| 缩略语表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 文献回顾 | 第15-19页 |
| 正文 | 第19-64页 |
| 第一部分 高效全长抗体表达系统的筛选 | 第19-45页 |
| 1. 材料 | 第19-23页 |
| ·主要质粒和细胞 | 第19-20页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·引物设计和合成 | 第22-23页 |
| 2. 方法 | 第23-38页 |
| ·双荧光素酶载体Dual-Luc2 的构建 | 第23-29页 |
| ·双荧光素酶载体Dual-Luc3 的构建 | 第29-33页 |
| ·质粒的大量制备 | 第33-34页 |
| ·三类细胞株的培养 | 第34-35页 |
| ·双荧光素酶的检测 | 第35页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第35-38页 |
| 3. 结果 | 第38-42页 |
| ·两种SV40 PAS 的比较 | 第38页 |
| ·PCR 鉴定结果 | 第38-40页 |
| ·所构建质粒图谱 | 第40-41页 |
| ·双荧光素酶检测结果 | 第41-42页 |
| ·RT-PCR 检测结果 | 第42页 |
| 4. 讨论 | 第42-43页 |
| 5. 小结 | 第43-45页 |
| 第二部分 表达 EGFR 与 HER2 双特异性抗体融合蛋白的重组腺病毒 Ad5-AT2-Herin 的构建及其体外实验 | 第45-64页 |
| 1. 材料 | 第45-49页 |
| ·主要质粒、细胞和病毒 | 第45页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第45-46页 |
| ·主要试剂的配置 | 第46-47页 |
| ·主要仪器 | 第47-48页 |
| ·引物设计和合成 | 第48-49页 |
| 2. 方法 | 第49-58页 |
| ·腺病毒穿梭质粒的构建 | 第49-51页 |
| ·腺病毒Ad5-AT2-Herin 的重组及扩增 | 第51-54页 |
| ·重组腺病毒载体Ad5-AT2-Herin 在体外表达量测定 | 第54-58页 |
| ·间接免疫荧光实验(IFA) 检测AT2-HERIN 的结合特异性 | 第58页 |
| 3. 结果 | 第58-62页 |
| ·pDC339-AT2-Herin 载体图谱 | 第58-59页 |
| ·腺病毒Ad5-AT2-Herin 目的基因的PCR 鉴定结果 | 第59-60页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第60页 |
| ·ELISA 检测结果 | 第60页 |
| ·Western Blot 检测结果 | 第60-61页 |
| ·重组腺病毒表达抗体融合蛋白AT2-HERIN 的结合特异性 | 第61-62页 |
| 4. 讨论 | 第62-63页 |
| 5. 小结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 附录 | 第70-72页 |
| 附录 1 Ad5-AT2-Herin 构建及功能检测流程图 | 第70-71页 |
| 附录 2 HERIN 基因测序结果 | 第71-72页 |
| 个人简历和研究成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
