| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-23页 |
| ·棉花转基因工程研究现状 | 第12-13页 |
| ·棉花抗虫基因工程 | 第12页 |
| ·棉花抗除草剂基因工程 | 第12-13页 |
| ·棉花抗病基因工程 | 第13页 |
| ·其他棉花基因工程 | 第13页 |
| ·棉花转基因常用方法 | 第13页 |
| ·RNA干涉技术及其在棉花上的应用 | 第13-21页 |
| ·RNA干涉技术简介 | 第13-14页 |
| ·RNAi作用机制 | 第14-15页 |
| ·RNAi在棉花中的研究与应用 | 第15-18页 |
| ·RNAi在其他植物和农业中的应用 | 第18-20页 |
| ·RNAi在棉花研究和应用中的展望 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的及其意义 | 第21-22页 |
| ·实验技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 RNA干涉表达载体PCRI1210的验证 | 第23-41页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·烟草材料 | 第23页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·酶和生化试剂 | 第23-24页 |
| ·试剂盒 | 第24页 |
| ·引物合成和测序 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-32页 |
| ·种植烟草幼苗 | 第24页 |
| ·干涉表达框表达效果检测载体pCRI11210-GUS的构建 | 第24-28页 |
| ·LBA4404农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第28-29页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第29-30页 |
| ·转基因烟草的分子生物学和GFP检测 | 第30-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-40页 |
| ·pCRI1210 TUB intron两侧多克隆位点酶切验证 | 第32-33页 |
| ·pCRI1210和pBI121的双酶切 | 第33页 |
| ·大肠杆菌转化子的菌落PCR检测 | 第33-34页 |
| ·大肠杆菌转化子的酶切检测 | 第34-35页 |
| ·pCRI1210-GUS和pBI121转化农杆菌 | 第35页 |
| ·菌落PCR检测农杆菌pCRI1210-GUS和pBI121 | 第35-36页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第36-39页 |
| ·转基因烟草的分子生物学检测 | 第39页 |
| ·转基因烟草生长状态 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 第三章 陆地棉体细胞胚胎发生相关ESTS功能验证 | 第41-64页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·棉花材料 | 第41页 |
| ·菌株和质粒 | 第41-42页 |
| ·酶和生化试剂 | 第42页 |
| ·试剂盒 | 第42页 |
| ·引物合成和测序 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-51页 |
| ·各EST pMD19-T simple载体的构建 | 第42-44页 |
| ·各EST干涉载体的构建 | 第44-45页 |
| ·农杆菌介导转化棉花 | 第45-46页 |
| ·半定量RT-PCR | 第46-48页 |
| ·基因枪轰击法转化棉花 | 第48-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-62页 |
| ·各EST碱基序列及其功能比对 | 第51-52页 |
| ·EST序列的获得和干涉载体的构建 | 第52-56页 |
| ·农杆菌介导法转化棉花 | 第56-58页 |
| ·愈伤组织的分子生物学检测 | 第58-60页 |
| ·半定量RT-PCR | 第60-62页 |
| ·基因枪轰击法转化棉花 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 第四章 创新点 | 第64-65页 |
| 第五章 全文结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 附录 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 作者简历 | 第80页 |
