| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第12-16页 |
| 第二章 试剂、材料和仪器 | 第16-26页 |
| 2.1 主要试剂及材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 细胞培养试剂 | 第16页 |
| 2.1.2 细菌培养试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 RT-PCR所用主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.4 Western blot 主要试剂 | 第17页 |
| 2.1.5 其他主要试剂及材料 | 第17-18页 |
| 2.2 标本收集 | 第18页 |
| 2.3 细胞株 | 第18页 |
| 2.4 菌株 | 第18页 |
| 2.5 质粒 | 第18-19页 |
| 2.6 引物 | 第19-20页 |
| 2.7 试剂及主要溶液的配制 | 第20-24页 |
| 2.7.1 细胞培养试剂 | 第20页 |
| 2.7.2 细菌培养试剂 | 第20页 |
| 2.7.3 琼脂糖凝胶电泳试剂 | 第20-21页 |
| 2.7.4 Western blot所用试剂的配制 | 第21-23页 |
| 2.7.5 免疫组化所用试剂的配制 | 第23-24页 |
| 2.8 主要仪器 | 第24-26页 |
| 第三章 实验方法 | 第26-36页 |
| 3.1 细胞株的培养 | 第26页 |
| 3.2 载体的构建 | 第26页 |
| 3.3 质粒DNA的转化及提取 | 第26-27页 |
| 3.4 细胞转染实验 | 第27页 |
| 3.5 TCF 荧光素酶报告分析 | 第27页 |
| 3.6 细胞迁移实验 | 第27-28页 |
| 3.7 细胞侵袭实验 | 第28-29页 |
| 3.8 RT-PCR | 第29-30页 |
| 3.9 蛋白提取及浓度测定 | 第30-32页 |
| 3.10 SDS-PAGE具体步骤 | 第32-33页 |
| 3.11 细胞生长曲线的测定 | 第33页 |
| 3.12 细胞克隆形成分析 | 第33页 |
| 3.13 划痕实验 | 第33-34页 |
| 3.14 免疫荧光实验 | 第34页 |
| 3.15 免疫组化实验 | 第34-35页 |
| 3.16 统计学分析 | 第35-36页 |
| 第四章 实验结果 | 第36-52页 |
| 4.1 DKK1在肝癌细胞中是高表达的 | 第36-37页 |
| 4.2 DKK1对肝癌细胞的增殖和克隆形成没有影响 | 第37-39页 |
| 4.3 DKK1调控肝癌细胞的迁移和侵袭 | 第39-43页 |
| 4.4 DKK1促进β-catenin的表达 | 第43-45页 |
| 4.5 DKK1通过诱导β-catenin来促进肝癌细胞的迁移和侵袭 | 第45-49页 |
| 4.6 MMP7是DKK1/β-catenin信号通路下游的一个重要靶点 | 第49-52页 |
| 结论 | 第52-54页 |
| 讨论 | 第54-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 附录 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第66页 |
