摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略词 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-20页 |
1.1 小檗碱 | 第11-12页 |
1.2 结肠癌 | 第12页 |
1.3 CMap | 第12-14页 |
1.4 线粒体凋亡通路 | 第14-16页 |
1.5 PI3K/AKT/mTOR通路 | 第16页 |
1.6 Notch信号通路 | 第16-18页 |
1.7 实验课题的研究方法和意义 | 第18-20页 |
2 CMap比对寻找小檗碱促进结肠癌细胞凋亡的作用机制 | 第20-59页 |
引言 | 第20-21页 |
2.1 实验材料 | 第21-26页 |
2.1.1 实验细胞株 | 第21页 |
2.1.2 实验仪器与设备 | 第21-22页 |
2.1.3 药品与主要试剂 | 第22-23页 |
2.1.4 细胞培养试剂的配制及储存 | 第23-24页 |
2.1.5 Westernblot相关试剂的配制及储存 | 第24-26页 |
2.1.6 其它溶液 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-40页 |
2.2.1 细胞培养 | 第26-29页 |
2.2.2 测定小檗碱的基因表达谱数据 | 第29-30页 |
2.2.3 CCK-8法检测小檗碱对不同细胞的抗肿瘤活性 | 第30页 |
2.2.4 细胞形态学观察 | 第30-31页 |
2.2.5 Hoechst33342染色 | 第31-32页 |
2.2.6 AnnexinV/PI双染色检测细胞凋亡 | 第32-33页 |
2.2.7 Rhodamine123检测线粒体膜电位 | 第33页 |
2.2.8 DNA含量检测试剂盒(细胞周期) | 第33-34页 |
2.2.9 CellularThermalShiftAssay | 第34-35页 |
2.2.10 免疫印迹法 | 第35-40页 |
2.3 实验结果 | 第40-55页 |
2.3.1 小檗碱基因表达谱数据与CMap数据库比对 | 第40-41页 |
2.3.2 CCK-8 法测定小檗碱对多种肿瘤细胞的抗肿瘤作用 | 第41-42页 |
2.3.3 细胞形态学观察及Hoechst33342染色 | 第42页 |
2.3.4 AnnexinV/PI双染色检测细胞凋亡率 | 第42-44页 |
2.3.5 线粒体膜电位及Westernblot检测线粒体凋亡途径相关蛋白 | 第44-45页 |
2.3.6 Hsp90抑制剂相关验证 | 第45-47页 |
2.3.7 HDAC抑制剂相关验证 | 第47-48页 |
2.3.8 小檗碱与Hsp90抑制剂17-AAG,HDAC抑制剂SAHA联合使用 | 第48-51页 |
2.3.9 PI3K/AKT/mTOR通路相关验证 | 第51-53页 |
2.3.10 小檗碱可以抑制Notch1通路上各蛋白的表达,上调PTEN蛋白的表达 | 第53-55页 |
2.4 讨论 | 第55-58页 |
2.5 小结 | 第58-59页 |
3 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |