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矮牵牛组织培养体系的建立和ACO基因cDNA的克隆

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
缩略词第8-13页
绪言第13-27页
 1 矮牵牛及衰老生理第13-15页
   ·矮牵牛第13-14页
   ·乙烯与矮牵牛花器官衰老的关系第14-15页
     ·植物中乙烯生物合成途径第14页
     ·植物中乙烯生物合成调节第14-15页
     ·乙烯与植物切花衰老生理第15页
 2 ACC氧化酶基因工程研究进展第15-17页
   ·ACC氧化酶第15-16页
   ·ACC氧化酶基因表达第16页
   ·ACC氧化酶基因工程研究进展第16-17页
 3 RNAi技术的研究第17-18页
   ·RNAi的概念与特点第17页
   ·RNAi的作用机制第17-18页
   ·RNAi技术在植物中的应用第18页
 4 矮牵牛组织培养研究进展第18-24页
   ·矮牵牛外植体选取第18-19页
   ·矮牵牛培养基选取第19-20页
   ·培养条件第20-21页
   ·矮牵牛组织培养激素选取及不同激素组合与比例第21-23页
     ·矮牵牛组织培养激素选取第21页
     ·矮牵牛组织培养不同激素组合与比例第21-23页
   ·矮牵牛组培苗移栽第23-24页
 5 本课题研究的目的与意义、主要研究内容和技术路线第24-27页
   ·目的与意义第24页
   ·主要研究内容第24-25页
   ·主要技术路线第25-27页
     ·组织培养技术路线第25-26页
     ·矮牵牛ACO基因cDNA克隆技术路线第26-27页
第1章 矮牵牛组织培养体系的建立第27-41页
 1 材料与方法第27-32页
   ·材料与试剂第27页
   ·方法第27-32页
     ·外植体消毒第27-28页
     ·初代培养第28-29页
     ·愈伤组织增殖培养第29页
     ·愈伤组织诱导芽的分化第29-30页
     ·不定芽的增殖培养第30页
     ·不定芽诱导生根第30-31页
     ·炼苗与移栽第31页
     ·矮牵牛愈伤组织对潮霉素(Hyg)浓度的敏感性实验第31-32页
     ·培养基和培养条件第32页
 2 结果与分析第32-36页
   ·种子灭菌对发芽的影响第32页
   ·初代培养愈伤组织的发生第32-33页
   ·愈伤组织继代培养第33页
   ·不定芽的诱导第33-35页
   ·不定芽的增殖培养第35页
   ·不定芽诱导根的分化第35页
   ·炼苗与移栽第35-36页
   ·矮牵牛愈伤组织对潮霉素浓度(Hyg)的敏感性实验第36页
 3 讨论第36-41页
   ·种子灭菌第36-37页
   ·植物生长调节剂第37-38页
   ·褐化问题第38-41页
第2章 矮牵牛ACC氧化酶基因cDNA片段的克隆第41-55页
 1 材料与方法第41-47页
   ·供试材料第41-42页
     ·植物材料第41页
     ·菌种和质粒第41页
     ·主要仪器第41-42页
     ·主要试剂第42页
   ·方法第42-47页
     ·矮牵牛衰老花瓣总RNA提取第42-43页
     ·总RNA检测第43页
     ·RT-PCR第43-45页
     ·PCR产物的克隆第45-46页
     ·重组质粒的筛选与鉴定第46-47页
     ·测序与生物信息学分析第47页
 2 结果与分析第47-52页
   ·矮牵牛RNA的提取第47-48页
     ·用不同方法提取的总RNA质量第47-48页
     ·用不同方法提取的总RNA纯度和含量第48页
   ·矮牵牛总RNA的RT-PCR及特异性条带的获得第48-49页
   ·重组质粒的鉴定第49-51页
     ·菌落PCR鉴定重组质粒第49-50页
     ·重组质粒双酶切鉴定第50-51页
   ·阳性重组质粒测序及同源性分析第51-52页
 3 讨论第52-55页
   ·矮牵牛衰老花瓣总RNA提取方法第52-53页
   ·矮牵牛ACC氧化酶基因保守片段扩增和克隆第53-55页
结论第55-57页
 1 矮牵牛组织培养再生体系第55页
 2 矮牵牛ACC氧化酶基因cDNA片段的克隆第55-57页
   ·建立了适合矮牵牛衰老花瓣总RNA提取的改良Trizol试剂法第55-56页
   ·矮牵牛ACC氧化酶基因cDNA片段的获得第56-57页
本研究主要创新点第57页
对下一步工作建议第57-59页
参考文献第59-69页
附录A第69-71页
附录B第71-73页
附录C第73-75页
致谢第75页

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