| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 缩略语表 | 第17-20页 |
| 第一章 绪论 | 第20-36页 |
| 1 研究背景 | 第20页 |
| 2 胆固醇代谢 | 第20-30页 |
| 2.1 胆固醇合成 | 第21-23页 |
| 2.2 胆固醇吸收 | 第23-24页 |
| 2.3 胆固醇外流 | 第24-28页 |
| 2.3.1 胆固醇逆转运途径 | 第24-27页 |
| 2.3.2 胆固醇经肠道直接排出途径 | 第27-28页 |
| 2.4 核受体与胆固醇代谢 | 第28-30页 |
| 3 多酚类物质调控胆固醇代谢的研究现状 | 第30-33页 |
| 3.1 多酚类物质与胆固醇代谢 | 第30-33页 |
| 3.2 柿单宁与胆固醇代谢 | 第33页 |
| 4 本研究的目的、意义及内容 | 第33-36页 |
| 4.1 研究目的及意义 | 第33-34页 |
| 4.2 研究技术路线 | 第34页 |
| 4.3 研究内容 | 第34-36页 |
| 第二章 柿单宁对高胆固醇细胞模型中胆固醇代谢的调控机制研究 | 第36-58页 |
| 1 材料与方法 | 第36-45页 |
| 1.1 实验材料和仪器设备 | 第36-40页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第37-38页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第38页 |
| 1.1.4 主要溶液的配制 | 第38-40页 |
| 1.2 实验方法 | 第40-45页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第40页 |
| 1.2.2 HepG2及Caco-2高胆固醇细胞模型的建立 | 第40页 |
| 1.2.3 柿单宁的细胞毒性测定 | 第40-41页 |
| 1.2.4 培养液中ApoA1、ApoB、HDL-C、LDL-C以及细胞TC的测定 | 第41页 |
| 1.2.5 FilipinIII染色细胞胆固醇 | 第41页 |
| 1.2.6 22-NBD-胆固醇的细胞摄取 | 第41-42页 |
| 1.2.7 siRNA介导的LXRα基因沉默 | 第42页 |
| 1.2.8 Trizol法提取细胞总RNA | 第42页 |
| 1.2.9 Real-timeRT-PCR检测 | 第42-43页 |
| 1.2.10 蛋白免疫印迹 | 第43-45页 |
| 1.3 统计分析 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-55页 |
| 2.1 柿单宁对HepG2以及Caco-2细胞增殖活力的影响 | 第45页 |
| 2.2 柿单宁抑制胆固醇在HepG2以及Caco-2细胞内的积累 | 第45-49页 |
| 2.3 柿单宁调控胆固醇代谢相关基因及蛋白的表达 | 第49-53页 |
| 2.4 沉默LXRα并不影响柿单宁对CYP7A1/ABCA1的上调作用 | 第53-55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 4 小结 | 第57-58页 |
| 第三章 柿单宁对细胞膜结构以及胞膜受体蛋白的调控作用研究 | 第58-79页 |
| 1 材料与方法 | 第59-63页 |
| 1.1 实验材料和仪器设备 | 第59-61页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第59页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第59-60页 |
| 1.1.3 仪器设备 | 第60页 |
| 1.1.4 主要溶液的配制 | 第60-61页 |
| 1.2 实验方法 | 第61-63页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第61页 |
| 1.2.2 细胞TC测定 | 第61页 |
| 1.2.3 细胞膜流动性测定 | 第61-62页 |
| 1.2.4 CTB-FITC染色脂质筏 | 第62-63页 |
| 1.2.5 FilipinIII染色细胞胆固醇 | 第63页 |
| 1.2.6 Real-time RT-PCR检测 | 第63页 |
| 1.2.7 蛋白免疫印迹 | 第63页 |
| 1.3 统计分析 | 第63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-75页 |
| 2.1 柿单宁对Caco-2细胞膜流动性及细胞结构的影响 | 第63-70页 |
| 2.2 柿单宁在不同胆固醇水平下对细胞膜流动性的影响 | 第70-73页 |
| 2.3 柿单宁对EGFR、ERK1/2以及PPARγ在基因和蛋白表达水平上的影响 | 第73-75页 |
| 3 讨论 | 第75-77页 |
| 4 小结 | 第77-79页 |
| 第四章 柿单宁基于ERK1/2-PPARγ信号通路调控巨噬细胞-RCT以及TICE途径的分子机制 | 第79-114页 |
| 1 材料与方法 | 第79-87页 |
| 1.1 实验材料和仪器设备 | 第79-82页 |
