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小麦幼胚农杆菌转化体系优化和HMW-GS基因转化研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 绪论第13-30页
   ·高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)对小麦品质特性的影响第13-14页
   ·HMW-GS基因的遗传转化方法第14-16页
     ·基因枪法第14-15页
     ·花粉管通道法第15页
     ·农杆菌介导法第15-16页
   ·小麦农杆菌转化研究现状第16-28页
     ·农杆菌介导的遗传转化机理第16-17页
     ·小麦农杆菌转化研究进展第17-18页
     ·小麦不同外植体农杆菌转化进展第18-20页
     ·影响农杆菌法转化小麦幼胚的因素第20-26页
     ·农杆菌转化小麦幼胚存在的主要问题第26-28页
   ·本研究的意义、主要内容及技术路线第28-30页
     ·立题意义第28-29页
     ·技术路线第29-30页
第二章 小麦幼胚农杆菌转化体系优化第30-55页
   ·实验材枓第30-32页
     ·外源基因、质粒载体及其农杆菌菌系第30页
     ·小麦材料第30-31页
     ·试剂及耗材第31-32页
     ·仪器设备第32页
   ·研究方法第32-37页
     ·小麦幼胚培养和转化方法第32-34页
     ·生长素种类、浓度及配比优化的设计第34-35页
     ·培养基添加其它成分对抗性愈伤组织诱导作用的设计第35页
     ·小麦灌浆期间温度条件对再生和转化影响的设计第35-36页
     ·幼胚破碎处理培养第36页
     ·农杆菌敏感小麦基因型的筛选第36-37页
   ·结果与分析第37-53页
     ·小麦幼胚农杆菌侵染后高再生力基因型的筛选第37-38页
     ·不同生长素配比对获得抗性再生植株的影响第38-43页
     ·添加其它成分和简化培养基对获得抗性再生植株的影响第43-46页
     ·不同温度条件对小麦再生和转化的影响第46-48页
     ·破碎处理小麦幼胚对再生效果的影响第48-52页
     ·农杆菌敏感小麦基因型的筛选第52-53页
   ·问题讨论第53-55页
     ·关于农杆菌转化高培养力小麦基因型的筛选第53页
     ·关于胚性愈伤组织诱导率和抗性植株再生率第53页
     ·关于抑制幼胚褐化坏死培养基成分改进第53页
     ·关于幼胚处理方法改进第53-54页
     ·关于不同温度条件对小麦再生和转化的影响第54页
     ·关于农杆菌敏感小麦基因型筛选第54-55页
第三章 高分子量谷蛋白亚基基因向小麦中的转化第55-73页
   ·实验材枓第55-57页
     ·外源基因、质粒载体及农杆菌菌系第55-56页
     ·小麦材料第56-57页
     ·试剂及耗材第57页
     ·仪器设备第57页
     ·PCR引物第57页
   ·研究方法第57-62页
     ·农杆菌介导法转化小麦幼胚第57-58页
     ·小麦抗性再生植株DNA提取第58-59页
     ·质粒DNA提取方法第59页
     ·DNA片段的回收与纯化第59-60页
     ·抗性再生植株的PCR检测第60页
     ·抗性再生植株成熟籽粒的SDS-PAGE分析第60-62页
   ·结果与分析第62-71页
     ·小麦幼胚农杆菌转化及抗性再生植株的获得第62-65页
     ·T_0 代抗性再生植株PCR检测第65-66页
     ·T_1 代转基因植株PCR检测和遗传分析第66-67页
     ·T_1 代成熟籽粒的SDS-PAGE分析第67-68页
     ·T_2 代转基因植株PCR检测第68-69页
     ·转HMW-GS基因后代性状变异第69-71页
   ·问题讨论第71-73页
     ·关于小麦幼胚侵染后的褐化拯救和转化效率第71页
     ·T_1 代植株分离比例不符合3:1 的可能原因第71页
     ·关于高分子量麦谷蛋白亚基转基因沉默及异常重组第71-72页
     ·关于农艺性状变异体第72-73页
第四章 结论第73-74页
参考文献第74-81页
致谢第81-82页
作者简历第82页

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