| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-28页 |
| ·霉形体概述 | 第15-18页 |
| ·研究历史 | 第15页 |
| ·病原学特征 | 第15-17页 |
| ·霉形体新种不断发现 | 第17页 |
| ·抗原特性 | 第17-18页 |
| ·鸡毒霉形体的研究现状 | 第18-25页 |
| ·鸡毒霉形体的流行病学研究 | 第18-19页 |
| ·流行概况 | 第18页 |
| ·水平传播和垂直传播并存 | 第18-19页 |
| ·抗药菌株出现与临床复发率较高 | 第19页 |
| ·易与其它细菌性、病毒性疾病并发或继发感染 | 第19页 |
| ·发病年龄与季节 | 第19页 |
| ·应激因素对本病的影响 | 第19页 |
| ·鸡毒霉形体的临床症状与病理变化 | 第19-20页 |
| ·鸡毒霉形体的防控 | 第20-21页 |
| ·药物防治 | 第20页 |
| ·疫苗接种 | 第20-21页 |
| ·建立 MG阴性鸡群 | 第21页 |
| ·鸡毒霉形体检测方法的研究 | 第21-25页 |
| ·病原的分离鉴定 | 第21-22页 |
| ·免疫学检测方法 | 第22-23页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第23-25页 |
| ·杂交瘤技术及单克隆抗体 | 第25-27页 |
| ·杂交瘤技术的原理与操作流程 | 第25-26页 |
| ·单克隆抗体及其应用现状 | 第26-27页 |
| ·研究目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二章 鸡毒霉形体多克隆抗体的制备 | 第28-35页 |
| ·材料与方法 | 第28-31页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·实验动物及菌株 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·溶液 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-31页 |
| ·抗原的制备 | 第28-29页 |
| ·抗原的乳化 | 第29页 |
| ·家兔的免疫 | 第29-30页 |
| ·健康兔血清 IgG的粗提 | 第30页 |
| ·粗提兔血清 IgG的纯化 | 第30-31页 |
| ·纯度鉴定 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-33页 |
| ·纯化后的MG-HS在 FM-4固体培养基上的菌落形态观察 | 第31页 |
| ·抗原浓度的测定 | 第31-32页 |
| ·免疫血清 IgG的提取及纯化 | 第32页 |
| ·纯度鉴定 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| ·抗原 | 第33页 |
| ·免疫程序 | 第33-35页 |
| 第三章 鸡毒霉形体单克隆抗体的制备 | 第35-61页 |
| ·材料和方法 | 第35-47页 |
| ·材料 | 第35-38页 |
| ·仪器 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35-36页 |
| ·溶液 | 第36-38页 |
| ·实验动物、细胞及菌株 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-47页 |
| ·抗原的制备 | 第38页 |
| ·抗原的乳化 | 第38页 |
| ·BALB/c小鼠的免疫 | 第38-39页 |
| ·BALB/c小鼠的抗体水平检测 | 第39-40页 |
| ·SP2/0骨髓瘤的准备 | 第40页 |
| ·细胞融合 | 第40-43页 |
| ·阳性孔的筛选 | 第43-44页 |
| ·阳性孔的克隆 | 第44页 |
| ·小鼠腹水法生产单克隆抗体 | 第44-45页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第45页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第45-46页 |
| ·单克隆抗体生物学特性鉴定 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-53页 |
| ·免疫小鼠血清效价的测定 | 第47-49页 |
| ·细胞融合 | 第49-50页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第50页 |
| ·杂交瘤细胞株培养上清及腹水效价的测定结果 | 第50-51页 |
| ·杂交瘤细胞染色体计数结果 | 第51页 |
| ·抗体纯化效果 | 第51页 |
| ·单克隆抗体亲和力测定结果 | 第51-52页 |
| ·单克隆抗体特异性鉴定结果 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-61页 |
| ·抗原的制备 | 第53页 |
| ·动物免疫 | 第53-54页 |
| ·动物选择 | 第53页 |
| ·佐剂 | 第53-54页 |
| ·免疫程序和免疫途径 | 第54页 |
| ·加强免疫的重要性 | 第54页 |
| ·细胞融合 | 第54-55页 |
| ·选择性培养 | 第55-56页 |
| ·细胞融合中组织培养板的选择 | 第56-57页 |
| ·饲养细胞 | 第57页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的筛选 | 第57-58页 |
| ·阳性杂交瘤的克隆化 | 第58页 |
| ·杂交瘤细胞培养过程中污染的控制 | 第58-59页 |
| ·单克隆抗体的生产 | 第59页 |
| ·关于单克隆抗体的纯化 | 第59-60页 |
| ·关于单克隆抗体的亲和力 | 第60-61页 |
| 第四章 鸡毒霉形体间接夹心 ELISA检测方法的建立 | 第61-71页 |
| ·材料和方法 | 第61-64页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·方法 | 第62-64页 |
| ·间接夹心 ELISA的操作流程 | 第62页 |
| ·第一抗体和第二抗体最佳工作浓度的确定 | 第62-63页 |
| ·临界点的确定 | 第63页 |
| ·敏感性试验 | 第63页 |
| ·特异性试验 | 第63页 |
| ·重复性试验 | 第63-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-67页 |
| ·第一抗体(Ab1)和第二抗体(Ab2)最佳工作浓度测定结果 | 第64-65页 |
| ·阴、阳性临界点的测定结果 | 第65-66页 |
| ·敏感性试验结果 | 第66页 |
| ·交叉反应性试验结果 | 第66页 |
| ·重复性试验结果 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-70页 |
| ·第一抗体和第二抗体工作浓度的选择 | 第67-68页 |
| ·封闭 | 第68页 |
| ·酶标板的选择 | 第68-69页 |
| ·显色系统的选择 | 第69页 |
| ·判定标准 | 第69页 |
| ·特异性与灵敏性 | 第69-70页 |
| ·重复性 | 第70页 |
| ·结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
