摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩略语 | 第9-12页 |
前言 | 第12-14页 |
第一部分 :过表达hIAPP大鼠胰岛素瘤细胞系(hIAPP-INS1)模型的建立 | 第14-23页 |
1 材料与方法 | 第14-19页 |
1.1 材料 | 第14-16页 |
1.1.1 研究对象 | 第14页 |
1.1.2 试剂与耗材 | 第14-15页 |
1.1.3 主要仪器 | 第15-16页 |
1.2 方法 | 第16-19页 |
1.2.1 配制INS1细胞专用培养基 | 第16页 |
1.2.2 INS1细胞培养 | 第16页 |
1.2.3 INS1细胞转染 | 第16-17页 |
1.2.4 INS1细胞筛选 | 第17页 |
1.2.5 hIAPP-INS1细胞RNA的提取及hIAPPqRT-PCR反应 | 第17-18页 |
1.2.6 硫代硫磺素S荧光染色及荧光强度 | 第18-19页 |
1.2.7 结果分析与统计学处理 | 第19页 |
2 结果 | 第19-22页 |
2.1 qRT-PCR方法对比hIAPP表达情况 | 第19-20页 |
2.2 硫代硫磺素S荧光染色及荧光强度情况 | 第20-22页 |
3 结论 | 第22-23页 |
第二部分:缺氧对hIAPP-INS1细胞内hIAPP沉积及其胰岛素分泌功能影响的实验研究 | 第23-41页 |
4 材料与方法 | 第23-28页 |
4.1 材料 | 第23-25页 |
4.1.1 研究对象 | 第23页 |
4.1.2 主要试剂与耗材 | 第23-24页 |
4.1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
4.2 方法 | 第25-28页 |
4.2.1 细胞培养 | 第25页 |
4.2.2 缺氧模型的建立 | 第25页 |
4.2.3 MTS检测不同缺氧时间段细胞增殖活性 | 第25页 |
4.2.4 不同缺氧时间段硫代硫磺素S荧光染色及荧光强度 | 第25-26页 |
4.2.5 酶联免疫吸附法检测不同缺氧时间段胰岛素分泌能力的变化 | 第26-27页 |
4.2.6 蛋白印记实验检测自噬相关蛋白表达 | 第27-28页 |
4.2.7 结果分析与统计学处理 | 第28页 |
5 结果 | 第28-36页 |
5.1 MTS 法检测不同缺氧时间段细胞增殖活性差异 | 第28-29页 |
5.2 不同缺氧时间段硫代硫磺素S染色变化情况及荧光强度对比 | 第29-32页 |
5.3 酶联免疫吸附法检测不同缺氧时间段胰岛素分泌能力变化情况 | 第32-34页 |
5.4 蛋白印记实验检测自噬相关蛋白表达结果 | 第34-36页 |
6 结论 | 第36-37页 |
7 讨论 | 第37-41页 |
本研究创新性的自我评价 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-45页 |
综述 | 第45-53页 |
参考文献 | 第49-53页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
个人简介 | 第55页 |