摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
英文缩略语 | 第12-17页 |
第一部分 :氧化应激对人晶状体上皮细胞中SUMO表达的影响 | 第17-36页 |
1 前言 | 第17-18页 |
2 材料和方法 | 第18-26页 |
2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 研究对象 | 第18页 |
2.1.2 实验试剂 | 第18页 |
2.1.3 抗体 | 第18页 |
2.1.4 实验设备 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-26页 |
2.2.1 细胞培养 | 第19页 |
2.2.2 细胞氧化应激处理 | 第19页 |
2.2.3 检测细胞内源性活性氧(ROS)水平 | 第19-20页 |
2.2.4 细胞增殖活力的测定 | 第20页 |
2.2.5 Westernblot检测 | 第20-22页 |
2.2.6 RT-PCR检测 | 第22-24页 |
2.2.7 实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR) | 第24页 |
2.2.8 免疫细胞化学染色 | 第24-25页 |
2.2.9 统计学分析 | 第25-26页 |
3 结果 | 第26-32页 |
3.1 氧化应激对人晶状体上皮细胞形态的影响 | 第26页 |
3.2 不同程度氧化应激对人晶状体上皮细胞内源性ROS水平的影响 | 第26-27页 |
3.3 不同程度氧化应激对人晶状体上皮细胞活性的影响 | 第27-28页 |
3.4 不同程度氧化应激对人晶状体上皮细胞PCNA表达水平的影响 | 第28-29页 |
3.5 氧化应激对人晶状体上皮细胞中SUMO1表达及SUMO化的影响 | 第29-32页 |
4 讨论 | 第32-35页 |
5 结论 | 第35-36页 |
第二部分 :氧化应激条件下人晶状体上皮细胞中PSIP1的SUMO修饰的变化 | 第36-57页 |
6 前言 | 第36-37页 |
7 材料与方法 | 第37-45页 |
7.1 实验材料 | 第37-38页 |
7.1.1 研究对象 | 第37页 |
7.1.2 实验试剂 | 第37页 |
7.1.3 抗体及载体 | 第37页 |
7.1.4 实验设备 | 第37-38页 |
7.2 实验方法 | 第38-45页 |
7.2.1 实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR) | 第38-39页 |
7.2.2 细胞转染 | 第39页 |
7.2.3 免疫沉淀 | 第39-40页 |
7.2.4 pEGFP-PSIP1真核表达载体构建 | 第40-41页 |
7.2.5 Westernblot检测 | 第41-43页 |
7.2.6 免疫细胞化学染色 | 第43-44页 |
7.2.7 统计学分析 | 第44-45页 |
8 结果 | 第45-52页 |
8.1 氧化应激对人晶状体上皮细胞中PSIP1表达水平的影响 | 第45-46页 |
8.2 生理状态下人晶状体上皮细胞中PSIP1可被SUMO修饰 | 第46-48页 |
8.3 PSIP1基因的合成及其载体的鉴定 | 第48-49页 |
8.4 pEGFP-PSIP1表达载体的表达鉴定 | 第49-50页 |
8.5 氧化应激条件下人晶状体上皮细胞中PSIP1的SUMO1修饰的变化 | 第50-52页 |
9 讨论 | 第52-56页 |
10 结论 | 第56-57页 |
第三部分 :PSIP1的SUMO化/去SUMO化对人晶状体上皮细胞增殖活性和抗氧化应激能力的影响 | 第57-80页 |
11 前言 | 第57-59页 |
12 材料与方法 | 第59-66页 |
12.1 实验材料 | 第59-60页 |
12.1.1 研究对象 | 第59页 |
12.1.2 实验试剂 | 第59页 |
12.1.3 抗体及载体 | 第59页 |
12.1.4 实验设备 | 第59-60页 |
12.2 实验方法 | 第60-66页 |
12.2.1 pEGFP-K364R真核表达载体构建 | 第60页 |
12.2.2 细胞转染 | 第60-61页 |
12.2.3 免疫共沉淀 | 第61-62页 |
12.2.4 双荧光素酶报告基因检测 | 第62-63页 |
12.2.5 细胞增值活力的测定 | 第63页 |
12.2.6 Westernblot检测 | 第63-65页 |
12.2.7 统计学分析 | 第65-66页 |
13 结果 | 第66-77页 |
13.1 SUMO修饰位点突变的PSIP1真核表达载体的构建及检测 | 第66-67页 |
13.2 pEGFP-K364R表达载体的表达鉴定 | 第67-68页 |
13.3 PSIP1的SUMO修饰位点的检测 | 第68-69页 |
13.4 人晶状体上皮细胞中SUMO化/去SUMO化对PSIP1的转录活性的影响 | 第69-71页 |
13.5 人晶状体上皮细胞中SUMO化/去SUMO化对PSIP1的下游分子的影响 | 第71-73页 |
13.6 PSIP1的SUMO化/去SUMO化对人晶状体上皮细胞增殖活性的影响 | 第73-74页 |
13.7 PSIP1的SUMO化/去SUMO化对人晶状体上皮细胞对抗氧化应激能力的影响 | 第74-77页 |
14 讨论 | 第77-79页 |
15 结论 | 第79-80页 |
本研究创新性的自我评价 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-87页 |
综述 | 第87-101页 |
参考文献 | 第93-101页 |
在学期间科研成绩 | 第101-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
个人简介 | 第103页 |