| 中文摘要 | 第4-10页 |
| Abstract | 第10-16页 |
| 缩略语/符号说明 | 第21-23页 |
| 前言 | 第23-30页 |
| 研究背景、现状 | 第23-28页 |
| 研究目的、方法 | 第28-30页 |
| 一、多发性骨髓瘤细胞源性外泌体参与T细胞免疫的作用研究 | 第30-62页 |
| 1.1 主要试剂及仪器 | 第30-32页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第30-31页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第31-32页 |
| 1.1.3 主要溶液配制 | 第32页 |
| 1.2 实验方法 | 第32-40页 |
| 1.2.1 骨髓瘤细胞外泌体的分离鉴定 | 第32-33页 |
| 1.2.2 无菌磁珠分选CD4~+T细胞、CD8~+T细胞和Treg细胞 | 第33-35页 |
| 1.2.3 分选后CD4~+T细胞、CD8~+T细胞和Treg细胞与外泌体共培养后凋亡率检测 | 第35页 |
| 1.2.4 分选后CD4~+T细胞、CD8~+T细胞和Treg细胞与外泌体共培养后细胞活性检测 | 第35-36页 |
| 1.2.5 分选CD8~+T细胞与外泌体共培养后穿孔素和颗粒酶B检测 | 第36页 |
| 1.2.6 Treg细胞与外泌体共培养后细胞上清中IL10和TGF-β1的检测 | 第36-38页 |
| 1.2.7 RealtimePCR检测分选细胞与外泌体共培养后细胞lncRNAH19的表达 | 第38-40页 |
| 1.2.8 统计学处理 | 第40页 |
| 1.3 结果 | 第40-57页 |
| 1.3.1 骨髓瘤外泌体透射电镜结果 | 第40-42页 |
| 1.3.2 骨髓瘤外泌体蛋白定量 | 第42-43页 |
| 1.3.3 磁珠分选CD4~+T细胞、CD8~+T细胞和Treg细胞纯度 | 第43-44页 |
| 1.3.4 骨髓瘤外泌体促进健康供者CD4~+T细胞凋亡 | 第44-45页 |
| 1.3.5 骨髓瘤外泌体对健康供者CD4~+T细胞增殖活性的影响 | 第45-46页 |
| 1.3.6 骨髓瘤外泌体对MM患者CD4~+T细胞凋亡率的影响 | 第46-47页 |
| 1.3.7 骨髓瘤外泌体对MM患者CD4~+T细胞增殖活性的影响 | 第47页 |
| 1.3.8 骨髓瘤外泌体抑制健康供者CD8~+T细胞凋亡 | 第47-48页 |
| 1.3.9 骨髓瘤外泌体对MM患者CD8~+T细胞凋亡的影响 | 第48页 |
| 1.3.10 骨髓瘤外泌体对健康供者CD8~+T细胞增殖活性的影响 | 第48-49页 |
| 1.3.11 骨髓瘤外泌体对MM患者CD8~+T细胞增殖活性的影响 | 第49-50页 |
| 1.3.12 骨髓瘤外泌体对健康供者Treg细胞凋亡率的影响 | 第50-51页 |
| 1.3.13 骨髓瘤外泌体对MM患者Treg细胞凋亡率的影响 | 第51页 |
| 1.3.14 骨髓瘤外泌体对健康供者Treg细胞增殖活性的影响 | 第51-52页 |
| 1.3.15 骨髓瘤外泌体对MM患者Treg细胞增殖活性的影响 | 第52-53页 |
| 1.3.16 骨髓瘤外泌体对健康供者及MM患者CD8~+T细胞分泌穿孔素的影响 | 第53-54页 |
| 1.3.17 骨髓瘤外泌体对健康供者及MM患者CD8~+T细胞分泌颗粒酶B的影响 | 第54-55页 |
| 1.3.18 骨髓瘤外泌体对健康供者及MM患者Treg细胞IL-10的影响 | 第55-56页 |
| 1.3.19 骨髓瘤外泌体对健康供者及MM患者Treg细胞TGF-β的影响 | 第56-57页 |
| 1.3.20 骨髓瘤外泌体与健康供者T细胞共培养后lncRNAH19水平 | 第57页 |
| 1.4 讨论 | 第57-61页 |
| 1.5 小结 | 第61-62页 |
| 二、lncRNAH19参与多发性骨髓瘤硼替佐米耐药的作用研究 | 第62-100页 |
| 2.1 研究对象 | 第62-63页 |
| 2.2 主要试剂和仪器 | 第63-67页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第63-65页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第65页 |
| 2.2.3 主要溶液配制 | 第65-67页 |
| 2.3 实验方法 | 第67-80页 |
| 2.3.1 骨髓瘤患者血浆外泌体的分离鉴定 | 第67页 |
| 2.3.2 骨髓瘤患者血浆外泌体和血浆中RNA的提取 | 第67-68页 |
| 2.3.3 磁珠分选CD138+细胞 | 第68-69页 |
| 2.3.4 cDNA合成 | 第69页 |
| 2.3.5 实时定量PCR | 第69-70页 |
| 2.3.6 耐硼替佐米骨髓瘤细胞系培养 | 第70页 |
| 2.3.7 CCK8法检测细胞活力,计算敏感及耐药细胞系的IC50值 | 第70-71页 |
| 2.3.8 Annexin-V检测敏感及耐药细胞系的凋亡率 | 第71页 |
| 2.3.9 蛋白免疫印迹(Westernblot)探索硼替佐米耐药的作用机制 | 第71-73页 |
| 2.3.10 构建稳定上调lncRNAH19表达的U266、OPM2细胞系 | 第73-80页 |
| 2.3.11 统计学处理 | 第80页 |
| 2.4 结果 | 第80-95页 |
| 2.4.1 多发性骨髓瘤患者lncRNAH19表达水平升高 | 第80-83页 |
| 2.4.2 三种MM细胞系lncRNAH19水平与硼替佐米的敏感性 | 第83-86页 |
| 2.4.3 耐硼替佐米MM细胞系的培养及lncRNAH19水平变化 | 第86-90页 |
| 2.4.4 MM细胞系(OPM2、U266)lncRNAH19过表达与万珂敏感性变化 | 第90-93页 |
| 2.4.5 MM细胞系耐药机制初步探索 | 第93-95页 |
| 2.5 讨论 | 第95-99页 |
| 2.6 小结 | 第99-100页 |
| 全文结论 | 第100-101页 |
| 论文创新点 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-111页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第111-112页 |
| 综述 长链非编码RNA在多发性骨髓瘤中的作用研究进展 | 第112-120页 |
| 参考文献 | 第118-120页 |
| 致谢 | 第120-122页 |
| 个人简历 | 第122页 |
