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蓖麻耐盐基因RcSOS1功能分析

摘要第4-5页
abstract第5-6页
第一章 引言第13-20页
    1.1 植物盐害和植物耐盐机制第13-16页
        1.1.1 植物盐害第13页
        1.1.2 植物耐盐分子机制第13-16页
    1.2 质膜型Na~+/H~+逆向转运蛋白基因研究进展第16-17页
        1.2.1 SOS1蛋白的分子结构及功能第16-17页
        1.2.2 SOS1基因在耐盐基因工程中的应用第17页
    1.3 植物毛状根研究进展第17-18页
        1.3.1 植物毛状根诱导及其应用第17-18页
        1.3.2 植物毛状根再生及其应用第18页
    1.4 本研究的目的和意义第18-20页
第二章 蓖麻RcSOS1基因的克隆及序列分析第20-36页
    2.1 材料与方法第20-25页
        2.1.1 试验材料第20页
        2.1.2 试验试剂第20页
        2.1.3 试验仪器第20页
        2.1.4 蓖麻总RNA的提取第20-21页
        2.1.5 蓖麻cDNA第一条链合成第21-22页
        2.1.6 引物设计第22页
        2.1.7 蓖麻RcSOS1基因片段及全长克隆第22-23页
        2.1.8 蓖麻RcSOS1基因胶回收第23页
        2.1.9 蓖麻RcSOS1基因与克隆载体连接第23-24页
        2.1.10 蓖麻RcSOS1基因转化大肠杆菌感受态细胞第24页
        2.1.11 阳性菌蓝白斑筛选与培养第24页
        2.1.12 阳性菌PCR反应第24页
        2.1.13 重组质粒提取第24-25页
        2.1.14 重组质粒双酶切鉴定第25页
        2.1.15 蓖麻RcSOS1基因测序第25页
    2.2 结果与分析第25-36页
        2.2.1 蓖麻总RNA提取第25页
        2.2.2 蓖麻RcSOS1基因的克隆第25-26页
        2.2.3 蓖麻RcSOS1基因菌液PCR鉴定第26-27页
        2.2.4 蓖麻RcSOS1基因重组载体双酶切鉴定第27-28页
        2.2.5 蓖麻RcSOS1基因克隆及序列分析第28-36页
第三章 蓖麻RcSOS1基因转烟草功能分析第36-50页
    3.1 材料与方法第36-42页
        3.1.1 试验材料第36页
        3.1.2 试验试剂第36页
        3.1.3 试验仪器第36页
        3.1.4 植物超表达载体构建第36-38页
        3.1.5 蓖麻RcSOS1基因洋葱表皮亚细胞定位第38-39页
        3.1.6 通过烟草毛状根遗传转化分析RcSOS1基因功能第39-42页
    3.2 结果与分析第42-50页
        3.2.1 植物超表达载体pCG-1301-RcSOS1构建第42页
        3.2.2 蓖麻RcSOS1基因洋葱表皮亚细胞定位第42-43页
        3.2.3 发根农杆菌Ri质粒PCR检测第43-44页
        3.2.4 烟草毛状根遗传转化体系建立与检测第44-46页
        3.2.5 转RcSOS1基因烟草检测与筛选第46-47页
        3.2.6 转RcSOS1基因烟草(T_2)与野生型烟草盐胁迫试验结果第47页
        3.2.7 转RcSOS1基因烟草PCR检测与分析第47-48页
        3.2.8 烟草Na~+、K~+含量测定结果第48-49页
        3.2.9 烟草MDA含量、Proline含量与REL的比较第49-50页
第四章 过量表达RcSOS1基因蓖麻毛状根功能分析第50-58页
    4.1 材料与方法第50-52页
        4.1.1 试验材料第50页
        4.1.2 试验试剂第50页
        4.1.3 试验仪器第50页
        4.1.4 蓖麻毛状根的诱导第50-51页
        4.1.5 蓖麻毛状根DNA提取及PCR检测第51-52页
        4.1.6 转RcSOS1基因毛状根诱导第52页
        4.1.7 转RcSOS1基因毛状根DNA提取及PCR检测第52页
        4.1.8 蓖麻毛状根盐胁迫试验第52页
    4.2 结果分析第52-58页
        4.2.1 预培养时间和菌液侵染时间对蓖麻毛状根诱导效率的影响第52-53页
        4.2.2 乙酰丁香酮(AS)浓度和发根菌株对蓖麻毛根的诱导率的影响第53-54页
        4.2.3 发根农杆菌侵染无菌苗第54-55页
        4.2.4 转RcSOS1基因农杆菌PCR检测第55-56页
        4.2.5 蓖麻毛状根RcSOS1基因PCR检测第56页
        4.2.6 过表达RcSOS1基因毛状根盐胁迫试验结果第56-58页
第五章 结论与讨论第58-60页
    5.1 结论第58页
    5.2 讨论第58-60页
        5.2.1 植物质膜型Na~+/H~+逆向转运蛋白与耐盐性第58-59页
        5.2.2 植物毛状根遗传转化体系的构建第59-60页
参考文献第60-66页
致谢第66-67页
作者简介第67页

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