| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 插图和附表清单 | 第8-10页 |
| 1 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 立题背景与意义 | 第10-11页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第11-18页 |
| 1.2.1 海胆肠道内微生物研究现状 | 第11-12页 |
| 1.2.2 PCR-DGGE技术的原理及优越性 | 第12-14页 |
| 1.2.3 褐藻胶的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.4 褐藻胶的降解方法 | 第16-18页 |
| 1.3 本课题研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 海胆肠道混合微生物的PCR-DGGE分析 | 第19-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 实验动物与试剂 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-29页 |
| 2.2.1 巨藻的处理 | 第19-20页 |
| 2.2.2 海胆的养殖与解剖 | 第20页 |
| 2.2.3 肠道总DNA的提取 | 第20-22页 |
| 2.2.4 海胆肠道微生物总DNA 16SrDNA V3区的PCR扩增 | 第22页 |
| 2.2.5 16S rDNA片段的扩增 | 第22-23页 |
| 2.2.6 16S rDNA V3区片段的扩增 | 第23-24页 |
| 2.2.7 DNA的定性检测 | 第24页 |
| 2.2.8 PCR后的DNA片段的纯化 | 第24页 |
| 2.2.9 DGGE技术 | 第24-27页 |
| 2.2.10 DGGE胶中条带回收与测序 | 第27-29页 |
| 2.2.11 DGGE胶条带的分析 | 第29页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第29-37页 |
| 2.3.1 海胆养殖与解剖 | 第29-30页 |
| 2.3.2 海胆肠道微生物总DNA的提取 | 第30-32页 |
| 2.3.3 海胆肠道微生物总DNA 16SrDNA V3区的PCR扩增 | 第32-33页 |
| 2.3.4 PCR-DGGE电泳图谱 | 第33-34页 |
| 2.3.5 DGGE条带测序及分析 | 第34-37页 |
| 2.4 小结 | 第37-38页 |
| 3 海胆肠道中产褐藻胶裂解酶菌的筛选 | 第38-46页 |
| 3.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第38页 |
| 3.1.2 培养基 | 第38-39页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-41页 |
| 3.2.1 胆肠道中降解褐藻酸钠菌株的筛选 | 第39-40页 |
| 3.2.2 分离菌的鉴定 | 第40-41页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第41-45页 |
| 3.3.1 菌种的初筛结果 | 第41-42页 |
| 3.3.2 菌株的复筛结果 | 第42页 |
| 3.3.3 分离菌形态及染色特点 | 第42-43页 |
| 3.3.4 分离菌的生化试验结果 | 第43-44页 |
| 3.3.5 分子生物学鉴定结果 | 第44-45页 |
| 3.4 小结 | 第45-46页 |
| 4 C2菌株产褐藻胶裂解酶条件的探索 | 第46-55页 |
| 4.1 实验材料 | 第46页 |
| 4.1.1 C2菌株 | 第46页 |
| 4.1.2 试剂 | 第46页 |
| 4.1.3 摇瓶发酵培养基 | 第46页 |
| 4.1.4 主要仪器与设备 | 第46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-48页 |
| 4.2.1 C2菌株生长曲线的测定 | 第46-47页 |
| 4.2.2 C2菌株的生长和产酶曲线的绘制 | 第47页 |
| 4.2.3 不同种类碳源对C2菌株生长及产酶的影响 | 第47页 |
| 4.2.4 不同浓度褐藻酸钠对C2菌株生长及产酶的影响 | 第47页 |
| 4.2.5 不同种类氮源对C2菌株生长及产酶的影响 | 第47页 |
| 4.2.6 不同浓度(NH_4)_2SO_4对C2菌株生长及产酶的影响 | 第47页 |
| 4.2.7 不同NaCl浓度对C2菌株生长及产酶的影响 | 第47页 |
| 4.2.8 发酵液初始pH值对C2菌株生长及产酶的影响 | 第47-48页 |
| 4.2.9 发酵培养基的正交优化 | 第48页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第48-54页 |
| 4.3.1 C2菌株种子培养基的生长曲线 | 第48页 |
| 4.3.2 C2菌株的生长和产酶曲线的绘制 | 第48-49页 |
| 4.3.3 不同种类碳源及不同浓度褐藻酸钠对生长和产酶的影响 | 第49-51页 |
| 4.3.4 不同种类氮源及不同浓度硫酸铵对生长和产酶的的影响 | 第51-52页 |
| 4.3.5 不同NaCl浓度对产酶的影响 | 第52-53页 |
| 4.3.6 发酵液初始pH值对产酶的影响 | 第53-54页 |
| 4.3.7 培养基的正交优化 | 第54页 |
| 4.4 小结 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
