| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 插图清单 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-17页 |
| 1 EIAV简介 | 第10页 |
| 2 病毒的趋向性及EIAV的趋向性 | 第10-12页 |
| 3 EIAV是第一个被认为有可能是EIAV受体的宿主细胞膜蛋白 | 第12-13页 |
| 4 CyclinT1是EIAV/HIV胞内复制的内源性辅助蛋白 | 第13-14页 |
| 5 转基因技术简介 | 第14-15页 |
| 6 HIV小动物模型研究进展 | 第15页 |
| 7 本实验的研究目的和意义 | 第15-17页 |
| 第一章 ELR1及e-cycT1转基因小鼠的构建及基因型的检测 | 第17-25页 |
| 1 材料 | 第17-18页 |
| 1.1 载体与菌株 | 第17页 |
| 1.2 生化与分子生物学试剂 | 第17页 |
| 1.3 主要仪器 | 第17页 |
| 1.4 主要溶液 | 第17页 |
| 1.5 实验动物 | 第17页 |
| 1.6 软件 | 第17-18页 |
| 2 方法 | 第18-21页 |
| 2.1 质粒转化 | 第18页 |
| 2.2 质粒小提 | 第18页 |
| 2.3 质粒大提 | 第18-19页 |
| 2.4 小鼠原核显微注射及回交 | 第19-20页 |
| 2.5 鼠尾基因组DNA的提取 | 第20页 |
| 2.6 小鼠基因型的PCR鉴定 | 第20-21页 |
| 3 结果 | 第21-22页 |
| 3.1 转基因载体的制备 | 第21页 |
| 3.2 各代次转基因小鼠基因型的PCR鉴定 | 第21-22页 |
| 4 讨论 | 第22-23页 |
| 4.1 关于回交 | 第22-23页 |
| 4.2 关于ELR1和e-cycT1 | 第23页 |
| 5 小结 | 第23-25页 |
| 第二章 ELR1及e-cycT1转基因小鼠基因表达的检测 | 第25-34页 |
| 1 材料 | 第25页 |
| 1.1 载体 | 第25-26页 |
| 1.2 生化与分子生物学试剂 | 第25页 |
| 1.3 主要仪器 | 第25页 |
| 1.4 主要溶液 | 第25页 |
| 1.5 实验动物 | 第25-26页 |
| 1.6 软件 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-30页 |
| 2.1 小鼠各组织ELR1及e-cycT1 mRNA的Real-Time PCR检测 | 第26-28页 |
| 2.2 小鼠各组织ELR1及e-cycT1 mRNA的Fisher原位杂交检测 | 第28页 |
| 2.3 小鼠各组织ELR1及e-cycT1蛋白的Western blotting检测 | 第28-30页 |
| 3 结果 | 第30-32页 |
| 3.1 ELR1及e-cycT1在转基因小鼠体内的转录 | 第30-31页 |
| 3.2 ELR1及e-cycT1在转基因小鼠体内的翻译 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-33页 |
| 5 小结 | 第33-34页 |
| 第三章 ELR1及e-cycT1转基因小鼠的体内病毒感染实验 | 第34-43页 |
| 1 材料 | 第34-35页 |
| 1.1 载体与毒株 | 第34页 |
| 1.2 生化与分子生物学试剂 | 第34页 |
| 1.3 主要仪器 | 第34页 |
| 1.4 主要溶液 | 第34页 |
| 1.5 实验动物 | 第34-35页 |
| 1.6 软件 | 第35页 |
| 2 方法 | 第35-37页 |
| 2.1 小鼠体内攻毒以及全血和组织的采取 | 第35页 |
| 2.2 小鼠各组织中EIAV gag基因mRNA的Real-Time PCR检测以及Fisher原位杂交检测 | 第35页 |
| 2.3 小鼠组织中EIAV P26蛋白的免疫组化检测 | 第35-36页 |
| 2.4 小鼠外周血中EIAV gag基因mRNA的Real-Time PCR检测 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-40页 |
| 3.1 转基因小鼠各组织中EIAV前病毒的转录 | 第37-39页 |
| 3.2 转基因小鼠各组织中EIAV前病毒的翻译 | 第39页 |
| 3.3 转基因小鼠外周血中EIAV的检测 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 4.1 ELR1/e-cycTl转基因小鼠为HIV-1转基因小鼠模型提供了重要参考 | 第40页 |
| 4.2 胞内限制蛋白是除特异性受体外决定病毒趋向性的关键因素 | 第40-41页 |
| 4.3 马体内ELR1的分布和EIAV的组织细胞趋向性/嗜性还需进一步确认 | 第41-42页 |
| 5 小结 | 第42-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