| 1.1.2 实验材料 | 第79页 |
| 1.1.2 实验动物及饲料 | 第79-80页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第80页 |
| 1.1.4 主要仪器设备 | 第80-81页 |
| 1.1.5 主要溶液的配制 | 第81-82页 |
| 1.2 实验方法 | 第82-86页 |
| 1.2.1 J774A.1细胞培养 | 第82页 |
| 1.2.2 柿单宁对J774A.1细胞增殖的影响 | 第82页 |
| 1.2.3 荷脂J774A.1细胞的诱导培养 | 第82页 |
| 1.2.4 油红O染色 | 第82页 |
| 1.2.5 荷脂巨噬细胞中22-NBD-胆固醇流出测定 | 第82-83页 |
| 1.2.6 RCT实验组 | 第83-84页 |
| 1.2.7 TICE实验组 | 第84-85页 |
| 1.2.8 细胞内总RNA的提取 | 第85-86页 |
| 1.2.9 蛋白免疫印迹 | 第86页 |
| 1.3 统计分析 | 第86-87页 |
| 2 结果与分析 | 第87-109页 |
| 2.1 柿单宁对J774A.1细胞增殖活力的影响 | 第87-88页 |
| 2.2 柿单宁对J774A.1细胞内脂质积累的影响 | 第88-90页 |
| 2.3 柿单宁对荷脂J774A.1细胞中22-NBD-胆固醇流出的影响 | 第90-92页 |
| 2.4 柿单宁对J774A.1细胞PPARγ以及ERK1/2蛋白表达的影响 | 第92-95页 |
| 2.5 柿单宁对高胆固醇膳食诱导小鼠体重以及食物摄取的影响 | 第95-96页 |
| 2.6 柿单宁对C57BL/6J小鼠肝组织以及胸主动脉形态的影响 | 第96-99页 |
| 2.7 柿单宁对C57BL/6J小鼠血脂、肝脂以及粪脂的影响 | 第99页 |
| 2.8 柿单宁对C57BL/6J小鼠体内RCT的影响 | 第99-101页 |
| 2.9 柿单宁对C57BL/6J小鼠RCT途径相关基因及蛋白表达的影响 | 第101-104页 |
| 2.10 柿单宁对C57BL/6J小鼠TICE途径的影响 | 第104-109页 |
| 3 讨论 | 第109-113页 |
| 4 小结 | 第113-114页 |
| 第五章 柿单宁特征结构单元在Caco-2细胞单层模型中对胆固醇转运吸收的影响 | 第114-137页 |
| 1 材料与方法 | 第115-121页 |
| 1.1 实验材料和仪器设备 | 第115-116页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第115页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第115页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第115-116页 |
| 1.1.4 主要溶液的配制 | 第116页 |
| 1.2 实验方法 | 第116-118页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第116页 |
| 1.2.2 Caco-2细胞单层模型的建立 | 第116-117页 |
| 1.2.3 Caco-2细胞单层模型的评价 | 第117-118页 |
| 1.3 柿单宁特征结构单元及其结构单体等对Caco-2细胞的增殖影响 | 第118-119页 |
| 1.4 柿单宁特征结构单元及其结构单体等的稳定性试验 | 第119页 |
| 1.5 柿单宁特征结构单元及其结构单体等对22-NBD-胆固醇摄取和转运的影响 | 第119页 |
| 1.6 柿单宁特征结构单元及其结构单体等的胞内摄取实验 | 第119-120页 |
| 1.7 双向跨膜转运实验 | 第120页 |
| 1.8 Trizol法提取细胞总RNA | 第120页 |
| 1.9 Real-time RT-PCR检测 | 第120-121页 |
| 1.10 HPLC分析 | 第121页 |
| 1.11 统计与分析 | 第121页 |
| 2 结果与分析 | 第121-135页 |
| 2.1 Caco-2单层细胞模型的建立与评价 | 第121-124页 |
| 2.1.1 单层细胞模型的跨膜电阻 | 第121-122页 |
| 2.1.2 Lucifer Yellow CH转运实验 | 第122页 |
| 2.1.3 Caco-2细胞单层的形态学 | 第122-123页 |
| 2.1.4 碱性磷酸酶的检测 | 第123-124页 |
| 2.2 柿单宁特征结构单元及其结构单体等的稳定性试验 | 第124-126页 |
| 2.3 柿单宁特征结构单元及其结构单体等对Caco-2细胞增殖活力的影响 | 第126页 |
| 2.4 柿单宁特征结构单元及其结构单体等对22-NBD-胆固醇摄取转运的影响 | 第126-130页 |
| 2.5 柿单宁特征结构单元等的转运机制与其对胆固醇转运影响之间的相关性 | 第130-135页 |
| 3 讨论 | 第135-136页 |
| 4 小结 | 第136-137页 |
| 第六章 结论与展望 | 第137-139页 |
| 参考文献 | 第139-163页 |
| 附录 | 第163-164页 |
| 在读期间发表论文 | 第164-166页 |
| 致谢 | 第166-167页 |
