| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-15页 |
| 绪论 | 第15-25页 |
| ·肿瘤的播散 | 第15-17页 |
| ·肿瘤侵袭和转移的基本过程 | 第15页 |
| ·肿瘤侵袭和转移的分子机制 | 第15-17页 |
| ·黏附分子 | 第15-16页 |
| ·细胞外基质的降解 | 第16页 |
| ·肿瘤转移的基因调控 | 第16-17页 |
| ·CD44家族成员 | 第17-20页 |
| ·CD44的蛋白结构和功能 | 第17-19页 |
| ·CD44分子在人类恶性肿瘤中的表达 | 第19页 |
| ·CD44与肿瘤转移的关系 | 第19-20页 |
| ·MMPs的家族成员及功能 | 第20-23页 |
| ·MMP-2、MMP-9的分子结构 | 第21页 |
| ·MMP-2、MMP-9的调节 | 第21-22页 |
| ·MMP-2、MMP-9在乳腺癌组织中表达与预后的关系 | 第22-23页 |
| ·课题的着眼点和主要的研究思路 | 第23-25页 |
| 第一部分 人CD44基因真核表达载体构建及在乳腺癌细胞株中表达 | 第25-38页 |
| ·材料与方法 | 第25-32页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·菌种和质粒 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-32页 |
| ·细胞培养 | 第27页 |
| ·RT-PCR检测CD44 mRNA的表达 | 第27-29页 |
| ·流式细胞术检测CD44蛋白的表达 | 第29页 |
| ·pcDNA3.1-CD44v真核表达载体的构建 | 第29-31页 |
| ·基因转染及克隆筛选 | 第31页 |
| ·统计学分析 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-36页 |
| ·MCF-7细胞及MCF-7/Adr细胞CD44的表达 | 第32页 |
| ·CD44基因TA克隆及酶切鉴定 | 第32-34页 |
| ·真核表达载体 pcDNA3.1-CD44v 的酶切鉴定 | 第34-35页 |
| ·转染前后CD44基因和蛋白的表达情况 | 第35-36页 |
| ·G418筛选获得稳定表达CD44的MCF-7细胞克隆 | 第36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第二部分 CD44变异体增强MCF-7细胞的侵袭作用 | 第38-49页 |
| ·材料与方法 | 第39-45页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40-45页 |
| ·细胞培养,转染及透明质酸处理细胞 | 第40页 |
| ·RT-PCR检测CD44v、MMP-2及MMP-9 mRNA的表达 | 第40-41页 |
| ·明胶酶谱法检测MMP-2,MMP-9的活性 | 第41-42页 |
| ·Transwell小室检测细胞侵袭能力 | 第42页 |
| ·western blotting及明胶酶谱法检测CD44v调节MMP-2、MMP-9的机制 | 第42-45页 |
| ·统计分析 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-48页 |
| ·CD44v及MMP-2、MMP-9 mRNA的表达情况 | 第45页 |
| ·明胶酶谱法分析MMP-2、MMP-9的活性 | 第45-46页 |
| ·westem blotting检测HA及MAPKs通路抑制剂对erk及p-erk表达的影响 | 第46页 |
| ·明胶酶谱法检测HA及MAPKs通路抑制剂对MMP-2,MMP-9分泌的影响 | 第46-47页 |
| ·CD44变异体对MCF-7细胞侵袭能力的影响 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 第三部分 CD44v对人乳腺癌细胞株细胞增殖能力的影响 | 第49-53页 |
| ·材料与方法 | 第49-50页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·主要试剂 | 第49-50页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| ·方法 | 第50页 |
| ·细胞培养,基因转染 | 第50页 |
| ·显微计数法测定细胞的增殖活力 | 第50页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期 | 第50页 |
| ·统计学分析 | 第50页 |
| ·结果 | 第50-52页 |
| ·CD44变异体促进MCF-7细胞增殖 | 第50-51页 |
| ·CD44变异体对细胞周期的影响 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 5 主要结论与展望 | 第53-54页 |
| ·主要结论 | 第53页 |
| ·展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 英文缩写索引 | 第59-60页 |
| 攻读硕士期间发表文章 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
