| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第14-41页 |
| 第一章 小鼠附植前胚胎发育及蛋白质酪氨酸磷酸酶-1 的研究进展 | 第14-26页 |
| 1.1 小鼠附植前胚胎发育的主要特征 | 第14-15页 |
| 1.2 小鼠附植前胚胎中细胞命运的决定 | 第15-18页 |
| 1.2.1 滋养外胚层和内细胞团的形成 | 第16页 |
| 1.2.2 决定内细胞团命运的转录因子 | 第16-17页 |
| 1.2.3 决定滋养外胚层命运的转录因子 | 第17-18页 |
| 1.3 调节内细胞团／滋养外胚层细胞命运的信号通路 | 第18-19页 |
| 1.3.1 Ras-MAPK 信号通路 | 第18页 |
| 1.3.2 Hippo 信号通路 | 第18-19页 |
| 1.4 蛋白质酪氨酸磷酸酶-1 的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.5 蛋白磷酸酶的分类 | 第20-22页 |
| 1.6 蛋白质酪氨酸磷酸酶-1 的结构 | 第22页 |
| 1.7 蛋白质酪氨酸磷酸酶-1 的活性调节机制 | 第22-23页 |
| 1.8 蛋白质酪氨酸磷酸酶-1 的功能 | 第23-26页 |
| 1.8.1 SHP-1 在淋巴细胞中的生物学功能 | 第23-24页 |
| 1.8.2 SHP-1 在白血病/淋巴瘤中的生物学功能 | 第24页 |
| 1.8.3 SHP-1 在调节细胞凋亡过程中的生物学功能 | 第24-25页 |
| 1.8.4 SHP-1 在调节细胞周期中的生物学功能 | 第25-26页 |
| 第二章 Nanog 基因及 STAT 家族的研究进展 | 第26-41页 |
| 2.1 Nanog 基因的发现 | 第26-27页 |
| 2.2 Nanog 基因的结构 | 第27-28页 |
| 2.3 Nanog 的表达特征 | 第28-29页 |
| 2.4 Nanog 基因的功能 | 第29-34页 |
| 2.4.1 Nanog 在 ES 细胞自我更新和多能性的维持中的生物学功能 | 第30-31页 |
| 2.4.2 Nanog 在抑制分化过程中的生物学功能 | 第31页 |
| 2.4.3 Nanog 在肿瘤发生过程中的生物学功能 | 第31页 |
| 2.4.4 Nanog 与 Oct4 和 Sox2 间的相互作用 | 第31-33页 |
| 2.4.5 Nanog 与 p53 和 FoxD3 间的相互作用 | 第33页 |
| 2.4.6 Nanog 在 LIF /STAT3 信号通路中的生物学功能 | 第33页 |
| 2.4.7 Nanog 与细胞周期调控蛋白间的相互作用 | 第33-34页 |
| 2.4.8 Nanog 在重编程过程中的生物学功能 | 第34页 |
| 2.5 STAT 家族研究进展 | 第34页 |
| 2.6 STAT 家族的发现 | 第34-35页 |
| 2.7 STAT 家族的结构 | 第35页 |
| 2.8 STAT 家族的成员 | 第35-37页 |
| 2.9 STAT3 的作用机制 | 第37-38页 |
| 2.10 STAT3 的结构及功能 | 第38-41页 |
| 实验研究 | 第41-85页 |
| 第三章 SHP-1 基因和 Nanog 基因在小鼠附植前胚胎中的表达及影响 | 第41-57页 |
| 3.1 材料和方法 | 第41-49页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第41-42页 |
| 3.1.2 材料与试剂 | 第42页 |
| 3.1.3 附植前胚胎的收集与培养 | 第42页 |
| 3.1.4 胚胎 RNA 的提取以及 cDNA 的合成 | 第42-43页 |
| 3.1.5 实时定量 RT-PCR | 第43-44页 |
| 3.1.6 数据处理及分析 | 第44页 |
| 3.1.7 免疫荧光 | 第44-45页 |
| 3.1.8 SHP-1 真核表达载体的构建 | 第45-49页 |
| 3.1.9 胚胎的电转染 | 第49页 |
| 3.2 结果 | 第49-54页 |
| 3.2.1 SHP-1 和 Nanog 在小鼠附植前胚胎中的表达 | 第49-50页 |
| 3.2.2 SHP-1 和 Nanog 在小鼠附植前胚胎中的亚细胞定位 | 第50-51页 |
| 3.2.3 SHP-1 表达载体鉴定 | 第51-52页 |
| 3.2.4 8-cell 期胚胎过表达 SHP-1 导致早期胚胎发育阻滞且 Nanog 表达量下降 | 第52-53页 |
| 3.2.5 8-cell 期胚胎干扰 Nanog 导致 Nanog 表达量下降及早期胚胎发育阻滞 | 第53-54页 |
| 3.3 讨论 | 第54-56页 |
| 3.4 小结 | 第56-57页 |
