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MSTN和FNDC5调控梅山猪脂肪沉积和胰岛素敏感性的功能研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
缩略词表第13-14页
第一章 文献综述第14-41页
    引言第14-15页
    1.1 肥胖第15-22页
        1.1.1 肥胖的分类第15页
        1.1.2 肥胖的标准第15-16页
        1.1.3 肥胖人群的分布第16-19页
        1.1.4 肥胖的诱发因素第19-21页
        1.1.5 肥胖的危害第21-22页
    1.2 糖尿病第22-28页
        1.2.1 糖尿病的分类第22页
        1.2.2 糖尿病的检测和症状第22-23页
        1.2.3 糖尿病病人的分布第23-26页
        1.2.4 糖尿病的诱因第26-27页
        1.2.5 糖尿病的危害第27-28页
    1.3 MSTN第28-37页
        1.3.1 MSTN的发现第28页
        1.3.2 MSTN的结构第28-29页
        1.3.3 MSTN的表达第29-30页
        1.3.4 MSTN的信号通路第30-32页
        1.3.5 MSTN的功能第32-37页
    1.4 FNDC5/Irisin第37-41页
        1.4.1 FNDC5/Irisin的发现第37-38页
        1.4.2 FNDC5/Irisin的结构第38-39页
        1.4.3 FNDC5的表达第39页
        1.4.4 FNDC5/Irisin的功能第39-41页
第二章 材料与方法第41-63页
    2.1 实验材料第41-45页
        2.1.1 实验动物第41页
        2.1.2 细胞第41页
        2.1.3 菌株,质粒和慢病毒第41页
        2.1.4 实验仪器第41-42页
        2.1.5 耗材第42页
        2.1.6 试剂和抗体第42-44页
        2.1.7 实验试剂的配制第44-45页
        2.1.8 实验分析软件第45页
    2.2 实验方法第45-63页
        2.2.1 细胞和组织基因组提取第45-46页
        2.2.2 感受态细胞的转化第46页
        2.2.3 质粒DNA提取第46页
        2.2.4 PCR反应条件及其体系第46-48页
        2.2.5 PCR产物的回收第48页
        2.2.6 PCR产物连接T载体第48-49页
        2.2.7 RNA的提取第49-50页
        2.2.8 反转录和qPCR第50-51页
        2.2.9 细胞和组织总蛋白的提取第51页
        2.2.10 蛋白浓度的测定第51页
        2.2.11 蛋白电泳和Western blot第51-53页
        2.2.12 酶联免疫实验第53-54页
        2.2.13 cDNA5'末端快速扩增(5'RACE)第54-56页
        2.2.14 cDNA 3'末端快速扩增(3'RACE)第56-59页
        2.2.15 HE染色和免疫组织化学第59-60页
        2.2.16 原代成肌细胞分离第60页
        2.2.17 原代前脂肪细胞分离第60-61页
        2.2.18 前脂肪细胞诱导成脂分化及其油红O染色第61页
        2.2.19 SiRNA载体构建和慢病毒载体的包被及其转染第61-63页
第三章 实验结果与分析第63-92页
    3.1 MSTN基因编辑梅山猪的配种与基因型鉴定第63-64页
        3.1.1 MSTN基因编辑猪配种第63页
        3.1.2 梅山猪MSTN基因型的鉴定第63-64页
    3.2 MSTN~(-/-)梅山猪骨骼肌的变化第64-70页
        3.2.1 MSTN~(-/-)基因型梅山猪体重的变化第64-65页
        3.2.2 MSTN~(-/-)基因型梅山猪不同部位骨骼肌含量的变化第65-66页
        3.2.3 MSTN~(-/-)基因型梅山猪瘦肉率的变化第66-67页
        3.2.4 MSTN~(-/-)基因型梅山猪眼肌面积的变化第67-68页
        3.2.5 MSTN~(-/-)基因型梅山猪骨骼肌中肌纤维面积的变化第68-69页
        3.2.6 MSTN~(-/-)基因型梅山猪骨骼肌中肌纤维数目的变化第69-70页
    3.3 MSTN~(-/-)基因型梅山猪脂肪的变化第70-76页
        3.3.1 MSTN~(-/-)基因型梅山猪皮下脂肪含量的变化第70页
        3.3.2 MSTN~(-/-)基因型梅山猪背膘厚度的变化第70-71页
        3.3.3 MSTN~(-/-)基因型梅山猪板油含量的变化第71页
        3.3.4 MSTN~(-/-)基因型梅山猪脂肪相关因子的变化第71-72页
        3.3.5 MSTN~(-/-)基因型梅山猪背部皮下脂肪细胞的大小第72-73页
        3.3.6 MSTN~(-/-)基因型梅山猪背部皮下脂肪中UCP家族蛋白的变化第73-74页
        3.3.7 MSTN~(-/-)基因型梅山猪背部皮下脂肪中棕色脂肪标记基因的变化第74-75页
        3.3.8 MSTN~(-/-)基因型梅山猪背部皮下脂肪中米色脂肪标记基因的变化第75-76页
    3.4 MSTN~(-/-)基因型梅山猪的胰岛素的变化第76-79页
        3.4.1 MSTN~(-/-)基因型梅山猪血糖含量的变化第76页
        3.4.2 MSTN~(-/-)基因型梅山猪血清中胰岛素的含量第76-77页
        3.4.3 MSTN~(-/-)基因型梅山猪胰岛素敏感性的变化第77-78页
        3.4.4 MSTN~(-/-)基因型梅山猪的葡萄糖耐受性的变化第78页
        3.4.5 MSTN~(-/-)基因型梅山猪IRS1和InsR的变化第78-79页
        3.4.6 MSTN~(-/-)基因型梅山猪胰岛素信号通路的变化第79页
    3.5 MSTN~(-/-)基因型梅山猪背最长肌中FNDC5含量的变化第79-80页
    3.6 梅山猪FNDC5表达模式第80-84页
        3.6.1 NCBI中猪FNDC5的序列第80-81页
        3.6.2 猪FNDC5的转录本第81-82页
        3.6.3 梅山猪FNDC5的表达谱第82-84页
    3.7 FNDC5促进梅山猪原代前脂肪细胞成脂分化第84-85页
    3.8 MSTN与FNDC5调控原代前脂肪细胞成脂分化的关系第85-86页
        3.8.1 MSTN~(-/-)梅山猪原代前脂肪细胞成脂分化能量增强第85-86页
        3.8.2 促进FNDC5的表达并不是MSTN调控前脂肪细胞成脂分化的唯一途径第86页
    3.9 FNDC5增强了梅山猪原代成肌细胞的胰岛素信号通路第86-88页
    3.10 MSTN与FNDC5调控原代成肌细胞胰岛素信号通路的关系第88-89页
        3.10.1 MSTN~(-/-)梅山猪原代成肌细胞的胰岛素信号通路明显增强第88页
        3.10.2 促进FNDC5的表达并不是MSTN调控原代成肌细胞胰岛素信号通路的唯一途径第88-89页
    3.11 讨论与分析第89-92页
第四章 结论第92-93页
参考文献第93-104页
致谢第104-105页
附录第105-106页
作者简历第106页

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