摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第一章 引言 | 第13-20页 |
1.1 植物盐害和植物耐盐机制 | 第13-16页 |
1.1.1 植物盐害 | 第13页 |
1.1.2 植物耐盐分子机制 | 第13-16页 |
1.2 质膜型Na~+/H~+逆向转运蛋白基因研究进展 | 第16-17页 |
1.2.1 SOS1蛋白的分子结构及功能 | 第16-17页 |
1.2.2 SOS1基因在耐盐基因工程中的应用 | 第17页 |
1.3 植物毛状根研究进展 | 第17-18页 |
1.3.1 植物毛状根诱导及其应用 | 第17-18页 |
1.3.2 植物毛状根再生及其应用 | 第18页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
第二章 蓖麻RcSOS1基因的克隆及序列分析 | 第20-36页 |
2.1 材料与方法 | 第20-25页 |
2.1.1 试验材料 | 第20页 |
2.1.2 试验试剂 | 第20页 |
2.1.3 试验仪器 | 第20页 |
2.1.4 蓖麻总RNA的提取 | 第20-21页 |
2.1.5 蓖麻cDNA第一条链合成 | 第21-22页 |
2.1.6 引物设计 | 第22页 |
2.1.7 蓖麻RcSOS1基因片段及全长克隆 | 第22-23页 |
2.1.8 蓖麻RcSOS1基因胶回收 | 第23页 |
2.1.9 蓖麻RcSOS1基因与克隆载体连接 | 第23-24页 |
2.1.10 蓖麻RcSOS1基因转化大肠杆菌感受态细胞 | 第24页 |
2.1.11 阳性菌蓝白斑筛选与培养 | 第24页 |
2.1.12 阳性菌PCR反应 | 第24页 |
2.1.13 重组质粒提取 | 第24-25页 |
2.1.14 重组质粒双酶切鉴定 | 第25页 |
2.1.15 蓖麻RcSOS1基因测序 | 第25页 |
2.2 结果与分析 | 第25-36页 |
2.2.1 蓖麻总RNA提取 | 第25页 |
2.2.2 蓖麻RcSOS1基因的克隆 | 第25-26页 |
2.2.3 蓖麻RcSOS1基因菌液PCR鉴定 | 第26-27页 |
2.2.4 蓖麻RcSOS1基因重组载体双酶切鉴定 | 第27-28页 |
2.2.5 蓖麻RcSOS1基因克隆及序列分析 | 第28-36页 |
第三章 蓖麻RcSOS1基因转烟草功能分析 | 第36-50页 |
3.1 材料与方法 | 第36-42页 |
3.1.1 试验材料 | 第36页 |
3.1.2 试验试剂 | 第36页 |
3.1.3 试验仪器 | 第36页 |
3.1.4 植物超表达载体构建 | 第36-38页 |
3.1.5 蓖麻RcSOS1基因洋葱表皮亚细胞定位 | 第38-39页 |
3.1.6 通过烟草毛状根遗传转化分析RcSOS1基因功能 | 第39-42页 |
3.2 结果与分析 | 第42-50页 |
3.2.1 植物超表达载体pCG-1301-RcSOS1构建 | 第42页 |
3.2.2 蓖麻RcSOS1基因洋葱表皮亚细胞定位 | 第42-43页 |
3.2.3 发根农杆菌Ri质粒PCR检测 | 第43-44页 |
3.2.4 烟草毛状根遗传转化体系建立与检测 | 第44-46页 |
3.2.5 转RcSOS1基因烟草检测与筛选 | 第46-47页 |
3.2.6 转RcSOS1基因烟草(T_2)与野生型烟草盐胁迫试验结果 | 第47页 |
3.2.7 转RcSOS1基因烟草PCR检测与分析 | 第47-48页 |
3.2.8 烟草Na~+、K~+含量测定结果 | 第48-49页 |
3.2.9 烟草MDA含量、Proline含量与REL的比较 | 第49-50页 |
第四章 过量表达RcSOS1基因蓖麻毛状根功能分析 | 第50-58页 |
4.1 材料与方法 | 第50-52页 |
4.1.1 试验材料 | 第50页 |
4.1.2 试验试剂 | 第50页 |
4.1.3 试验仪器 | 第50页 |
4.1.4 蓖麻毛状根的诱导 | 第50-51页 |
4.1.5 蓖麻毛状根DNA提取及PCR检测 | 第51-52页 |
4.1.6 转RcSOS1基因毛状根诱导 | 第52页 |
4.1.7 转RcSOS1基因毛状根DNA提取及PCR检测 | 第52页 |
4.1.8 蓖麻毛状根盐胁迫试验 | 第52页 |
4.2 结果分析 | 第52-58页 |
4.2.1 预培养时间和菌液侵染时间对蓖麻毛状根诱导效率的影响 | 第52-53页 |
4.2.2 乙酰丁香酮(AS)浓度和发根菌株对蓖麻毛根的诱导率的影响 | 第53-54页 |
4.2.3 发根农杆菌侵染无菌苗 | 第54-55页 |
4.2.4 转RcSOS1基因农杆菌PCR检测 | 第55-56页 |
4.2.5 蓖麻毛状根RcSOS1基因PCR检测 | 第56页 |
4.2.6 过表达RcSOS1基因毛状根盐胁迫试验结果 | 第56-58页 |
第五章 结论与讨论 | 第58-60页 |
5.1 结论 | 第58页 |
5.2 讨论 | 第58-60页 |
5.2.1 植物质膜型Na~+/H~+逆向转运蛋白与耐盐性 | 第58-59页 |
5.2.2 植物毛状根遗传转化体系的构建 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简介 | 第67页 |