| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 鱼类与其它动物受精生物学 | 第10-11页 |
| 1.2 透明带 (zona pellucida) ZP 基因研究概况 | 第11-18页 |
| 1.2.1 透明带的组成与结构特征 | 第11-17页 |
| 1.2.2 ZP 基因功能研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3 本研究的内容、目的及意义 | 第18-20页 |
| 第二章 萍乡红鲫卵母细胞中蛋白、糖类和脂肪的组化分析 | 第20-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-24页 |
| 2.2.1 蛋白质的显色方法（DNFB 法） | 第20-21页 |
| 2.2.2 糖原显色方法(PAS 反应) | 第21-22页 |
| 2.2.3 脂类显色方法（溴-苏丹黑法） | 第22-24页 |
| 2.3 实验结果 | 第24-26页 |
| 2.3.1 不同时相的卵母细胞 DNFB 染色 | 第24页 |
| 2.3.2 不同时相的卵母细胞中 PAS 染色 | 第24-25页 |
| 2.3.3 卵母细胞中溴-苏丹黑染色脂类 | 第25-26页 |
| 2.4 讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 萍乡红鲫 ZP 基因克隆及其基因组结构分析 | 第27-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-37页 |
| 3.2.1 萍乡红鲫卵壳蛋白的分离和纯化 | 第28页 |
| 3.2.2 RACE-PCR 引物设计 | 第28-30页 |
| 3.2.3 萍乡红鲫卵巢组织总 RNA 提取 | 第30页 |
| 3.2.4 RNA 反转录成 cDNA | 第30-31页 |
| 3.2.5 萍乡红鲫 ZP2 基因 cDNA 全长克隆 | 第31-32页 |
| 3.2.6 萍乡红鲫四个基因组 DNA 文库的构建 | 第32-34页 |
| 3.2.7 GenomeWalker 法步移 ZP 基因组及其启动子序列 | 第34-35页 |
| 3.2.8 回收目的片段，与载体连接，感受态细胞制备以及转化测序 | 第35-37页 |
| 3.3 实验结果 | 第37-54页 |
| 3.3.1 萍乡红鲫卵壳蛋白的分离纯化 | 第37-38页 |
| 3.3.2 萍乡红鲫 ZP2 基因全长克隆和序列分析 | 第38-44页 |
| 3.3.3 萍乡红鲫 ZP3 基因 cDNA 以及 domain 结构域分析 | 第44-47页 |
| 3.3.4 萍乡红鲫四个基因组 DNA 文库的构建 | 第47-48页 |
| 3.3.5 步移 ZP2 基因启动子序列以及 ZP3.2 基因组序列 | 第48-49页 |
| 3.3.6 步移 ZP2 基因组序列以及 ZP3.1 基因组序列 | 第49-50页 |
| 3.3.7 萍乡红鲫 ZP3.1，ZP2 和 ZP3.2 基因组序列拼接和图示 | 第50-51页 |
| 3.3.8 分析 ZP2 和 ZP3.2 启动子序列 | 第51-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-57页 |
| 3.4.1 萍乡红鲫卵壳蛋白组分分析 | 第54页 |
| 3.4.2 萍乡红鲫 ZP2 和 ZP3 基因序列分析 | 第54-55页 |
| 3.4.3 萍乡红鲫基因组结构以及启动子序列分析 | 第55-57页 |
| 第四章 萍乡红鲫 ZP 基因表达模式及其启动子活性分析 | 第57-79页 |
| 4.1 实验材料 | 第58页 |
| 4.2 实验方法 | 第58-63页 |
| 4.2.1 萍乡红鲫多个组织总 RNA 提取 | 第58页 |
| 4.2.2 RNA 反转录成 cDNA | 第58-59页 |
| 4.2.3 荧光定量 PCR 检测萍乡红鲫 ZP 基因的表达 | 第59页 |
| 4.2.4 ZP2 基因原位杂交分析 | 第59-60页 |
| 4.2.5 构建萍乡红鲫 ZP3 和 ZP2 基因启动子与 GFP 的表达载体 | 第60-62页 |
| 4.2.6. 瞬时转染质粒进入 COS-7 细胞 | 第62-63页 |
| 4.3 结果 | 第63-75页 |
| 4.3.1 萍乡红鲫 ZP2 基因多个组织的差异性表达 | 第63-66页 |
| 4.3.2 萍乡红鲫卵母细胞不同发育时期 ZP2 和 ZP3 基因的表达 | 第66-72页 |
| 4.3.3 萍乡红鲫 ZP2 和 ZP3 基因启动子活性分析 | 第72-75页 |
| 4.4 讨论 | 第75-79页 |
| 4.4.1 萍乡红鲫多个组织 ZP2 基因差异性表达 | 第75-76页 |
| 4.4.2 萍乡红鲫卵母细胞不同发育时期 ZP2 和 ZP3 基因的表达分析 | 第76-77页 |
| 4.4.3 萍乡红鲫 ZP 基因启动子 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第88页 |
