Myosin X参与NLT细胞迁移和极性的确立
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 引言 | 第8-12页 |
| ·细胞迁移简介 | 第8页 |
| ·影响细胞迁移的因素 | 第8-9页 |
| ·钙黏附蛋白参与细胞迁移 | 第9页 |
| ·Myo Ⅹ的作用概述 | 第9-10页 |
| ·本研究的理论依据 | 第10页 |
| ·本研究的意义及目的 | 第10-12页 |
| 2 材料和方法 | 第12-19页 |
| ·细胞系 | 第12页 |
| ·主要试剂 | 第12页 |
| ·Myo Ⅹ基因沉默载体的构建 | 第12-15页 |
| ·设计并合成单链oligo | 第12页 |
| ·退火，形成双链的DNA oligo | 第12页 |
| ·琼脂糖电泳鉴定退火产物 | 第12-13页 |
| ·连接反应 | 第13页 |
| ·转化大肠杆菌Top10 | 第13页 |
| ·重组阳性克隆的筛选 | 第13-14页 |
| ·沉默载体的鉴定 | 第14页 |
| ·质粒大量提取 | 第14-15页 |
| ·NLT细胞转染 | 第15页 |
| ·免疫荧光染色 | 第15-16页 |
| ·Western blot分析 | 第16页 |
| ·细胞定向迁移分析 | 第16页 |
| ·细胞极性分析 | 第16-17页 |
| ·细胞团凝胶迁移分析 | 第17-19页 |
| ·细胞团的制备 | 第17页 |
| ·细胞团包埋与细胞凝胶内迁移 | 第17-19页 |
| 3 结果与分析 | 第19-26页 |
| ·Myo ⅩmiRNA的制备 | 第19-20页 |
| ·单链DNA oligo进行退火，形成双链 | 第19页 |
| ·Myo X miRNA的PCR鉴定 | 第19-20页 |
| ·Myo ⅩmiRNA影响细胞迁移能力 | 第20-21页 |
| ·Myo ⅩmiRNA改变细胞迁移方向 | 第21-22页 |
| ·敲弱Myo Ⅹ表达使细胞丧失极性 | 第22页 |
| ·表达Myo Ⅹ降低N-Cadherin表达 | 第22-26页 |
| 4 讨论 | 第26-28页 |
| 5 结论 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-32页 |
| 致谢 | 第32页 |
