液的配制 | 第99页 |
| ·MgCl_2储备液的配制 | 第99页 |
| ·中心蛋白以及其片段分子的分离、纯化 | 第99页 |
| ·蜂毒素储备液的配制 | 第99页 |
| ·光谱测定 | 第99-100页 |
| ·结果与讨论 | 第100-106页 |
| ·Mg~(2+)对EoCen二级结构的影响 | 第100-101页 |
| ·Mg~(2+)对EoCen构象的影响 | 第101-103页 |
| ·Mg~(2+)对EoCen与模拟靶肽结合的影响 | 第103-106页 |
| ·结论 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-109页 |
| 第七章 Lu~(3+)对中心蛋白生长速度的影响 | 第109-113页 |
| ·引言 | 第109页 |
| ·材料 | 第109-110页 |
| ·主要试剂 | 第109页 |
| ·菌种与质粒 | 第109页 |
| ·主要仪器 | 第109-110页 |
| ·方法 | 第110页 |
| ·重组质粒pGEX-6p-EoCen的构建 | 第110页 |
| ·菌体培养 | 第110页 |
| ·Lu~(3+)储备液的配制 | 第110页 |
| ·LB培养基的配制 | 第110页 |
| ·菌体浓度的测定 | 第110页 |
| ·结果与讨论 | 第110-111页 |
| ·结论 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-113页 |
| 总结与展望 | 第113-116页 |
| 总结 | 第113-115页 |
| 展望 | 第115-116页 |
| 附录Ⅰ | 第116-118页 |
| 附录Ⅱ | 第118-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
