| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-33页 |
| 1 植物启动子研究进展 | 第13-28页 |
| ·真核生物启动子的概念 | 第13页 |
| ·植物启动子的特征与结构 | 第13-17页 |
| ·启动子的特征 | 第13-14页 |
| ·启动子的结构 | 第14-17页 |
| ·植物启动子的保守元件 | 第14-16页 |
| ·转录起始位点 | 第14页 |
| ·TATA box | 第14-16页 |
| ·GC box | 第16页 |
| ·CAAT box | 第16页 |
| ·植物启动子特异元件 | 第16页 |
| ·远端调控元件 | 第16-17页 |
| ·植物启动子的类型 | 第17-28页 |
| ·组成型启动子 | 第17-20页 |
| ·CaMV 35S 启动子 | 第17-18页 |
| ·ACMV 启动子 | 第18页 |
| ·Nos 和Ocs 启动子 | 第18-19页 |
| ·Act1 启动子 | 第19-20页 |
| ·组织特异性启动子 | 第20-25页 |
| ·在营养器官中表达的组织特异性启动子 | 第20-22页 |
| ·根特异表达启动子 | 第20页 |
| ·茎特异表达启动子 | 第20-21页 |
| ·叶片特异表达启动子 | 第21-22页 |
| ·韧皮部特异表达启动子 | 第22页 |
| ·在生殖器官中表达的组织特异性启动子 | 第22-25页 |
| ·花特异表达启动子 | 第22-23页 |
| ·果实特异表达启动子 | 第23-24页 |
| ·种子特异表达启动子 | 第24-25页 |
| ·诱导型启动子 | 第25-28页 |
| ·植物激素诱导型启动子 | 第25页 |
| ·光诱导型启动子 | 第25-26页 |
| ·低温、干旱、盐诱导型启动子 | 第26-27页 |
| ·热诱导型启动子 | 第27页 |
| ·病原物诱导型启动子 | 第27-28页 |
| 2 启动子克隆的方法及意义 | 第28-33页 |
| ·启动子克隆方法 | 第28-32页 |
| ·利用基因组文库筛选启动子 | 第28页 |
| ·利用启动子探针载体筛选启动子 | 第28页 |
| ·反向PCR 法 | 第28-29页 |
| ·YADE 克隆法 | 第29页 |
| ·接头PCR 技术 | 第29-30页 |
| ·热不对称交错式PCR 技术 | 第30页 |
| ·试剂盒法克隆启动子 | 第30-31页 |
| ·DNA Walking SpeedUp~(TM) | 第30-31页 |
| ·TaKaRa Genome Walking Kit | 第31页 |
| ·启动子预测 | 第31-32页 |
| ·启动子克隆的意义 | 第32-33页 |
| 第二章 黄瓜3 种α-半乳糖苷酶基因组 DNA 片段的扩增 | 第33-44页 |
| ·材料与方法 | 第33-38页 |
| ·材料及试剂 | 第33-34页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·载体及菌株 | 第33页 |
| ·酶及化学试剂 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-38页 |
| ·CTAB 法提取黄瓜基因组DNA | 第34-35页 |
| ·PCR 反应扩增黄瓜3 种α-半乳糖苷酶基因组 DNA 片段 | 第35-36页 |
| ·含有目标片段重组质粒的构建 | 第36-38页 |
| ·扩增产物的回收 | 第36-37页 |
| ·连接与转化 | 第37页 |
| ·重组质粒的提取、PCR 验证、双酶切验证和序列测定 | 第37-38页 |
| ·结果分析 | 第38-44页 |
| ·黄瓜基因组DNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·PCR 反应扩增黄瓜3 种α-半乳糖苷酶基因组 DNA 片段 | 第39页 |
| ·黄瓜3 种α-半乳糖苷酶基因组DNA 片段的胶回收 | 第39-40页 |
| ·黄瓜3 种α-半乳糖苷酶基因组片段重组质粒的提取 | 第40页 |
| ·重组质粒的双酶切验证和PCR 验证 | 第40-41页 |
| ·测序结果的分析 | 第41-44页 |
| 第三章 黄瓜3 种α-半乳糖苷酶基因启动子的克隆 | 第44-67页 |
| ·材料及方法 | 第44-54页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44-45页 |
| ·方法 | 第45-54页 |
| ·黄瓜基因组DNA 的提取 | 第45-46页 |
| ·运用 DNA Walking SpeedUp Premix Kit 扩增碱性α-半乳糖苷酶Ⅰ启动子区域序列 | 第46-49页 |
| ·运用TaKaRa Genome Walking Kit 扩增碱性α-半乳糖苷酶Ⅱ启动子区域序列 | 第49-51页 |
| ·运用 DNA Walking SpeedUp Premix Kit 扩增酸性α-半乳糖苷酶Ⅱ启动子区域序列 | 第51-53页 |
| ·黄瓜3 种α-半乳糖苷酶基因步移产物的回收、验证及序列测定 | 第53页 |
| ·黄瓜3 种α-半乳糖苷酶基因启动子区域序列的拼接及PCR 验证 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-67页 |
| ·黄瓜基因组DNA 的提取 | 第54页 |
| ·克隆3 种α-半乳糖苷酶基因启动子区域序列 | 第54-62页 |
| ·DNA 步移的特异性产物及双酶切验证 | 第54-57页 |
| ·DNA 步移片段的拼接及PCR 验证 | 第57页 |
| ·黄瓜3 种α-半乳糖苷酶启动子区域测序结果分析 | 第57-62页 |
| ·黄瓜3 种α-半乳糖苷酶启动子区域序列分析 | 第62-64页 |
| ·黄瓜碱性α-半乳糖苷酶Ⅱ基因5′-UTR 的内含子序列分析 | 第64-67页 |
| 第四章 讨论 | 第67-72页 |
| ·本实验曾采用的多种启动子克隆方法 | 第67-68页 |
| ·启动子元件与α-半乳糖苷酶的可能生理功能 | 第68-71页 |
| ·胚乳特异性表达调控元件 AACACOREOSGLU81 与种子成熟和发芽 | 第68-69页 |
| ·与叶片衰老相关的脱水胁迫和黑暗应答元件ACGTATERD1 | 第69页 |
| ·低温、病原菌及乙烯诱导响应的几个启动子位点和元件 | 第69-71页 |
| ·可能的后续的试验 | 第71-72页 |
| 第五章 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第84页 |
