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小檗碱抗肿瘤活性筛选及作用机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
英文缩略词第10-11页
1 前言第11-20页
    1.1 小檗碱第11-12页
    1.2 结肠癌第12页
    1.3 CMap第12-14页
    1.4 线粒体凋亡通路第14-16页
    1.5 PI3K/AKT/mTOR通路第16页
    1.6 Notch信号通路第16-18页
    1.7 实验课题的研究方法和意义第18-20页
2 CMap比对寻找小檗碱促进结肠癌细胞凋亡的作用机制第20-59页
    引言第20-21页
    2.1 实验材料第21-26页
        2.1.1 实验细胞株第21页
        2.1.2 实验仪器与设备第21-22页
        2.1.3 药品与主要试剂第22-23页
        2.1.4 细胞培养试剂的配制及储存第23-24页
        2.1.5 Westernblot相关试剂的配制及储存第24-26页
        2.1.6 其它溶液第26页
    2.2 实验方法第26-40页
        2.2.1 细胞培养第26-29页
        2.2.2 测定小檗碱的基因表达谱数据第29-30页
        2.2.3 CCK-8法检测小檗碱对不同细胞的抗肿瘤活性第30页
        2.2.4 细胞形态学观察第30-31页
        2.2.5 Hoechst33342染色第31-32页
        2.2.6 AnnexinV/PI双染色检测细胞凋亡第32-33页
        2.2.7 Rhodamine123检测线粒体膜电位第33页
        2.2.8 DNA含量检测试剂盒(细胞周期)第33-34页
        2.2.9 CellularThermalShiftAssay第34-35页
        2.2.10 免疫印迹法第35-40页
    2.3 实验结果第40-55页
        2.3.1 小檗碱基因表达谱数据与CMap数据库比对第40-41页
        2.3.2 CCK-8 法测定小檗碱对多种肿瘤细胞的抗肿瘤作用第41-42页
        2.3.3 细胞形态学观察及Hoechst33342染色第42页
        2.3.4 AnnexinV/PI双染色检测细胞凋亡率第42-44页
        2.3.5 线粒体膜电位及Westernblot检测线粒体凋亡途径相关蛋白第44-45页
        2.3.6 Hsp90抑制剂相关验证第45-47页
        2.3.7 HDAC抑制剂相关验证第47-48页
        2.3.8 小檗碱与Hsp90抑制剂17-AAG,HDAC抑制剂SAHA联合使用第48-51页
        2.3.9 PI3K/AKT/mTOR通路相关验证第51-53页
        2.3.10 小檗碱可以抑制Notch1通路上各蛋白的表达,上调PTEN蛋白的表达第53-55页
    2.4 讨论第55-58页
    2.5 小结第58-59页
3 结论第59-60页
参考文献第60-66页
个人简历、在学期间发表的学术论文第66-67页
致谢第67页

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