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RNA干扰核糖核酸酶抑制因子表达对膀胱癌BIU-87细胞侵袭和转移的影响

英汉缩略语名词对照第1-9页
中文摘要第9-11页
英文摘要第11-13页
论文正文:RNA 干扰核糖核酸酶抑制因子表达对膀胱癌BIU-87 细胞侵袭和转移的影响第13-40页
 前言第13-15页
 第一部分 RI siRNA 干扰重组表达载体的构建与鉴定第15-22页
  1 材料和方法第15-20页
   ·材料第15-16页
     ·表达载体、菌株第15页
     ·细菌培养及分子克隆相关试剂第15页
     ·主要仪器第15页
     ·溶液的制备第15-16页
   ·实验方法第16-20页
     ·RI 基因特异性siRNA 设计第17页
     ·RI siRNA 表达重组质粒的构建第17-18页
     ·DH5α感受态细菌的制备以及连接产物的转化第18-19页
     ·重组质粒的提取第19页
     ·重组质粒的酶切鉴定第19页
     ·重组质粒的测序鉴定第19-20页
  2 实验结果第20-21页
   ·pGenesil-1 的单酶切鉴定第20-21页
   ·重组质粒的DNA 测序鉴定第21页
  3 结论第21-22页
 第二部分 RI siRNA 真核表达质粒对BIU-87 细胞中RI 基因表达的抑制第22-32页
  1 材料和方法第22-28页
   ·材料第22-24页
     ·菌株和细胞第22页
     ·细胞培养和抗体相关相关试剂第22页
     ·其它试剂第22页
     ·细胞培养用试剂配制第22-23页
     ·核酸分析用试剂配制第23页
     ·蛋白分析用试剂配制第23-24页
     ·主要仪器与设备第24页
   ·实验方法第24-28页
     ·人膀胱癌BIU-87 细胞的培养第24页
     ·重组质粒的去内毒素处理和细胞转染第24页
     ·新霉素抗性筛选稳定转染细胞第24-25页
     ·Trizol 提取细胞总RNA第25-26页
     ·RT-PCR 一步法进行逆转录和PCR 反应第26页
     ·Western 检测RI 蛋白表达第26-27页
     ·免疫细胞化学第27页
     ·统计学分析第27-28页
  2 实验结果第28-31页
     ·转染后荧光观察和稳定细胞株的筛选第28-29页
     ·RI mRNA 表达水平变化第29页
     ·RI 蛋白表达水平变化第29-30页
     ·免疫细胞化学分析第30-31页
  3 结论第31-32页
 第三部分 RI siRNA 对BIU-87 细胞的黏附、迁移和侵袭等生物学特性的影响第32-40页
  1 材料与方法第32-34页
   ·材料第32页
     ·细胞及细胞培养试剂第32页
     ·抗体试剂第32页
     ·其它试剂第32页
     ·主要仪器与设备第32页
   ·实验方法第32-34页
     ·细胞形态观察第32-33页
     ·细胞黏附能力检测第33页
     ·细胞迁移能力检测第33页
     ·侵袭能力检测第33页
     ·MMP-2 MMP-9 蛋白表达的检测第33页
     ·细胞骨架微丝的荧光分析观察第33-34页
     ·统计学分析第34页
  2 实验结果第34-38页
   ·细胞的形态学改变第34页
   ·黏附能力改变第34-35页
   ·迁移能力改变第35-36页
   ·侵袭能力改变第36-37页
   ·基质金属基质酶 MMP-2、MMP-9 表达变化第37-38页
   ·细胞骨架微丝的变化第38页
  3 结论第38-40页
讨论第40-43页
参考文献第43-46页
文献综述第46-53页
致谢第53-54页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第54页

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