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长链非编码RNA分子UCA1介导胃癌多药耐药的机制研究

缩略语表第5-9页
中文摘要第9-12页
英文摘要第12-15页
前言第16-17页
文献回顾第17-36页
第一部分 长链非编码RNA芯片筛选及UCA1的表达验证第36-47页
    引言第36页
    1 材料第36-37页
        1.1 细胞系第36-37页
        1.2 主要试剂第37页
        1.3 主要仪器第37页
    2 方法第37-40页
        2.1 细胞培养第37-38页
        2.2 Trizol法提取细胞总RNA第38页
        2.3 q RT-PCR验证lnc RNA的表达第38-40页
    3 结果第40-45页
    4 讨论第45-47页
第二部分 Lnc RNA UCA1对胃癌多药耐药的调节作用第47-57页
    引言第47页
    1 材料第47-49页
        1.1 细胞系第47页
        1.2 主要试剂第47-49页
        1.3 主要仪器第49页
    2 方法第49-51页
        2.1 细胞培养第49页
        2.2 X-treme GENE转染试剂转染si RNA或质粒第49-50页
        2.3 慢病毒稳转细胞系的构建第50页
        2.4 q RT-PCR检测UCA1的表达第50页
        2.5 MTT法检测细胞体外药物敏感性第50页
        2.6 流式细胞仪检测细胞凋亡第50-51页
        2.7 裸鼠皮下移植瘤模型观察肿瘤的体内药物敏感性第51页
    3 结果第51-56页
        3.1 稳定转染细胞系的建立第51-52页
        3.2 UCA1对胃癌细胞耐药性的影响第52-53页
        3.3 UCA1对胃癌细胞凋亡的调节第53-55页
        3.4 体内实验验证UCA1对胃癌细胞耐药的影响第55-56页
    4 讨论第56-57页
第三部分 UCA1作为ce RNA促进胃癌耐药的机制研究第57-76页
    引言第57页
    1 材料第57-59页
        1.1 细胞系第57页
        1.2 主要试剂第57-59页
        1.3 主要仪器第59页
    2 方法第59-65页
        2.1 原位杂交检测胃癌细胞内UCA1表达第59-60页
        2.2 胞核胞浆RNA分离第60页
        2.3 细胞mi RNA提取与q RT-PCR检测mi RNA表达第60-62页
        2.4 Western blot 检测蛋白表达第62页
        2.5 RNA结合蛋白免疫共沉淀(RIP)第62-64页
        2.6 双荧光素酶报告基因实验第64-65页
    3 结果第65-73页
        3.1 UCA1的细胞内定位研究第65-67页
        3.2 UCA1与mi RNA、蛋白相互作用的生物信息学预测第67-68页
        3.3 UCA1与AGO2、let-7e相互作用的的实验验证第68-70页
        3.4 let-7 及HMGA2的表达功能验证和let-7 下游靶分子验证第70-72页
        3.5 UCA1与HMGA2的相关分析及UCA1对HMGA2的表达调控验证第72-73页
    4 讨论第73-76页
小结第76-77页
参考文献第77-90页
附录第90-91页
个人简历和研究成果第91-92页
致谢第92-93页

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