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氧化应激调控晶状体上皮细胞凋亡机制的研究

摘要第4-8页
Abstract第8-11页
英文缩略语第12-17页
第一部分 :氧化应激对人晶状体上皮细胞中SUMO表达的影响第17-36页
    1 前言第17-18页
    2 材料和方法第18-26页
        2.1 实验材料第18-19页
            2.1.1 研究对象第18页
            2.1.2 实验试剂第18页
            2.1.3 抗体第18页
            2.1.4 实验设备第18-19页
        2.2 实验方法第19-26页
            2.2.1 细胞培养第19页
            2.2.2 细胞氧化应激处理第19页
            2.2.3 检测细胞内源性活性氧(ROS)水平第19-20页
            2.2.4 细胞增殖活力的测定第20页
            2.2.5 Westernblot检测第20-22页
            2.2.6 RT-PCR检测第22-24页
            2.2.7 实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)第24页
            2.2.8 免疫细胞化学染色第24-25页
            2.2.9 统计学分析第25-26页
    3 结果第26-32页
        3.1 氧化应激对人晶状体上皮细胞形态的影响第26页
        3.2 不同程度氧化应激对人晶状体上皮细胞内源性ROS水平的影响第26-27页
        3.3 不同程度氧化应激对人晶状体上皮细胞活性的影响第27-28页
        3.4 不同程度氧化应激对人晶状体上皮细胞PCNA表达水平的影响第28-29页
        3.5 氧化应激对人晶状体上皮细胞中SUMO1表达及SUMO化的影响第29-32页
    4 讨论第32-35页
    5 结论第35-36页
第二部分 :氧化应激条件下人晶状体上皮细胞中PSIP1的SUMO修饰的变化第36-57页
    6 前言第36-37页
    7 材料与方法第37-45页
        7.1 实验材料第37-38页
            7.1.1 研究对象第37页
            7.1.2 实验试剂第37页
            7.1.3 抗体及载体第37页
            7.1.4 实验设备第37-38页
        7.2 实验方法第38-45页
            7.2.1 实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)第38-39页
            7.2.2 细胞转染第39页
            7.2.3 免疫沉淀第39-40页
            7.2.4 pEGFP-PSIP1真核表达载体构建第40-41页
            7.2.5 Westernblot检测第41-43页
            7.2.6 免疫细胞化学染色第43-44页
            7.2.7 统计学分析第44-45页
    8 结果第45-52页
        8.1 氧化应激对人晶状体上皮细胞中PSIP1表达水平的影响第45-46页
        8.2 生理状态下人晶状体上皮细胞中PSIP1可被SUMO修饰第46-48页
        8.3 PSIP1基因的合成及其载体的鉴定第48-49页
        8.4 pEGFP-PSIP1表达载体的表达鉴定第49-50页
        8.5 氧化应激条件下人晶状体上皮细胞中PSIP1的SUMO1修饰的变化第50-52页
    9 讨论第52-56页
    10 结论第56-57页
第三部分 :PSIP1的SUMO化/去SUMO化对人晶状体上皮细胞增殖活性和抗氧化应激能力的影响第57-80页
    11 前言第57-59页
    12 材料与方法第59-66页
        12.1 实验材料第59-60页
            12.1.1 研究对象第59页
            12.1.2 实验试剂第59页
            12.1.3 抗体及载体第59页
            12.1.4 实验设备第59-60页
        12.2 实验方法第60-66页
            12.2.1 pEGFP-K364R真核表达载体构建第60页
            12.2.2 细胞转染第60-61页
            12.2.3 免疫共沉淀第61-62页
            12.2.4 双荧光素酶报告基因检测第62-63页
            12.2.5 细胞增值活力的测定第63页
            12.2.6 Westernblot检测第63-65页
            12.2.7 统计学分析第65-66页
    13 结果第66-77页
        13.1 SUMO修饰位点突变的PSIP1真核表达载体的构建及检测第66-67页
        13.2 pEGFP-K364R表达载体的表达鉴定第67-68页
        13.3 PSIP1的SUMO修饰位点的检测第68-69页
        13.4 人晶状体上皮细胞中SUMO化/去SUMO化对PSIP1的转录活性的影响第69-71页
        13.5 人晶状体上皮细胞中SUMO化/去SUMO化对PSIP1的下游分子的影响第71-73页
        13.6 PSIP1的SUMO化/去SUMO化对人晶状体上皮细胞增殖活性的影响第73-74页
        13.7 PSIP1的SUMO化/去SUMO化对人晶状体上皮细胞对抗氧化应激能力的影响第74-77页
    14 讨论第77-79页
    15 结论第79-80页
本研究创新性的自我评价第80-81页
参考文献第81-87页
综述第87-101页
    参考文献第93-101页
在学期间科研成绩第101-102页
致谢第102-103页
个人简介第103页

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