中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
前言 | 第11-13页 |
文献综述 | 第13-29页 |
第1章 FADD 基因的研究进展 | 第13-22页 |
1.1 FADD 基因概述 | 第13-14页 |
1.2 FADD 的结构 | 第14页 |
1.3 FADD 基因的生物学活性 | 第14-20页 |
1.3.1 FADD 在细胞凋亡过程中作用机制 | 第14-16页 |
1.3.2 FADD 在细胞凋亡过程中的调控因素 | 第16-18页 |
1.3.3 FADD 胚胎发育过程中的作用 | 第18-19页 |
1.3.4 FADD 在 T 细胞增殖中的作用 | 第19-20页 |
1.3.5 FADD 炎症反应中的作用 | 第20页 |
1.4 FADD 的展望 | 第20-22页 |
第2章 RNAI 技术的研究进展 | 第22-26页 |
2.1 RNAI 的发现 | 第22页 |
2.2 RNAI 的作用机制与特性 | 第22-24页 |
2.2.1 RNAi 的作用机制 | 第22-23页 |
2.2.2 RNAi 的特性 | 第23-24页 |
2.3 RNAI 技术的重要环节 | 第24页 |
2.3.1 siRNA 序列的设计 | 第24页 |
2.3.2 siRNA 的转染 | 第24页 |
2.4 RNAI 的应用前景 | 第24-26页 |
2.4.1 RNAi 抑制肿瘤的应用 | 第24-25页 |
2.4.2 RNAi 在基因治疗的应用 | 第25页 |
2.4.3 RNAI 技术在信号通路中的应用 | 第25-26页 |
第3章 卵泡颗粒细胞的分离培养概述 | 第26-29页 |
3.1 卵泡颗粒细胞与卵泡闭锁 | 第26-27页 |
3.2 影响卵泡颗粒细胞增殖与分化的因素 | 第27-28页 |
3.2.1 卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成激素(LH) | 第27页 |
3.2.2 促性腺激素释放激素 | 第27页 |
3.2.3 细胞因子的作用 | 第27-28页 |
3.3 卵泡颗粒细胞的体外培养及影响因素 | 第28-29页 |
研究内容 | 第29-65页 |
第1章 牛卵泡颗粒细胞的分离培养 | 第29-35页 |
1.1 材料与方法 | 第29-33页 |
1.1.1 材料 | 第29-30页 |
1.1.2 方法 | 第30-33页 |
1.2 结果与分析 | 第33-34页 |
1.2.1 分离培养的牛卵泡颗粒细胞的形态学观察 | 第33页 |
1.2.2 G418 对牛卵泡颗粒细胞的毒性试验结果 | 第33-34页 |
1.3 讨论 | 第34页 |
1.4 小结 | 第34-35页 |
第2章 牛 FADD 基因的克隆及真核表达载体及 RNAI 载体的构建 | 第35-50页 |
2.1 材料与方法 | 第35-46页 |
2.1.1 材料 | 第35-37页 |
2.1.2 方法 | 第37-46页 |
2.2 结果与分析 | 第46-49页 |
2.2.1 牛卵巢总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第46页 |
2.2.2 牛 FADD 基因的 TA 克隆与测序结果分析 | 第46-47页 |
2.2.3 牛 FADD 基因真核表达载体 pAcGFP-N1-FADD 的构建及鉴定 | 第47-49页 |
2.3 讨论 | 第49页 |
2.4 小结 | 第49-50页 |
第3章 FADD 基因在牛卵泡颗粒细胞及成纤维细胞中的表达研究 | 第50-65页 |
3.1 材料与方法 | 第50-57页 |
3.1.1 材料 | 第50-51页 |
3.1.2 实验方法 | 第51-57页 |
3.2 结果与分析 | 第57-63页 |
3.2.1 G418 对牛胎儿成纤维细胞细胞的毒性试验结果 | 第57页 |
3.2.2 牛 FADD 基因 RNAi 载体和真核表达载体 pAcGFP-N1-FADD 转染及荧光观察 | 第57-59页 |
3.2.3 牛卵泡颗粒细胞的阳性细胞的 RT-PCR 检测 | 第59-60页 |
3.2.4 外源基因转录产物的 Real-Time QPCR 检测 | 第60-61页 |
3.2.5 表达产物的 Western blot 检测 | 第61-63页 |
3.2.6 细胞凋亡检测结果 | 第63页 |
3.3 讨论 | 第63-64页 |
3.4 小结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-69页 |
导师简介 | 第69-70页 |
攻读学位期间发表的学术论文及研究成果 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |