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细胞凋亡中Cyclin A-Cdk2底物的筛选及其功能研究

提要第1-7页
第一篇 前言第7-23页
 第一章 背景知识第7-20页
  第一节 细胞凋亡概述第7页
  第二节 细胞凋亡通路及相关分子第7-15页
  第三节 Cyclin A-Cdk2 概述第15-18页
  第四节 紫杉醇的研究进展第18-20页
 第二章 论文的研究目的和设计思路第20-23页
  第一节 论文的研究目的第20-21页
  第二节 论文设计思路第21-23页
第二篇 材料与方法第23-30页
 第一章 材料与试剂第23-24页
  一、菌株和细胞株第23页
  二、试剂和酶类第23页
  三、抗体第23页
  四、主要溶液第23-24页
 第二章 实验方法第24-30页
  一、细胞培养第24页
  二、全细胞裂解液的制备第24-25页
  三、线粒体及胞浆蛋白质的分离和制备第25-26页
  四、BCA法测定蛋白质浓度第26页
  五、体外Caspase活力测定第26页
  六、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE Assay)第26页
  七、免疫印迹分析第26-27页
  八、DNA转染第27-28页
  九、MitoCapture 染色测线粒体膜电位第28页
  十、质粒构建第28-29页
  十一、GST融合蛋白的表达和纯化第29-30页
  十二、体外磷酸化实验第30页
  十三、免疫共沉淀第30页
第三篇 结果与讨论第30-52页
 第一章 Paclitaxel诱导HeLa细胞凋亡中Cdk2 的作用机制研究第30-39页
  第一节 Cyclin A-Cdk2 在 Paclitaxel 诱导 HeLa 细胞凋亡过程中的必要性第30-35页
  第二节 Cyclin A-Cdk2 调控线粒体膜通透性变化第35-38页
  第三节 小结第38-39页
 第二章 Cyclin A-Cdk2 细胞凋亡特异性底物的筛选第39-44页
  第一节 Bid、Bad、Bik、Bmf、BimS基因的克隆、表达及融合蛋白的纯化第39-42页
  第二节 对Bid、Bad、Bik、Bmf、BimS的体外激酶实验第42-43页
  第三节 小结第43-44页
 第三章 Cyclin A-Cdk2 磷酸化Bad调控细胞凋亡机制的研究第44-52页
  第一节 Cyclin A-Cdk2 磷酸化Bad第91 位丝氨酸第44-48页
  第二节 Bad蛋白质91 位丝氨酸的磷酸化增强其促凋亡活性第48-51页
  第三节 小结第51-52页
结论第52-53页
参考文献第53-65页
攻读博士学位期间发表论文第65-66页
致谢第66-67页
中文摘要第67-70页
Abstract第70-73页
缩略语第73-74页

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