| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 分子营养学的发展 | 第12-13页 |
| 1.2 凡纳滨对虾养殖现状 | 第13页 |
| 1.3 TOR信号通路研究现状 | 第13-15页 |
| 1.4 TOR信号通路中信号的传导与调节 | 第15-18页 |
| 1.4.1 TORC1信号通路中上游信号的传导与调节 | 第15-16页 |
| 1.4.2 TORC1信号通路中下游信号的传导与调节 | 第16-17页 |
| 1.4.3 TORC2信号通路中信号的传导与调节 | 第17-18页 |
| 1.5 甲壳动物TOR信号通路研究现状 | 第18页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
| 第二章 TOR信号通路抑制对凡纳滨对虾基因表达的影响分析 | 第20-42页 |
| 2.1 引言 | 第20-21页 |
| 2.2 材料方法 | 第21-27页 |
| 2.2.1 实验动物与样品采集 | 第21-22页 |
| 2.2.2 RNA定量及质量检测 | 第22-23页 |
| 2.2.3 转录本拼接及功能注释 | 第23页 |
| 2.2.4 差异表达分析 | 第23页 |
| 2.2.5 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证 | 第23-25页 |
| 2.2.6 WesternBlot分析 | 第25-27页 |
| 2.2.7 数据统计分析 | 第27页 |
| 2.3 实验结果 | 第27-36页 |
| 2.3.1 转录组测序 | 第27-28页 |
| 2.3.2 转录本拼接 | 第28页 |
| 2.3.3 Unigene库序列比对 | 第28-29页 |
| 2.3.4 基因功能注释 | 第29-30页 |
| 2.3.5 差异基因分析 | 第30-32页 |
| 2.3.6 TOR信号通路调节相关基因 | 第32-33页 |
| 2.3.7 转录组分析结果的验证 | 第33-34页 |
| 2.3.8 WesternBlot分析 | 第34-36页 |
| 2.4 讨论 | 第36-40页 |
| 2.5 小结 | 第40-42页 |
| 第三章 rheb基因的克隆及功能的初步研究 | 第42-54页 |
| 3.1 引言 | 第42-43页 |
| 3.2 材料方法 | 第43-46页 |
| 3.2.1 实验动物与培养条件 | 第43页 |
| 3.2.2 基因组织特异性表达样品采集 | 第43页 |
| 3.2.3 雷帕霉素注射 | 第43页 |
| 3.2.4 饥饿后氨基酸注射以及雷帕霉素的注射 | 第43-44页 |
| 3.2.5 rheb基因序列的克隆 | 第44-45页 |
| 3.2.6 序列特征及多序列比对 | 第45页 |
| 3.2.7 基因表达分析 | 第45-46页 |
| 3.2.8 数据统计分析 | 第46页 |
| 3.3 实验结果 | 第46-51页 |
| 3.3.1 rheb基因序列特征 | 第46-47页 |
| 3.3.2 Rheb蛋白的物理化学性质 | 第47页 |
| 3.3.3 凡纳滨对虾Rheb蛋白序列特征及其与已知Rheb序列的对比 | 第47-49页 |
| 3.3.4 rheb基因的组织特异性表达 | 第49页 |
| 3.3.5 雷帕霉素注射对rheb基因表达的影响 | 第49-50页 |
| 3.3.6 饥饿、氨基酸注射以及雷帕霉素注射对rheb基因表达的影响 | 第50-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-53页 |
| 3.5 小结 | 第53-54页 |
| 第四章 Raptor在TOR通路中作用机制的初步研究 | 第54-66页 |
| 4.1 引言 | 第54-55页 |
| 4.2 材料方法 | 第55-59页 |
| 4.2.1 实验动物与培养条件 | 第55页 |
| 4.2.2 雷帕霉素注射 | 第55页 |
| 4.2.3 饥饿后氨基酸注射以及雷帕霉素的注射 | 第55页 |
| 4.2.4 RNA干扰 | 第55-58页 |
| 4.2.5 WesternBlot分析 | 第58-59页 |
| 4.3 实验结果 | 第59-63页 |
| 4.3.1 雷帕霉素注射对raptor基因表达的影响 | 第59页 |
| 4.3.2 饥饿、氨基酸注射以及雷帕霉素注射对raptor基因表达的影响 | 第59-60页 |
| 4.3.3 RNA干扰效果 | 第60-61页 |
| 4.3.4 raptor的RNA干扰对TOR通路关键基因表达量的影响 | 第61-62页 |
| 4.3.5 raptor的RNA干扰对TOR信号通路关键蛋白磷酸化水平的影响 | 第62-63页 |
| 4.4 讨论 | 第63-64页 |
| 4.5 小结 | 第64-66页 |
| 第五章 结论、创新点与展望 | 第66-68页 |
| 5.1 主要结论 | 第66-67页 |
| 5.2 创新点 | 第67页 |
| 5.3 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第82页 |
