摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略词 | 第8-13页 |
绪言 | 第13-27页 |
1 矮牵牛及衰老生理 | 第13-15页 |
·矮牵牛 | 第13-14页 |
·乙烯与矮牵牛花器官衰老的关系 | 第14-15页 |
·植物中乙烯生物合成途径 | 第14页 |
·植物中乙烯生物合成调节 | 第14-15页 |
·乙烯与植物切花衰老生理 | 第15页 |
2 ACC氧化酶基因工程研究进展 | 第15-17页 |
·ACC氧化酶 | 第15-16页 |
·ACC氧化酶基因表达 | 第16页 |
·ACC氧化酶基因工程研究进展 | 第16-17页 |
3 RNAi技术的研究 | 第17-18页 |
·RNAi的概念与特点 | 第17页 |
·RNAi的作用机制 | 第17-18页 |
·RNAi技术在植物中的应用 | 第18页 |
4 矮牵牛组织培养研究进展 | 第18-24页 |
·矮牵牛外植体选取 | 第18-19页 |
·矮牵牛培养基选取 | 第19-20页 |
·培养条件 | 第20-21页 |
·矮牵牛组织培养激素选取及不同激素组合与比例 | 第21-23页 |
·矮牵牛组织培养激素选取 | 第21页 |
·矮牵牛组织培养不同激素组合与比例 | 第21-23页 |
·矮牵牛组培苗移栽 | 第23-24页 |
5 本课题研究的目的与意义、主要研究内容和技术路线 | 第24-27页 |
·目的与意义 | 第24页 |
·主要研究内容 | 第24-25页 |
·主要技术路线 | 第25-27页 |
·组织培养技术路线 | 第25-26页 |
·矮牵牛ACO基因cDNA克隆技术路线 | 第26-27页 |
第1章 矮牵牛组织培养体系的建立 | 第27-41页 |
1 材料与方法 | 第27-32页 |
·材料与试剂 | 第27页 |
·方法 | 第27-32页 |
·外植体消毒 | 第27-28页 |
·初代培养 | 第28-29页 |
·愈伤组织增殖培养 | 第29页 |
·愈伤组织诱导芽的分化 | 第29-30页 |
·不定芽的增殖培养 | 第30页 |
·不定芽诱导生根 | 第30-31页 |
·炼苗与移栽 | 第31页 |
·矮牵牛愈伤组织对潮霉素(Hyg)浓度的敏感性实验 | 第31-32页 |
·培养基和培养条件 | 第32页 |
2 结果与分析 | 第32-36页 |
·种子灭菌对发芽的影响 | 第32页 |
·初代培养愈伤组织的发生 | 第32-33页 |
·愈伤组织继代培养 | 第33页 |
·不定芽的诱导 | 第33-35页 |
·不定芽的增殖培养 | 第35页 |
·不定芽诱导根的分化 | 第35页 |
·炼苗与移栽 | 第35-36页 |
·矮牵牛愈伤组织对潮霉素浓度(Hyg)的敏感性实验 | 第36页 |
3 讨论 | 第36-41页 |
·种子灭菌 | 第36-37页 |
·植物生长调节剂 | 第37-38页 |
·褐化问题 | 第38-41页 |
第2章 矮牵牛ACC氧化酶基因cDNA片段的克隆 | 第41-55页 |
1 材料与方法 | 第41-47页 |
·供试材料 | 第41-42页 |
·植物材料 | 第41页 |
·菌种和质粒 | 第41页 |
·主要仪器 | 第41-42页 |
·主要试剂 | 第42页 |
·方法 | 第42-47页 |
·矮牵牛衰老花瓣总RNA提取 | 第42-43页 |
·总RNA检测 | 第43页 |
·RT-PCR | 第43-45页 |
·PCR产物的克隆 | 第45-46页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第46-47页 |
·测序与生物信息学分析 | 第47页 |
2 结果与分析 | 第47-52页 |
·矮牵牛RNA的提取 | 第47-48页 |
·用不同方法提取的总RNA质量 | 第47-48页 |
·用不同方法提取的总RNA纯度和含量 | 第48页 |
·矮牵牛总RNA的RT-PCR及特异性条带的获得 | 第48-49页 |
·重组质粒的鉴定 | 第49-51页 |
·菌落PCR鉴定重组质粒 | 第49-50页 |
·重组质粒双酶切鉴定 | 第50-51页 |
·阳性重组质粒测序及同源性分析 | 第51-52页 |
3 讨论 | 第52-55页 |
·矮牵牛衰老花瓣总RNA提取方法 | 第52-53页 |
·矮牵牛ACC氧化酶基因保守片段扩增和克隆 | 第53-55页 |
结论 | 第55-57页 |
1 矮牵牛组织培养再生体系 | 第55页 |
2 矮牵牛ACC氧化酶基因cDNA片段的克隆 | 第55-57页 |
·建立了适合矮牵牛衰老花瓣总RNA提取的改良Trizol试剂法 | 第55-56页 |
·矮牵牛ACC氧化酶基因cDNA片段的获得 | 第56-57页 |
本研究主要创新点 | 第57页 |
对下一步工作建议 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-69页 |
附录A | 第69-71页 |
附录B | 第71-73页 |
附录C | 第73-75页 |
致谢 | 第75页 |