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家蚕丝胶蛋白、羽毛角蛋白降解细菌的分离与角蛋白酶发酵培养基的优化

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
第一章 引言第13-22页
 1 制丝废水的处理第13-14页
 2 羽毛角蛋白的降解研究进展第14-21页
   ·羽毛角蛋白第14-15页
   ·羽毛角蛋白的降解第15-17页
   ·角蛋白酶活性的测定第17-18页
   ·角蛋白酶的发酵第18-19页
   ·角蛋白酶的分离、纯化第19-20页
   ·角蛋白酶的应用第20-21页
 3 本研究的目的意义第21-22页
第二章 家蚕丝胶蛋白与羽毛角蛋白降解细菌的筛选第22-50页
 1 材料与方法第22-28页
   ·材料第22-23页
     ·样品采集第22页
     ·培养基第22页
     ·主要软件第22页
     ·主要药品试剂第22-23页
     ·主要仪器第23页
   ·方法第23-28页
     ·细菌的分离第23页
     ·牛血清白蛋白标准曲线制作第23-24页
     ·各降解细菌分离株的降解活性测定第24页
     ·各降解细菌分离株的REP-PCR 基因指纹分析第24页
     ·羽毛角蛋白降解细菌的筛选第24页
     ·各降解细菌的菌落形态观察及生理生化指标测定第24-27页
       ·菌体及菌落形态观察第25页
       ·革兰氏反应第25页
       ·芽孢观察第25页
       ·运动性观察第25页
       ·淀粉水解试验第25页
       ·明胶液化试验第25-26页
       ·柠檬酸盐利用试验第26页
       ·接触酶试验第26页
       ·糖醇类发酵试验第26页
       ·硝酸盐还原试验第26-27页
       ·二乙酰测定(V-P 测定)第27页
       ·吲哚生成试验第27页
       ·酪氨酸水解试验第27页
       ·耐盐性试验第27页
     ·各降解细菌16S rRNA 片段的扩增和序列分析第27-28页
       ·基因组DNA 的提取第27-28页
       ·16S rRNA 片段的扩增第28页
       ·各降解细菌16S rRNA 序列测定及分析第28页
 2 结果与分析第28-49页
   ·家蚕丝胶蛋白降解细菌各分离株的降解活性第28-30页
   ·家蚕丝胶蛋白降解细菌各分离株的REP-PCR 基因指纹分析第30-32页
   ·羽毛角蛋白降解细菌的筛选第32页
   ·羽毛角蛋白降解细菌的鉴定结果第32-49页
     ·菌落形态特征和生理生化特征第32-35页
     ·各降解细菌的16S rRNA 序列分析第35-49页
 3 小结第49-50页
第三章 短小芽孢杆菌S59 产角蛋白酶发酵培养基的优化第50-70页
 1 材料与方法第50-55页
   ·材料第50-51页
     ·菌株第50页
     ·培养基第50页
     ·培养条件第50-51页
     ·主要仪器第51页
   ·方法第51-55页
     ·角蛋白酶活性测定方法的确立第51-52页
       ·以有机溶剂处理的羽毛角蛋白作为底物制作标准曲线第51页
       ·最适反应pH 的确定第51页
       ·最适反应时间的确定第51-52页
       ·最适反应温度的确定第52页
     ·羽毛角蛋白降解细菌角蛋白酶活性的测定第52页
     ·S59 菌株角蛋白酶发酵培养基的优化第52-55页
       ·不同缓效碳源对角蛋白酶活性的影响第52页
       ·不同速效碳源对角蛋白酶活性的影响第52-53页
       ·不同有机氮源对角蛋白酶活性的影响第53页
       ·不同无机氮源对角蛋白酶活性的影响第53页
       ·不同的C/N 比对角蛋白酶活性的影响第53页
       ·不同无机盐对角蛋白酶活性的影响第53-54页
       ·部分因子试验设计第54页
       ·中心组合试验设计第54-55页
       ·验证试验第55页
 2 结果第55-68页
   ·角蛋白酶活性测定方法的确立第55-58页
     ·以有机溶剂处理的羽毛角蛋白作为底物的标准曲线第55-56页
     ·最适反应pH第56页
     ·最适反应时间第56页
     ·最适反应温度第56-58页
   ·羽毛角蛋白降解细菌的角蛋白酶活性第58页
   ·S59 菌株角蛋白酶发酵培养基的优化第58-68页
     ·不同缓效碳源对角蛋白酶活性的影响第58-59页
     ·不同速效碳源对角蛋白酶活性的影响第59-60页
     ·不同有机氮源对角蛋白酶活性的影响第60页
     ·不同无机氮源对角蛋白酶活性的影响第60-61页
     ·不同的C/N 比对角蛋白酶活性的影响第61-62页
     ·不同无机盐对角蛋白酶活性的影响第62-63页
     ·部分因子试验设计第63-66页
     ·中心组合试验设计第66-68页
     ·优化结果的验证第68页
 3 小结第68-70页
第四章 讨论与结论第70-77页
 1 讨论第70-74页
   ·蛋白质的检测方法与丝胶蛋白降解细菌的筛选第70-71页
   ·丝胶蛋白降解细菌REP-PCR 基因指纹分析第71-72页
   ·羽毛角蛋白降解细菌的筛选、鉴定第72-73页
   ·短小芽孢杆菌S59 角蛋白酶活性测定方法的筛选第73-74页
   ·短小芽孢杆菌S59 角蛋白酶发酵培养基的优化第74页
 2 结论第74-77页
   ·丝胶蛋白降解细菌的筛选第74-75页
   ·丝胶蛋白降解细菌REP-PCR 基因指纹分析第75页
   ·羽毛角蛋白降解细菌的筛选、鉴定第75页
   ·短小芽孢杆菌S59 角蛋白酶活性测定方法的确立第75页
   ·短小芽孢杆菌S59 角蛋白酶发酵培养基的优化第75-77页
参考文献第77-87页
附录一 标准曲线的一元线性回归方程显著性检验的SAS 程序第87-88页
附录二 39个家蚕丝胶蛋白降解细菌的降解效果数据的显著性检验的SAS程序第88-89页
附录三 39 个家蚕丝胶蛋白降解细菌采用类平均法聚类的SAS 程序第89-90页
致谢第90-91页
硕士期间发表论文第91页

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