| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 缩略词 | 第15-18页 |
| 第一章 前言 | 第18-39页 |
| 1.1 HIV简介和流行病学特征 | 第18-19页 |
| 1.2 HIV分子生物学特征 | 第19-25页 |
| 1.2.1 HIV的分类 | 第20页 |
| 1.2.2 病毒结构 | 第20-22页 |
| 1.2.3 病毒基因组和病毒蛋白 | 第22-24页 |
| 1.2.4 HIV的生活周期 | 第24-25页 |
| 1.3 HIV-1的中和表位 | 第25-30页 |
| 1.3.1 gp120与相关中和表位 | 第27-29页 |
| 1.3.2 gp41与相关中和表位 | 第29页 |
| 1.3.3 CD4诱导的中和抗体 | 第29-30页 |
| 1.4 HIV-1疫苗研发 | 第30-35页 |
| 1.4.1 HIV疫苗研究的背景 | 第30-31页 |
| 1.4.2 HIV疫苗策略 | 第31-35页 |
| 1.5 HIV-1包膜糖蛋白的改造与表达 | 第35-37页 |
| 1.6 蛋白表达系统 | 第37-38页 |
| 1.7 本研究的目的意义 | 第38-39页 |
| 第二章 材料与方法 | 第39-54页 |
| 2.1 材料 | 第39-43页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第39-40页 |
| 2.1.2 质粒、菌株、蛋白、细胞等 | 第40-41页 |
| 2.1.3 常用试剂与耗材 | 第41页 |
| 2.1.4 常用溶液及培养基配置 | 第41-43页 |
| 2.2 方法 | 第43-54页 |
| 2.2.1 分子克隆常规操作 | 第43-47页 |
| 2.2.2 细胞实验常规操作 | 第47-50页 |
| 2.2.3 蛋白纯化与鉴定 | 第50-51页 |
| 2.2.4 小鼠免疫与单抗筛选相关实验 | 第51-54页 |
| 第三章 结果与分析 | 第54-70页 |
| 3.1 gp140初步改造和转染条件的摸索 | 第54-64页 |
| 3.1.1 gp140原始克隆的表达 | 第54-55页 |
| 3.1.2 HEK293细胞系的选择和转染条件的摸索 | 第55-59页 |
| 3.1.3 SOSIP R6 681-T4his的构建 | 第59-60页 |
| 3.1.4 共转HIV-1 Tat辅助gp140表达 | 第60-61页 |
| 3.1.5 重组质粒的进一步优化tpa SOSIP (G_4S)_2 663CO-T_4his | 第61-64页 |
| 3.2 gp140的纯化与鉴定 | 第64-66页 |
| 3.2.1 蛋白纯化 | 第64页 |
| 3.2.2 纯化产物鉴定 | 第64-66页 |
| 3.3 小鼠免疫与单抗筛选 | 第66-70页 |
| 3.3.1 动物分组与免疫 | 第66-67页 |
| 3.3.2 动物血清中和抗体滴度的检测 | 第67-68页 |
| 3.3.3 中和抗体的筛选与初步鉴定 | 第68-70页 |
| 第四章 讨论 | 第70-74页 |
| 4.1 重组gp140的改造与设计 | 第70-71页 |
| 4.2 膜蛋白的真核表达 | 第71-72页 |
| 4.3 重组gp140的纯化 | 第72页 |
| 4.4 重组gp140的性质鉴定 | 第72页 |
| 4.5 小鼠免疫与中和单抗的鉴定 | 第72-74页 |
| 第五章 小结与展望 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 附录 | 第92页 |
