| 目录 | 第1-9页 |
| 缩略语 | 第9-10页 |
| 中文摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 背景综述:抑癌基因ARF | 第12-54页 |
| 第一节 INK4a/ARF基因位点 | 第12-19页 |
| ·INK4 gene family | 第12-14页 |
| ·INK4a/ARF等位基因 | 第14-19页 |
| ·p16INK4a | 第14-16页 |
| ·ARF | 第16-18页 |
| ·INK4a-ARF的生物学功能 | 第18-19页 |
| 第二节 ARF的功能和分子机制 | 第19-43页 |
| ·ARF-p53途径:ARF依赖于p53的功能 | 第19-29页 |
| ·ARF对细胞周期的调控作用 | 第19-20页 |
| ·ARF与细胞凋亡 | 第20-21页 |
| ·ARF-p53分子通路的分子机制 | 第21-28页 |
| ·p53蛋白及其通路 | 第21-22页 |
| ·癌基因通过诱导ARF激活p53途径 | 第22-24页 |
| ·ARF是p53通路的关键激活者 | 第24-25页 |
| ·Mdm2是ARF活化p53的关键分子 | 第25-28页 |
| ·ARF调节p53的其他途径 | 第28-29页 |
| ·ARF的非p53依赖的调节通路 | 第29-38页 |
| ·ARF对其他途径的调节 | 第30-31页 |
| ·ARF对E2F-1和DP1的调控 | 第30-31页 |
| ·ARF对c-Myc的调控 | 第31页 |
| ·ARF对NF-KB活性的调节 | 第31页 |
| ·ARF调控眼部HVS的发育 | 第31-33页 |
| ·ARF对NPM/B23的调控 | 第33-35页 |
| ·ARF诱导的泛素化修饰 | 第35-36页 |
| ·ARF介导的细胞自体吞噬 | 第36-37页 |
| ·可与ARF结合的其他物质 | 第37-38页 |
| ·ARF研究中的一些问题 | 第38-43页 |
| ·ARF到底是一种什么样的蛋白?是否有意义? | 第39-40页 |
| ·ARF如何影响DNA损伤反应? | 第40-41页 |
| ·ARF是否直接调节基因的表达? | 第41-43页 |
| 第三节 ARF的失活和调节 | 第43-48页 |
| ·ARF的功能失活机制 | 第43-44页 |
| ·基因缺失 | 第43-44页 |
| ·基因突变 | 第44页 |
| ·启动子甲基化沉默 | 第44页 |
| ·ARF基因的表达调控 | 第44-48页 |
| ·Bmi-1 | 第45页 |
| ·DMP1 | 第45-46页 |
| ·TBX2 | 第46页 |
| ·DAP激酶 | 第46-47页 |
| ·Pokemon | 第47页 |
| ·Twist | 第47-48页 |
| 第四节 ARF蛋白与肿瘤 | 第48-54页 |
| ·黑色素瘤 | 第49页 |
| ·血液系统恶性病变 | 第49页 |
| ·肺癌 | 第49-50页 |
| ·胶质细胞瘤 | 第50页 |
| ·结肠癌 | 第50页 |
| ·妇科肿瘤 | 第50-51页 |
| ·INK4a-ARF基因与卵巢癌 | 第50页 |
| ·INK4a-ARF基因与子宫内膜癌 | 第50-51页 |
| ·INK4a-ARF基因与宫颈癌 | 第51页 |
| ·INK4a-ARF基因与外阴癌 | 第51页 |
| ·ARF蛋白在基因治疗中的现状 | 第51-54页 |
| 第二章 实验结果和讨论 | 第54-78页 |
| 第一节 背景介绍 | 第54-56页 |
| 第二节 实验结果 | 第56-74页 |
| ·Miz-1与ARF相互结合 | 第56-60页 |
| ·Miz-1抑制p53的转录活性 | 第60-63页 |
| ·Miz-1通过其锌指结构域与p53的DBD结构域结合从而减少了p53与其靶定的启动子序列的结合 | 第63-69页 |
| ·在调节p53介导的转录中Miz-1竞争性的结合ARF和p53 | 第69-74页 |
| 第三节 实验讨论 | 第74-76页 |
| 第四节 小结 | 第76-78页 |
| 第三章 材料和方法 | 第78-100页 |
| ·质粒和引物 | 第78-79页 |
| ·试剂和抗体 | 第79-80页 |
| ·本文主要的试验方法 | 第80-91页 |
| ·双荧光素酶报告基因分析 | 第80-81页 |
| ·酵母双杂交筛选 | 第81-83页 |
| ·染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第83-85页 |
| ·体外GST-pull down结合实验 | 第85-87页 |
| ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第87-88页 |
| ·免疫共沉淀(Co-IP) | 第88-91页 |
| ·其他常用实验技术及方法 | 第91-100页 |
| ·聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR) | 第91页 |
| ·DNA样品的琼脂糖凝胶电泳 | 第91页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第91-92页 |
| ·DNA的酶切、回收、连接与转化 | 第92页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的小规模抽提 | 第92-93页 |
| ·细胞培养和转染 | 第93-94页 |
| ·收获细胞及处理蛋白样品 | 第94-95页 |
| ·蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第95-96页 |
| ·Western Blot | 第96-97页 |
| ·蛋白质诱导表达 | 第97页 |
| ·免疫荧光染色 | 第97-100页 |
| 第四章 参考文献 | 第100-110页 |
| 致谢 | 第110-112页 |
| 附录 | 第112页 |