| 第四章 F9 细胞系中 SHP-1 与 Nanog 间的功能研究 | 第57-65页 |
| 4.1 材料和方法 | 第57-61页 |
| 4.1.1 小鼠 F9 畸胎瘤细胞的培养 | 第57-58页 |
| 4.1.2 材料与试剂 | 第58页 |
| 4.1.3 细胞转染 | 第58-59页 |
| 4.1.4 实时定量 RT-PCR | 第59页 |
| 4.1.5 数据处理及分析 | 第59页 |
| 4.1.6 启动子活性检测 | 第59-60页 |
| 4.1.7 蛋白免疫印迹 | 第60-61页 |
| 4.2 结果 | 第61-63页 |
| 4.2.1 F9 细胞中 SHP-1 siRNA 的干扰效率检测 | 第61页 |
| 4.2.2 F9 细胞中 SHP-1 对 Nanog 启动子活性的影响 | 第61-62页 |
| 4.2.3 F9 细胞中 SHP-1 对 Nanog mRNA 表达量的影响 | 第62页 |
| 4.2.4 F9 细胞中 SHP-1 对 Nanog 蛋白水平上的影响 | 第62-63页 |
| 4.3 讨论 | 第63页 |
| 4.4 小结 | 第63-65页 |
| 第五章 F9 细胞系中 SHP-1 与 STAT3 间的功能研究 | 第65-70页 |
| 5.1 材料和方法 | 第65-66页 |
| 5.1.1 小鼠 F9 畸胎瘤细胞培养 | 第65页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第65页 |
| 5.1.3 磷酸化蛋白免疫印迹 | 第65-66页 |
| 5.1.4 免疫共沉淀 | 第66页 |
| 5.2 结果 | 第66-68页 |
| 5.2.1 F9 细胞中 STAT3 是 SHP-1 的底物 | 第66-67页 |
| 5.2.2 F9 细胞中 SHP-1 可以调节 pSTAT3 水平 | 第67-68页 |
| 5.3 讨论 | 第68-69页 |
| 5.4 小结 | 第69-70页 |
| 第六章 F9 细胞系中 STAT3 与 Nanog 间的功能研究 | 第70-76页 |
| 6.1 材料和方法 | 第70-71页 |
| 6.1.1 小鼠 F9 畸胎瘤细胞培养 | 第70页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第70-71页 |
| 6.1.3 细胞转染 | 第71页 |
| 6.1.4 启动子活性检测 | 第71页 |
| 6.1.5 蛋白免疫印迹 | 第71页 |
| 6.1.6 实时定量 RT-PCR | 第71页 |
| 6.1.7 数据处理及分析 | 第71页 |
| 6.2 结果 | 第71-74页 |
| 6.2.1 F9 细胞中 pCMV-MYC-STAT3 和 STAT3 siRNA 的效率检测 | 第71-72页 |
| 6.2.2 F9 细胞中过表达 STAT3 对 Nanog 启动子活性的影响 | 第72-73页 |
| 6.2.3 F9 细胞中 STAT3 对 Nanog mRNA 表达量的影响 | 第73-74页 |
| 6.2.4 F9 细胞中 STAT3 对 Nanog 蛋白表达水平的影响 | 第74页 |
| 6.3 讨论 | 第74-75页 |
| 6.4 小结 | 第75-76页 |
| 第七章 F9 细胞系中 SHP-1 通过介导 STAT3 磷酸化从而调控 Nanog 的表达 | 第76-85页 |
| 7.1 材料和方法 | 第76-77页 |
| 7.1.1 小鼠 F9 畸胎瘤细胞培养 | 第76页 |
| 7.1.2 主要试剂 | 第76-77页 |
| 7.1.3 细胞转染 | 第77页 |
| 7.1.4 启动子活性检测 | 第77页 |
| 7.1.5 蛋白免疫印迹 | 第77页 |
| 7.1.6 实时定量 RT-PCR | 第77页 |
| 7.1.7 数据处理及分析 | 第77页 |
| 7.2 结果 | 第77-83页 |
| 7.2.1 F9 细胞中过表达 STAT3(Y705D)时 SHP-1 对 Nanog 的影响 | 第77-79页 |
| 7.2.2 F9 细胞中过表达 STAT3(Y705F)时 SHP-1 对 Nanog 的影响 | 第79-81页 |
| 7.2.3 F9 细胞中干扰 STAT3 时 SHP-1 对 Nanog 的影响 | 第81-83页 |
| 7.3 讨论 | 第83-84页 |
| 7.4 小结 | 第84-85页 |
| 结论 | 第85-86页 |
| 论文创新点 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-106页 |
| 附录 | 第106-108页 |
| 仪器设备 | 第106-108页 |
| 缩略词 | 第108-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 个人简介 | 第111页 |
