| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1 绪论 | 第8-13页 |
| 1.1 引言 | 第8页 |
| 1.2 DNA甲基化 | 第8-9页 |
| 1.3 组蛋白乙酰化和去乙酰化 | 第9-12页 |
| 1.3.1 组蛋白乙酰基转移酶(HAT) | 第10页 |
| 1.3.2 组蛋白去乙酰基转移酶(HDAC) | 第10-12页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第12-13页 |
| 2 毛果杨PtHDT902基因生物信息学分析及亚细胞定位 | 第13-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-14页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第13页 |
| 2.1.2 菌种与载体 | 第13页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第13页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第13页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第13-14页 |
| 2.2 实验方法 | 第14-20页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第14页 |
| 2.2.2 毛果杨总RNA提取 | 第14页 |
| 2.2.3 cDNA的合成 | 第14-15页 |
| 2.2.4 GFP-PtHD7902融合蛋白表达载体的构建 | 第15-19页 |
| 2.2.5 PtHDT902基因的亚细胞定位 | 第19-20页 |
| 2.3 结果与分析 | 第20-25页 |
| 2.3.1 结构域分析 | 第20页 |
| 2.3.2 同源序列比对分析 | 第20-21页 |
| 2.3.3 系统进化树 | 第21-22页 |
| 2.3.4 PtHDT902启动子区分析 | 第22-23页 |
| 2.3.5 GFP-PtHDT902融合蛋白表达载体的构建 | 第23-25页 |
| 2.3.6 PtHDT902基因的亚细胞定位 | 第25页 |
| 2.4 本章小结 | 第25-26页 |
| 3 毛果杨PtHDT902基因表达分析 | 第26-30页 |
| 3.1 实验材料 | 第26页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-27页 |
| 3.2.1 低温处理毛果杨幼苗 | 第26页 |
| 3.2.2 盐处理毛果杨幼苗 | 第26页 |
| 3.2.3 杨树RNA提取和cDNA合成 | 第26页 |
| 3.2.4 PtHDT902基因在毛果杨中的组织特异性表达 | 第26-27页 |
| 3.2.5 毛果杨PtHDT902基因在低温胁迫下的表达 | 第27页 |
| 3.2.6 毛果杨PtHDT902基因在盐胁迫下的表达 | 第27页 |
| 3.3 结果与分析 | 第27-29页 |
| 3.3.1 PtHDT902基因在毛果杨中的组织特异性表达 | 第27页 |
| 3.3.2 毛果杨PtHD7902基因在低温胁迫下的表达 | 第27-28页 |
| 3.3.3 毛果杨PtHDT902基因在盐胁迫下的表达 | 第28-29页 |
| 3.4 本章小结 | 第29-30页 |
| 4 毛果杨PtHDT902基因转化拟南芥研究 | 第30-42页 |
| 4.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 4.1.2 菌种与载体 | 第30页 |
| 4.1.3 主要试剂及溶液 | 第30-31页 |
| 4.1.4 培养基 | 第31页 |
| 4.2 实验方法 | 第31-37页 |
| 4.2.1 毛果杨总RNA提取和cDNA的合成 | 第31页 |
| 4.2.2 PtHDT902基因克隆 | 第31-34页 |
| 4.2.3 拟南芥的播种与培养 | 第34页 |
| 4.2.4 拟南芥的转化 | 第34-35页 |
| 4.2.5 转PtHDT902基因拟南芥的抗性筛选 | 第35页 |
| 4.2.6 转PtHD7902基因拟南芥的分子检测 | 第35-36页 |
| 4.2.7 转PtHDT902基因拟南芥中GA合成酶基因的表达分析 | 第36-37页 |
| 4.2.8 GA抑制剂对PtHDT902转基因拟南芥生长的影响 | 第37页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第37-41页 |
| 4.3.1 毛果杨PtHDT902基因克隆 | 第37-38页 |
| 4.3.2 植物表达载体的构建 | 第38-39页 |
| 4.3.3 PtHDT902转基因拟南芥的PCR鉴定 | 第39页 |
| 4.3.4 转PtHDT902基因阳性植株的RT-PCR鉴定 | 第39-40页 |
| 4.3.5 PtHDT902转基因拟南芥生长的情况 | 第40页 |
| 4.3.6 GA合成酶基因在转基因拟南芥中的表达 | 第40-41页 |
| 4.4 本章小结 | 第41-42页 |
| 5 PtHDT902基因转化84K杨研究 | 第42-49页 |
| 5.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第42页 |
| 5.1.2 植物表达载体 | 第42页 |
| 5.1.3 试剂及溶液 | 第42-43页 |
| 5.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 5.2.1 84K杨培养 | 第43页 |
| 5.2.2 84K杨遗传转化 | 第43页 |
| 5.2.3 PtHDT902转基因84K杨的抗性筛选 | 第43页 |
| 5.2.4 转基因84K杨的分子检测 | 第43-44页 |
| 5.2.5 HDAC酶活测定 | 第44-45页 |
| 5.2.6 转基因84K杨愈伤组织诱导 | 第45页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第45-48页 |
| 5.3.1 PtHD7902转基因阳性84K杨的PCR鉴定 | 第45-46页 |
| 5.3.2 PtHDT902转基因阳性84K杨的RT-PCR鉴定 | 第46-47页 |
| 5.3.3 转基因84K杨HDAC酶活测定 | 第47页 |
| 5.3.4 转基因84K杨愈伤组织的诱导 | 第47-48页 |
| 5.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 附录 | 第53-55页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
