| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-34页 |
| ·苏云金芽胞杆菌 | 第12页 |
| ·杀虫晶体蛋白及其作用机理 | 第12-15页 |
| ·杀虫晶体蛋白 | 第12-14页 |
| ·杀虫晶体蛋白作用机制 | 第14-15页 |
| ·苏云金芽胞杆菌cry基因分类 | 第15-22页 |
| ·杀虫蛋白应用和遇到的问题 | 第22-25页 |
| ·杀虫蛋白的应用 | 第22-23页 |
| ·杀虫蛋白应用中遇到的问题 | 第23-25页 |
| ·Cry9类杀虫蛋白基因的研究现状 | 第25-27页 |
| ·杀虫晶体蛋白基因鉴定方法 | 第27-30页 |
| ·高分辨熔点系统(HRM) | 第30-33页 |
| ·HRM工作原理 | 第30页 |
| ·HRM的应用领域 | 第30-32页 |
| ·目前SNP相关研究比较及HRM技术优势 | 第32-33页 |
| ·HRM在cry基因分型中的应用 | 第33页 |
| ·本研究的立题依据和目的意义 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-44页 |
| ·实验材料 | 第34-37页 |
| ·菌株与质粒 | 第34-35页 |
| ·试剂 | 第35-36页 |
| ·供试昆虫 | 第36-37页 |
| ·仪器设备 | 第37页 |
| ·研究方法 | 第37-44页 |
| ·晶体形态观察 | 第37页 |
| ·Bt大质粒的提取 | 第37-38页 |
| ·PCR摸板的制备 | 第38页 |
| ·高分辨熔解曲线(HRM)鉴定cry9基因型 | 第38-39页 |
| ·DNA回收 | 第39页 |
| ·连接反应 | 第39页 |
| ·E.coli感受态细胞制备 | 第39-40页 |
| ·热激转化 | 第40页 |
| ·E.coli质粒DNA提取 | 第40页 |
| ·酶切体系 | 第40-41页 |
| ·cry9类全长基因的扩增、克隆及序列测定 | 第41-42页 |
| ·新基因在大肠杆菌中表达研究 | 第42页 |
| ·蛋白电泳检测 | 第42-43页 |
| ·杀虫活性测定 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-58页 |
| ·HRM平台的建立 | 第44-46页 |
| ·HRM标准样品的获得 | 第44页 |
| ·HRM引物设计 | 第44-45页 |
| ·标准样品测试HRM平台 | 第45-46页 |
| ·应用HRM平台筛选cry9类基因 | 第46-47页 |
| ·72株标准菌株cry9类基因的鉴定 | 第46页 |
| ·2000株分离株cry9类基因的鉴定 | 第46-47页 |
| ·菌株生物学特性 | 第47-50页 |
| ·扫描电镜及野生菌株蛋白图谱 | 第47-48页 |
| ·菌株大质粒图谱分析 | 第48-50页 |
| ·cry9类新基因全长的克隆及序列分析 | 第50-54页 |
| ·含单个cry9类基因菌株中新基因的全长克隆及序列分析 | 第50-52页 |
| ·T03B001菌株中cry9类新基因的全长克隆及序列分析 | 第52-53页 |
| ·新型cry9类基因的比较分析 | 第53-54页 |
| ·cry9类新基因异源表达 | 第54-56页 |
| ·cry9类新基因异源表达载体的构建 | 第54页 |
| ·cry9类新基因在大肠杆菌异源表达 | 第54-56页 |
| ·Cry9类新蛋白杀虫活性的研究 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第71页 |