丝氨酸/苏氨酸磷酸酯酶Stp1的结构与化学调控研究
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词列表 | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 金黄色葡萄球菌感染现状 | 第10页 |
| 1.2 抗生素耐药性 | 第10-12页 |
| 1.3 抗-致病力策略的抗菌药物研发 | 第12-15页 |
| 1.4 Stp1作为潜在的药物靶点 | 第15-20页 |
| 第二章 研究路线设计 | 第20-22页 |
| 2.1 研究目的和意义 | 第20页 |
| 2.2 拟解决的主要问题 | 第20-21页 |
| 2.3 研究内容 | 第21页 |
| 2.4 设计思路及路线 | 第21-22页 |
| 第三章 实验材料与实验方法 | 第22-38页 |
| 3.1 供试材料 | 第22-27页 |
| 3.1.1 实验所用质粒和菌株 | 第22页 |
| 3.1.2 实验所用试剂 | 第22-23页 |
| 3.1.3 实验所用仪器 | 第23-25页 |
| 3.1.4 实验所用试剂的配制 | 第25-27页 |
| 3.2 实验方法与步骤 | 第27-38页 |
| 3.2.1 Stp1蛋白的表达 | 第27页 |
| 3.2.2 Stp1蛋白的纯化 | 第27-29页 |
| 3.2.3 蛋白晶体的培养 | 第29页 |
| 3.2.4 晶体数据收集及结构解析 | 第29-30页 |
| 3.2.5 Stp1蛋白突变体的制备 | 第30-32页 |
| 3.2.6 Stp1小分子抑制剂的筛选与活性评价 | 第32-35页 |
| 3.2.7 等温滴定量热法 | 第35页 |
| 3.2.8 高效液相色谱法 | 第35-36页 |
| 3.2.9 差异荧光扫描 | 第36页 |
| 3.2.10 复合物晶体的培养 | 第36-38页 |
| 第四章 结果与讨论 | 第38-63页 |
| 4.1 Stp1蛋白的纯化 | 第38-40页 |
| 4.2 Stp1蛋白的晶体培养与结构解析 | 第40-46页 |
| 4.3 Stp1蛋白突变体活性测试 | 第46-47页 |
| 4.4 小分子抑制剂的活性测定 | 第47-51页 |
| 4.5 ITC实验验证Stp1与多肽的结合 | 第51-54页 |
| 4.6 Stp1是丝氨酸/苏氨酸去磷酸化酶 | 第54-60页 |
| 4.7 多肽His12与Stp1复合物晶体培养 | 第60-63页 |
| 第五章 结论 | 第63-66页 |
| 5.1 实验总结 | 第63-64页 |
| 5.2 本文创新之处 | 第64页 |
| 5.3 本文不足之处与展望 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 附录 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
